DB61/T 1395.2—2021 目 次 前言....................................................................................................................................................................II 1 范围.............................................................................................................................................................. 1 2 规范性引用文件.......................................................................................................................................... 1 3 术语和定义.................................................................................................................................................. 1 4 菌种制作...................................................................................................................................................... 1 5 质量要求...................................................................................................................................................... 4 6 留样.............................................................................................................................................................. 4 7 试验方法...................................................................................................................................................... 4 8 检验规则...................................................................................................................................................... 4 9 标签、包装、运输、贮存 .......................................................................................................................... 4 I DB61/T 1395.2—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是《设施香菇生产》的第2部分，《设施香菇生产》已经发布了以下部分： ——第1部分：9米跨度钢架棚建造技术规程； ——第2部分：菌种生产技术规程； ——第3部分：栽培技术规程； ——第4部分：病虫害综合防控技术规范； ——第5部分：保鲜技术规程； ——第6部分：烘干技术规程。 本文件由陕西省果蔬标准化技术委员会提出。 本文件由陕西省农业农村厅归口。 本文件起草单位：渭南市农业科学研究所、安康市农业科学研究院。 本文件主要起草人：王勇、王永朝、张乐、周高新、张园园、张飞、李悦 、韩宝康。 本文件由渭南市农业科学研究所解释。 本文件首次发布。 联系信息如下： 单位：渭南市农业科学研究所 电话：0913-2020035 地址：陕西省渭南市朝阳大街中段农业大厦A座4楼 邮编：714000 II DB61/T 1395.2—2021 设施香菇生产 第 2 部分：菌种生产技术规程 1 范围 本文件规定了设施香菇菌种生产的术语和定义、菌种制作、质量要求、留样、试验方法、检验规则 及标签、包装、运输、贮存。 本文件适用于设施香菇生产的菌种生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 19170 香菇菌种 GB 4806.7—2016 食品安全国家标准食品 接触用塑料材料及制品 GB/T 12725 食用菌术语 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 母种 stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，也称一级种。 3.2 原种 mother spawn 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，也称二级种。 3.3 栽培种 planting spawn 由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。栽培种只能用于栽培，不能再次扩大繁殖菌种。 4 4.1 菌种制作 产区环境 符合NY/T 528场地选择中基本要求和场地环境要求的规定。 1 DB61/T 1395.2—2021 4.2 生产区设置和布局 4.2.1 设置与建造 生产区建造总体符合NY/T 528要求，接种室内设接种箱或百级超净工作台。试验出菇室（场）要 求地面平坦、温湿度可控、排水通畅、通风良好，室（场）内设有出菇架。 4.2.2 生产区的布局 生产区按照香菇菌种制种工艺流程布局。 4.3 设备设施 4.3.1 设备 应符合NY/T 528要求，增加菌种拌料、装袋装瓶机、运输工具等。灭菌锅符合安检和环保要求。 4.3.2 基本设施 配料、分装、灭菌、冷却、接种、培养等各环节的设施规模要配套。冷却室、接种室、培养室和贮 存室都要有温湿度调控设施。 4.4 菌种生产 4.4.1 4.4.1.1 母种 生产工艺流程 培养基配制→分装→灭菌→冷却摆斜面→无菌检验→接种→检验→成品。 4.4.1.2 容器 符合NY/T 528中的要求。 4.4.1.3 培养基 PDA培养基或CPDA培养基。 4.4.1.4 分装 培养基趁热分装，试管装量为10 ml，试管保持干净，塞入胶塞或棉塞，并用牛皮纸包扎。 4.4.1.5 灭菌 将包扎好的试管直立于高压灭菌锅内加热灭菌，排冷空气后，温度保持121 ℃，持续30 min。 4.4.1.6 摆斜面 灭菌结束后，趁热将试管倾斜摆放于操作台上，斜面长度为试管长度的2/3。 4.4.1.7 灭菌效果检查 按照NY/T 528执行。 2 DB61/T 1395.2—2021 4.4.1.8 接种技术 4.4.1.8.1 消毒 将接种用具、培养基放到接种箱或超净工作台内。接种箱应用气雾消毒剂消毒，用量5 g/m³；超净 工作台开启紫外线灭菌灯照射30 min。 4.4.1.8.2 接种 检查、核对菌种。接种人员双手、母种试管消毒。用消毒后的接种针切取(3～5) mm×(3～5) mm的 母种块迅速移至试管斜面，塞好试管塞，贴标签。 4.4.1.9 培养 将接种后试管置于24 ℃±1 ℃培养箱或培养室中培养10 d～14 d，当菌丝长满试管斜面，即可用于 生产原种。 4.4.2 原种 4.4.2.1 容器 使用500 ml以下、耐126 ℃高温的白色或近透明塑料瓶，或13 cm～14 cm×26 cm～28 cm规格耐126 ℃高温、符合GB 4806.7规定的聚丙烯塑料袋。使用满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞。 4.4.2.2 生产工艺流程 备料→预湿和拌料→配制培养基→装瓶（袋）→高压灭菌→冷却至室温→接种→培养、检查→成品。 4.4.2.3 4.4.2.3.1 培养基 木屑培养基 阔叶树木屑78 %，麸皮20 %，蔗糖1 %，石膏1 %，相对含水量55 %～60 %。 4.4.2.3.2 木屑棉籽壳培养基 阔叶树木屑63 %，棉籽壳15 %，麸皮20 %，蔗糖1 %，石膏1 %，相对含水量55 %～60 %。 4.4.2.3.3 木屑玉米芯培养基 阔叶树木屑63 %，玉米芯粉15 %，麸皮20 %，蔗糖1 %，石膏1 %，相对含水量55 %～60 %. 4.4.2.4 培养基配制 按照配方量取各种原辅料，加水进行人工或机械搅拌，混合均匀。 4.4.2.5 装瓶（袋） 培养料分装在瓶（袋）内，松紧适度。将瓶（袋）口和瓶（袋）外壁擦干净，瓶口塞棉塞，袋口无 棉盖封口。 3 DB61/T 1395.2—2021 4.4.2.6 灭菌 采用常压或高压灭菌，常压灭菌，料温达到100 ℃维持16 h～18 h。高压灭菌，温度达到121 ℃维持 2.5 h～3 h。 4.4.2.7 冷却 灭菌结束后，自然降温20 min～30 min，取出菌种瓶（袋），移入预先清洁和消毒的冷却室冷却。 待冷却至25 ℃时接种。 4.4.2.8 接种技术 4.4.2.8.1 消毒 按照本文件4.4.1.8.1执行。 4.4.2.8.2 接种 用消毒冷却后的接种针切取12 mm×15 mm的母种块迅速转接于瓶（袋）内，封口，每支母种接原 种4 瓶（袋）～6 瓶（袋）。接种结束及时贴好标签。接种完毕，做好接种场所的清洁卫生并消毒。 4.4.2.8.3 培养 接种后在24 ℃±1 ℃下培养菌瓶（袋）45 d～55 d，直至菌丝长满。 4.4.3 栽培种 容器使用14 cm～17 cm×28 cm～3