ICS 65.020.30 CCS B 43 山 14 西 省 地 方 标 准 DB 14/T 2332—2021 绵羊腹腔镜输精技术规程 Technical operation code for sheep laparoscopic insemination 2021 - 11 - 22 发布 2022 - 01 - 22 实施 山西省市场监督管理局  发 布 DB 14/T 2332—2021 目 次 前言....................................................................................................................................................................... II 1 范围................................................................................................................................................................... 1 2 规范性引用文件............................................................................................................................................... 1 3 术语和定义....................................................................................................................................................... 1 4 输精场所及人员要求....................................................................................................................................... 1 5 输精准备........................................................................................................................................................... 2 6 输精................................................................................................................................................................... 2 7 输精档案........................................................................................................................................................... 3 附录 A（资料性） 腹腔镜输精常用器械（以 100 只母羊标准）................................................................. 4 附录 B（规范性） 输精器械、用具的洗涤与消毒......................................................................................... 5 附录 C（规范性） 稀释液的配置......................................................................................................................6 I DB 14/T 2332—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由山西省农村农业厅提出并监督实施。 本文件由山西省农业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：山西农业大学 本文件主要起草人：石磊、乔利英、刘巧霞、张婷、侯东来、任有蛇、张春香、姚继广、杨子森、 张建新、刘建华、郭建文、王军伟、焦忠欣、张记芳，王海瑞。 II DB 14/T 2332—2021 绵羊腹腔镜输精技术规程 1 范围 本文件规定了绵羊腹腔镜输精技术的术语和定义、输精场所及人员要求、输精准备、输精、输精档 案的具体方法和操作程序。 本文件适用于绵羊种羊场、繁殖场和规模养羊户的配种员对绵羊进行腹腔镜输精的技术操作。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 20557 山羊冷冻精液 YY 0627.1内镜器械 NY/T 3186 羊冷冻精液生产技术规程 3 术语和定义 GB 20557和NY/T 3186界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 腹腔镜输精 laparoscopic insemination 借助腹腔镜和专用输精枪将精液直接输入到发情的母羊子宫角使其妊娠的一种人工授精技术。 4 输精场所及人员要求 场所选择 应选择与配母羊数量多且相对集中的地方建设人工授精站（点），输精改良范围以距人工授精站（点） 半径距离不超过20km为宜。 场所应具备的条件 4.2.1 精液处理室 面积8m2～10m2，要求屋顶、墙壁、地面平整，并安装紫外线灯，室温应保持在20℃左右。 4.2.2 输精室 地面用0.1%的新洁尔灭溶液或3%～5%煤酚皂溶液喷洒消毒，打开紫外线灯消毒30min～60min。 4.2.3 待配母羊棚（圈） 面积30m2～40m2，与输精室相连通。 人员要求 1 DB 14/T 2332—2021 输精员为体检合格并能熟练操作腹腔镜的技术人员。输精前手臂清洁、消毒，更换消毒后的工作服 并佩戴口罩和无菌乳胶手套。 5 输精准备 5.1.1 精液种类 新鲜精液、低温保存精液和冷冻精液。 5.1.2 输精器械 输精器械参见附录A，应符合YY 0627.1标准的相关规定。输精器械、用具的洗涤和消毒参见附录B。 5.1.3 精液准备 符合要求的新鲜精液稀释后可直接输精，稀释液配方参见附录C，低温保存的精液需复温至37℃， 细管冷冻精液浸入38℃～40℃的水浴中解冻15s～20s后立即取出，将精液置于10mL的小试管中混匀。 5.1.4 精液检测 新鲜精液的精子活率≥0.7，低温保存精液精子活率≥0.5，冷冻精液精子活率≥0.3。保持有效精 子数在5000万个/mL以上。 5.1.5 发情鉴定 用试情法进行发情鉴定。每天早晨和傍晚各进行一次，每次30 min。按试情公羊与母羊的比例以1:20 为宜。试情公羊进入母羊群后，发现主动接近公羊并接受公羊爬跨的母羊，鉴定为发情母羊并标记。 5.1.6 输精母羊的准备 母羊在输精前24 h断水断料。手术前将待输精母羊保定于手术架上，使用兽用麻醉药静松灵或鹿眠 宝等按推荐剂量注射进行麻醉，然后将母羊乳房前的被毛剃光，用5%的碘伏消毒后用一次性的消毒纸巾 擦拭干净；推进输精室并将保定架抬起至45°-60°。 6 输精 输精时间 鉴定发情的母羊在12h～24h输精。 输精流程 6.2.1 切口 用手术刀尖在母羊腹中线两侧乳房基部的2cm～5cm处纵切两个0.5cm左右的切口，切口部位位于母 羊乳头前方8cm～10cm，刺破皮肤即可，注意避开可见血管。 6.2.2 穿刺 用食指和拇指握住穿刺针与套管针的前段，露出针尖约2cm左右，从切口处分别从两侧斜向刺入穿 刺针与套管针。 2 DB 14/T 2332—2021 6.2.3 观察子宫和卵巢 取出穿刺针，将输精枪和内窥镜分别插入套管，向腹腔内充气5s～8s，使腹腔壁与内脏分离。打开 光源，利用内窥镜观察母羊子宫，如果观察不到子宫，可借助输精管拨动羊腹腔内的器官和脂肪，保证 子宫能够在光源范围内暴露。找到子宫后先观察子宫角及卵巢上的排卵点，有新鲜排卵点的母羊立即输 精。 6.2.4 注入精液 将装好精液的输精枪针头以点式快速刺入的手法刺入子宫角上1/3处，慢慢输入精液0.1mL～0.15mL， 随后拔出针头，找到另一侧子宫角，以同样的方法输入精液，每只母羊输入精液0.2mL～0.3mL，如果发 情母羊没有排卵点则放弃输精。 术后护理 输精完成后将母羊放平，按照3万～4万单位/kg体重肌注长效青霉素后，在手术部位喷伤口愈合喷 剂，用固定卡固定伤口；输精后即可归群，24h内不可采食过多。未输精的母羊也需要进行术后护理。 7 输精档案 输精的羊群要建立输精档案，内容包括母羊编号、发情状况、精液信息、输精时间、妊娠情况和输 精员信息等内容，保存时间3年以上。 3 DB 14/T 2332—2021 A A 附 录 A （资料性） 腹腔镜输精常用器械（以 100 只母羊标准） 名称 数量 名称 数量 6-7 mm 穿刺套管 1套 10 mL 注射器 30 支 5-6 mm 内窥镜 1套 医用手术推车 10 台 腹腔镜专用输精枪 1套 电冰箱 1台 带压力阀小型气泵 1台 开膣器 5个 6000 K 以上冷光源 1台 载玻片 2盒 电动剪毛剪 2把 盖玻片 2盒 带恒温台显微镜 1台 中性洗涤剂 2瓶 显微镜专用擦镜纸 1本 工作服 10 套 医用凡士林 1瓶 记号笔 3支 100℃温度计 2支 试情布 5条 50 mL 量筒 3个 软毛刷 1把 100 mL 量筒 3个 毛巾 5条 75%酒精 2瓶 肥皂 2块 95%酒精 2瓶 玻璃棒 2根 无菌口罩 3包 恒温