(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211343043.0 (22)申请日 2022.10.31 (71)申请人 滨州医学院附属医院 地址 256600 山东省滨州市黄河二路6 61号 (72)发明人 宫凯凯　刘孟珊　张臻　赵曙光　 (74)专利代理 机构 济南方宇专利代理事务所 (普通合伙) 37251 专利代理师 史长敏 (51)Int.Cl. C07D 471/04(2006.01) A61K 31/4375(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61K 35/655(2015.01) (54)发明名称 一种海洋来源的萘啶类抗炎活性化合物及 其制备方法 (57)摘要 本发明涉及海洋生物及医药技术领域， 具体 地 说 ，涉 及 一 种 从 海 洋 海 绵 A a p t o s   suberitoides中分离得到 的萘啶类抗炎活性化 合物及其制备方法。 本发明所述的萘啶类抗炎活 性化合物是 从海绵Aap tos suberitoides中分离 出来的新化合物， 通过核磁共振(NMR)、 质谱(MS) 等方法， 结合相关文 献对比鉴定了化合物结构和 分子式； 通过实验探究发现， 该化合物可显著抑 制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症， 通过MAPK信号 通路调控炎症， 降低促炎因子IL ‑1β、 IL‑6和 TNF‑αmRNA水平以及iNOS和COX2蛋白水平的表 达， 从而抑制炎症的发生。 本发明首次披露该具 有良好抗炎活性的新化合物， 为开发利用我国海 洋生物资源及抗炎新药的研发提供了科 学依据。 权利要求书1页 说明书8页 附图11页 CN 115448919 A 2022.12.09 CN 115448919 A 1.一种海洋来源的萘啶类抗炎活性化合物， 其特征在于： 所述化合物是从海绵Aaptos   suberito ides中分离得到的， 其分子式为C10H8N2O3， 结构式为： 该化合物命名为： 4 ‑carbomethoxy ‑5‑keto‑1,6‑naphthyridi ne。 2.如权利要求1所述萘啶类抗炎活性 化合物的制备 方法， 其特 征在于： 包括以下步骤： (1)原料处理： 将冷冻保存的海绵样品用粉碎机粉碎后， 在室温下用甲醇动态冷浸提取 3次， 每次浸泡3天； 合并3次提取液， 40℃温度条件 下减压浓缩； 然后， 用无水甲醇溶解脱盐3 次， 制得浸膏； (2)减压硅胶柱层析： 将浸膏溶解于1.5 ‑3倍重量的纯甲醇中， 再用浸膏重量1 ‑3倍的 100‑200目硅胶拌样后上减压硅胶柱； 再分别用石油醚与乙酸乙酯体积配比为100:1、 50:1、 25:1、 10:1、 5:1、 2:1、 1:1、 1:2、 1:4的石油醚乙酸乙酯溶液和二氯甲烷与甲醇体积配比为 20:1、 10:1、 5:1、 0:1的二氯甲烷甲醇溶液进行梯度洗脱， 分别收集各部分的洗脱液并浓缩， 用TLC薄层色谱监测并合并相同的部分； (3)ODS柱层析： 取步骤(2)中体积配比为1:2的石油醚 乙酸乙酯溶液洗脱得到 的组分， 过ODS柱， 再分别用浓度为甲醇与水体积配比为1:4、 3:7、 4:6、 5:5、 6:4、 7:3、 8:2的甲醇溶液 进行梯度洗脱， 分别收集各部分的洗脱液并浓 缩， 用TLC薄层色谱监测并合并相同的部分； (4)高效液相色谱分离： 取步骤(3)中体积配比为3:7甲醇溶液洗脱得到的组分通过高 效液相分析用OD S C18柱制备 可得所述化合物， 保留时间为25.0分钟， 即制得 所述化合物。 3.根据权利要求2所述萘啶类抗炎活性化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤(2)中， 所 述减压硅胶柱的填料硅胶为20 0‑300目。 4.根据权利要求2所述萘啶类抗炎活性化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤(4)中， 所 述ODS C18柱采用YMC  ODS C18柱， 型号为10 ×250mm,填料粒径为5 μm， 流动相为乙腈/ 水15: 85v/v， 流速为1.5mL/mi n。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115448919 A 2一种海洋来源的萘啶类抗炎活性化合物及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及海洋生物及医药技术领域， 具体地说， 涉及一种从海洋海绵Aaptos   suberito ides中分离得到的萘啶类抗炎活性 化合物及其制备 方法。 背景技术 [0002]炎症是机体对各种外源性或内源性损伤所做出的一种防御性反应。 如果炎症得不 到有效控制， 就会导致类风湿性关节炎、 动脉粥样 硬化、 糖尿病甚至癌症等各种疾病。 目前， 临床上所用的抗炎药物主要有非甾体抗炎药及糖皮质激素， 但是这两类药物在长期大量使 用后均存在一些严重的不良反应。 因此， 开发更加 安全有效的新型抗炎药物具有广阔的临 床应用前 景。 [0003]巨噬细胞是人体内一种重要的免疫细胞， 在启动炎症 反应和抵抗外界侵染中起着 较为关键的作用。 巨噬细胞感受外界刺激(如病毒、 物理伤害以及药物等)后能够产生一系 列炎症物质， 包括细胞因子(IL ‑6、 IL‑12等)、 趋化因子以及炎症介质。 一部分物质会表现出 促炎特性， 这些物质是导致炎症反应加重的重要因素。 因此， 想要控制炎症反应的加重以及 缓解炎症反应的发展， 抑制巨噬细胞分泌炎症物质已是研究 的热点之一。 LPS是十 分重要的 致炎因子， 它能够刺激体内的巨噬细胞合成和释放多种内源性活性因子， 进而诱发炎症。 利 用LPS处理巨噬细胞 是常用的体外 炎症模型造模手段。 [0004]Aaptos suberitoides 属于Aaptos属(Porifera,Demospongiae, Suberitida,Suberitidae)， 广泛分布于越南、 日本、 印度尼西亚和加勒比海浅水水域。 以往 的化学研究表明， 其主要化学成分为aaptamine类生物碱， 至今未见其抗炎活性的相关报 道。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种海洋来源的萘啶类抗炎活性化合物， 第二目的是提供 海洋来源的萘啶类抗炎活性 化合物的制备 方法。 [0006]本发明的第一目的采用以下技 术方案实现： [0007]一种海洋来源的萘啶类抗炎活性化合物， 其特征在于： 所述化合物是从海绵 Aaptos suberito ides中分离得到的， 其分子式为C10H8N2O3， 结构式为： [0008] [0009]该化合物命名为： 4 ‑carbomethoxy ‑5‑keto‑1,6‑naphthyridi ne。 [0010]本发明的第二目的采用以下技 术方案实现： [0011]本发明所述萘啶类抗炎活性 化合物的制备 方法， 包括以下步骤：说　明　书 1/8 页 3 CN 115448919 A 3