(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211399559.7 (22)申请日 2022.11.09 (71)申请人 吉林大学 地址 130011 吉林省长 春市前进大街269 9 号 (72)发明人 李建华　王玉茹　李新　王晓岑　 张旭　张西臣　宫鹏涛　张楠　 (74)专利代理 机构 吉林长春新纪元专利代理有 限责任公司 2 2100 专利代理师 陈宏伟 (51)Int.Cl. A61K 45/00(2006.01) A61K 31/713(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 29/00(2006.01)A61P 33/10(2006.01) (54)发明名称 Toll样受体3在治疗华支睾吸虫性肝纤维化 的用途 (57)摘要 本发明公开了Toll样受体3在治疗华支睾吸 虫性肝纤维化的用途， 并通过使用T LR3激动剂缓 解华支睾吸虫性肝纤维化。 实验证明， TLR3高表 达调控宿主ERK/P38信号通路磷酸化， 抑制IL ‑6 的分泌， 从而降低华支睾吸虫感染导致的肝脏炎 症损伤， 降低肝纤维化； TT LR3激动剂处理进 一步 证实TLR3高表达阻断华支睾吸虫感染引 起小鼠 死亡、 减少肝脏荷虫量， 减轻了华支睾吸虫感染 所致的肝脏病变、 炎症及胆管病变； 减少华支睾 吸虫引起的肝脏肌成纤维细胞的活化数量， 缓解 肝脏纤维化。 TLR3作为未来开发治疗和预防华支 睾吸虫性肝纤维化的新药物和疫苗靶点， 均有较 好的应用前 景。 权利要求书1页 说明书6页 附图8页 CN 115487302 A 2022.12.20 CN 115487302 A 1.基于TLR3介导的宿主先天免疫制备在抗 华支睾吸虫感染药物中的用途。 2. Toll样受体3在制备治疗华支睾吸虫性 肝纤维化药物中的用途。 3.如权利要求1或2所述的药物为药典中涉及的任何药物剂型。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115487302 A 2Toll样受体3在治疗华支睾吸虫性肝纤维化的用途 技术领域 [0001]本发明涉及先天免疫受体Toll样受体3 （以下简称TLR3） 新的医药用途， 尤其是公 开了Toll样受体3在 治疗华支睾吸虫性肝纤维化的用途， 具体涉及 Toll样受体3及其激动 剂 在在治疗华支睾吸虫引起的肝纤维化中的应用， 属于生物医学制药技 术领域。 背景技术 [0002]华支睾吸虫病是由华支睾吸虫 （ Clonorchis  sinensis ） 寄生在人及动物的肝脏胆 管引起的一种重要的食源性人兽共患寄生虫病， 与肝纤维化、 肝硬化和胆管癌密切相关。 目 前尚无有效防控华支睾吸虫病的商业疫苗， 且尚无治疗或逆转华支睾吸虫导致肝纤维化的 针对性药物。 因此深入认识华支睾吸虫致肝纤维化的致病机理， 并基于此开发缓解华支睾 吸虫性肝纤维化的药物对华支睾吸虫病的防治至关重要。 发明内容 [0003]本发明的目的在于提供Toll样受体3在治疗华支睾吸虫性肝纤维化的用途， 基于 TLR3介导的宿主先天免疫在抗华支睾吸虫感染的治疗新用途， 并应用TLR3激动剂Poly （I: C） 对TLR3治疗华支睾吸虫性 肝纤维化的作用进行验证。 [0004]为实现上述目的， 本发明采用以下技 术方案： 建立华支睾吸虫感染致肝纤维化的小鼠模型， 检测小鼠存活率、 体重及肝内寄生 虫数量， 于感染的7天、 15天及35天收集小鼠肝脏， 检测感染小鼠肝脏病变、 胆管损伤及肝纤 维化变化等指标， 探 究TLR3治疗华支睾吸虫性肝纤维化的新作用。 基于TLR3在华支睾吸虫 致病中的作用， 并使用TLR3的激动剂Poly （I:C） 处理华支睾吸虫感染WT小鼠， 检测上述指 标， 验证探讨TLR3治疗华支睾吸虫性 肝纤维化的作用。 [0005]本发明所述的基于TLR3调节的免疫反应对华支睾吸虫致肝纤维化的治疗作用， 步 骤如下： 1. 华支睾吸虫致 肝纤维化小鼠模型的建立 将野生型 （WT） C57BL/6小鼠每组10只， 分成6组， 分别给予0个、 50个、 100个、 200个、 400个、 800个囊蚴/只。 攻虫当日及攻虫后每天称量并记录小鼠的体重及死亡率， 并在攻虫 后的7 d、 15 d和35 d分别安乐死小鼠， 取肝脏进行肝内荷虫量的统计， 以确定建立华支睾 吸虫致小鼠肝纤维化的囊蚴感染数量。 结果发现， 以200个囊蚴/鼠对C57BL/6小鼠感染华支 睾吸虫后， 小鼠肝内成虫回收率平均为13% ‑15%， 感染率为100%， 小鼠死亡率平均为40%。 感 染35天后出现明显的肝纤维化症状， 可以作为后续试验中华支睾吸虫致肝纤维化小鼠模型 建立的感染量。 [0006]2. TLR3缺失小鼠感染华支睾吸虫肝脏纤维化情况检测 建立华支睾吸虫致肝纤维化WT及TLR3缺失 （TLR3‑/‑） 小鼠模型， PBS处理的小鼠作 为阴性对照。 在感染后每天称量并记录小鼠的体重及死亡率， 并在攻虫后7d、 15d、 35  d分别 安乐死小鼠， 分离肝脏并进行肝内荷虫量的统计。 通过ELISA、 Western  blot、 病理切片、 免说　明　书 1/6 页 3 CN 115487302 A 3