ICS 65.020.01 B36 DB4228 恩 施 土 家 族 苗 族 自 治 州 地 方 标 准 DB 4228/T 61—2021 脱毒种姜生产技术规程 Technical regulations for production of virus-free seed ginger 2021 - 11 - 5 发布 恩施土家族苗族自治州市场监督管理局 2021 - 11 - 5 实施 发 布 DB4228/T 61—2021 前  言 本文件根据 GB/T1.1-2020《标准化工作导则第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规 则起草。本文件的某些内容有可能涉及专利，本文件的发布机构不应承担识别这些专利的责任。 本文件由恩施土家族苗族自治州农业科学院提出并归口。 本文件起草单位：恩施土家族苗族自治州农业科学院、湖北恩施中国南方马铃薯研究中心。 本文件主要起草人：叶兴枝、程群、徐怡、陈巧玲、张等宏、王甄、杨国才、郝苗、陈火云、覃竹 山。 I DB4228/T 61—2021 脱毒种姜生产技术规程 1 范围 本文件规定了脱毒种姜的术语及定义、产地环境、生产技术和农事记录等。 本文件适用于恩施州境内脱毒种姜的规范化生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 3095 环境空气质量标准 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB 15618 土壤环境质量 农用地土壤污染风险管控标准（试行） GB/T 30383 生姜 NY/T 404 脱毒生姜种姜（苗）病毒检测技术规程 3 术语及定义 下列术语及定义适用于本文件。 3.1 生姜 zingiber officinale Rosc. 生姜是姜科多年生草本植物的根茎。 3.2 脱毒试管苗 in-vitro virus-free plantlet 应用茎尖组织培养技术获得的、经检测确认不带烟草花叶病毒（TMV）和黄瓜花叶病毒（CMV）的再 生试管苗。 3.3 脱毒种姜 virus-free ginger 从繁殖脱毒苗开始，经逐代繁殖增加姜数量的姜生产体系生产出来的，分原原种、原种、生产用种 三个级别。 3.3.1 原原种 pre-elite 利用组培苗在防虫网室和温室条件下生产出来的、不带烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒的种姜。 3.3.2 原种 elite 用原原种作种姜，在良好隔离条件下生产出的符合质量标准的种姜。 3.3.3 生产用种 certified seed 1 DB4228/T 61—2021 用原种作种姜，在隔离条件下生产出的符合质量标准的种姜。 4 产地环境 宜在海拔1000 m以下地区，选地势高、排水良好、土层深厚、有机质含量丰富、近三年未种植过姜 科植物的中性或微酸性肥沃壤土。土壤环境符合GB 15618规定，灌溉水质符合GB 5084 规定，空气质量 符合GB 3095规定。 5 生产技术 5.1 脱毒苗培育 5.1.1 种姜选择 宜选未受冻、无病虫害、块大粗壮、皮色鲜艳的姜块作为培养材料。 5.1.2 种姜催芽 用70%甲基硫菌灵1000倍液浸泡15 min，置于室温25～30℃催芽，待种姜芽点萌发至1～2 cm时，切 取粗壮幼芽作为接种材料外植体。 5.1.3 外植体消毒 将外植体在流水下冲洗2 min后，转至超净工作台，用75%酒精清洗30 s，0.1% 氯化汞浸泡15～ 20 s，5％次氯酸钠浸泡8～10 min，无菌水冲洗3次。 5.1.4 茎尖剥离 在解剖镜下用无菌解剖刀、解剖针剥去外层包叶，剥取0.2～0.5 mm带1～2个叶原基的茎尖分生组 织。 5.1.5 离体培养 以MS培养基为基础，配比详见附录A，培养环境及操作流程详见表1。 表 1 离体培养环境及操作流程 阶 段 脱 分 化 再 分 化 培养基 培养条件 MS+6-BA（1.5 mg/L）+IAA（0.1 mg/L） 光 照 强 度 2000 ～ 3000 Lx ， 光 照 时 间 16 h/d；温 MS+6-BA（2.0 mg/L）+KT（0.1 mg/L） 度 23～25℃ 操作流程 将茎尖分生组织接种至脱分化 培养基培养，5 周后，记录愈伤组织 形成情况及出愈率。 茎尖明显伸长，叶原基形成可见 小叶时，接种至再分化培养基培养。 记录出芽时间，统计出芽率及成活 率。 2 DB4228/T 61—2021 生 根 壮 苗 5.1.6 MS+6-BA（1.0 mg/L）+NAA（0.3 mg/L） 丛生芽萌发后，分割成带有 1～ 2 个分蘖的组织，接种至生根壮苗培 养基培养，观察生根及芽分蘖情况， 统计生根率、成苗率及增殖系数。 病毒检测 按NY/T 404 方法检测。 5.1.7 离体快繁 将检测合格的试管苗分割成带有1～2个小芽的1～2cm茎段，接种至生根壮苗培养基，每瓶接种1～2 个，按表1培养条件培养。 5.2 原原种繁殖 5.2.1 炼苗 3月中下旬，将生长旺盛、根系发达的组培苗（3～4片叶，4～5条根）移入防虫网室，3 d后打开瓶 盖，2 d后从瓶内取出幼苗，洗净培养基，剔除老组织，放入70%甲基硫菌灵1500倍溶液中浸根15 min 后晾干。 5.2.2 移栽 3 按1 m 消毒基质（草炭：珍珠岩：有机质：蛭石=5：2：1.5：1.5）：0.5 kg复合肥（N：P：K=15:15:15） 混匀，充分吸水后装入苗床，厚度约10 cm。选择阴天，按行距40 cm，株距20 cm移栽苗床上，浇足定 根水，用50%遮光度的遮阳网遮阳。 5.2.3 苗床管理 缓苗后去除遮阳网，喷施0.2%磷酸二氢钾溶液，以叶面有水滴下落为宜，促进提苗及雏形根茎形成； 2 8月上旬，追施硫酸铵或磷酸二铵20 kg/667 m ；9月上旬，根据植株长势进行第3次追肥。结合追肥进 行培土，防止根茎露出土面。整个生长期视墒情及苗情浇水，保持土壤湿润而不渍水。 5.2.4 收获 初霜前抢晴采收，避免机械损伤，剔除烂姜、病姜。 5.2.5 贮藏 收获后晾晒5～7 d，转入气调库贮藏。 5.3 5.3.1 原种繁殖 催芽 3月上中旬，选取姜块肥大、肉色鲜黄的原原种，平铺在干净的地上晾晒1～2 d后，室内堆放2～3 d， 覆盖草帘。 5.3.2 播种 3 DB4228/T 61—2021 2 4月上旬，整地施底肥，每667 m 施硫酸钾复合肥50 kg、商品有机肥200 kg。按50～60 cm行距开 2 沟，沟深20～25 cm、宽40 cm。播种行距50～60 cm，株距20 cm，每667 m 种植4500～5500株。播种后， 盖4～5 cm厚细土。 5.3.3 田间管理 2 播种25 d后，追施苗肥和叶面肥；据苗情适时中耕、除草及培土；8月上旬，每667 m 穴施硫酸钾 复合肥20～30 kg。 5.3.4 病虫害防治 坚持综合防治，根据不同的病虫害选择不同的防治方法。 5.3.5 收获 初霜前，植株顶部叶片发黄时，适时收获。 5.3.6 贮藏 收获后晾晒5～7 d，置于地窑贮藏。 5.4 生产用种繁殖 5.4.1 选种 选用通过休眠、芽粗壮的原种做种姜，质量符合GB/T 30383要求。 5.4.2 繁殖 生产方法同5.3 原种繁殖。 6 农事记录 各操作环节宜作相应记录，可参考附录B。 A 4 DB4228/T 61—2021 附 录 A （资料性附录） MS 培养基成分 MS 成分 培 硝酸铵（NH4NO3） 1650 硝酸钾（KNO3） 1900 磷酸二氢钾（KH2PO4) 170 硫酸镁（MgSO4·7H2O) 370 氯化钙（CaCl2) 440 硫酸亚铁（FeSO4·7H2O) 27.8 乙二胺四乙酸二钠（Na2·EDTA) 37.3 碘化钾（KI) 0.83 硼酸（H3BO3） 6.2 硫酸锰（MnSO4·4H2O) 22.3 钼酸钠（Na2MoO4·2H2O) 0.25 硫酸锌（ZnSO4·7H2O) 8.6 硫酸铜（CuSO4·5H2O) 0.025 氯化钴（CoCl2·6H2O) 0.025 肌醇 100 烟酸 0.5 甘氨酸 2.0 盐酸硫胺素（VB1) 0.1 盐酸吡哆素（VB6) 0.5 蔗糖 50000 琼脂 750 养 基 大量元素 微量元素 用量（mg/L） 有机成分 B 5 DB4228/T 61—2021 附 录 B （规范性附录） 农事操作记录表 农事操作项目（整地、催芽、 日 期 地点 移栽、播种、施肥、除草、 浇水、喷药、收获、贮藏等） 农事操作要点（施肥 量、肥料来源等） 操作人员 备注 _________________________________ 6