(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210714513.3 (22)申请日 2022.06.23 (71)申请人 上海安库生医生物科技有限公司 地址 201318 上海市浦东 新区自由贸易试 验区临港新片区新杨公路86 0号10幢 (72)发明人 姬广超　周鑫磊　苏苗苗　王晓明　 (74)专利代理 机构 上海伯瑞杰知识产权代理有 限公司 312 27 专利代理师 周一新 (51)Int.Cl. C07K 19/00(2006.01) A61K 38/24(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白及其 应用 (57)摘要 本发明公开了一种靶向FSHR和CD3分子的双 结合蛋白及其应用， 属于生物医药领域。 该双结 合蛋白包含至少一个靶向CD3的单链抗体和至少 一个结合FSHR的氨基酸片段， 其中靶向CD3的单 链抗体来源于OKT3单克隆抗体重链可变区和轻 链可变区通过 15个氨基酸短肽连接而成的抗体， 结合FSHR的氨 基酸片段来源人FSH分子中具有结 合FSHR能力的氨 基酸片段。 本发明的上述双结合 蛋白同时结合CD3分子和FSHR分子， 通过细胞实 验发现其可显著提高PBMC对FSHR阳性的肿瘤细 胞系的杀伤能力， 为FSHR阳性的相关肿瘤疾病提 供候选药物。 权利要求书1页 说明书4页 序列表4页 附图2页 CN 114891126 A 2022.08.12 CN 114891126 A 1.一种靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白， 其特征在于， 包含至少一个靶向CD3的单链 抗体和至少一个结合FSHR的氨基酸片段。 2.根据权利要求1所述靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白， 其特征在于， 所述靶向CD3的 单链抗体来源于OKT3单克隆抗体重链可变区和轻链可变区通过15个氨基酸短肽连接而成 的抗体， 其氨基酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 3.根据权利要求1所述靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白， 其特征在于， 所述结合FSHR 的氨基酸片段来源人 FSH分子的一部分。 4.根据权利要求3所述靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白， 其特征在于， 所述结合FSHR 的氨基酸片段来源于人FSH分子中具有结合FSHR能力的氨基酸片段， 其氨基酸序列如SEQ   ID NO.2所示。 5.根据权利要求1所述靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白， 其特征在于， 所述靶向FSHR 和CD3分子的双结合蛋白还包含两个蛋白标签： 一个氨基酸序列如SEQ  ID NO.3所示的蛋白 标签Strep II， 一个氨基酸序列如SEQ  ID NO.4所示的蛋白标签HIS6 。 6.根据权利要求1所述靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白， 其特征在于， 所述靶向FSHR 和CD3分子的双结合蛋白的N端含有信号肽序列， 其氨基酸序列如SEQ  ID NO.5所示。 7.根据权利 要求1至6任一项所述靶向FSHR和CD3分子的双结合 蛋白， 其特征在于， 所述 靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白的氨基酸序列如SEQ  ID NO.6所示。 8.权利要求1至7任一项所述靶向FSHR和CD3分子的双结合 蛋白在制备治疗与FSHR阳性 相关的肿瘤疾病的药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114891126 A 2一种靶向FSHR和C D3分子的双结 合蛋白及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药领域， 具体涉及一种靶向FSHR和CD3分子的双结合蛋白及其 应用。 背景技术 [0002]单克隆抗体因其特异性靶向分子的能力， 在肿瘤治疗中已发展成为一种关键和有 效的治疗方式。 但是， 由于肿瘤复杂的疾病发病机制， 针对单一靶点的单克隆抗体难以表现 出足够的治疗效果。 在这一背 景下， 双特异性抗体应运而生。 双特异 性抗体拥有两种特异 性 抗原结合 位点， 可以同时与靶细胞和功能细胞相互作用， 进 而促进对 靶细胞的杀伤。 [0003]单链抗体是由抗体重链的可变区与轻链的可变区在一段肽链的连接下构成的小 分子， 是具有抗体活性的最小功能结构单位。 完整的抗体由两条重链和两条轻链构成， 人工 改造可使其只表达可变区， 通过人工设计的连接肽将抗体重链可变区和轻链可变区连接而 成的抗体就称为单链 抗体， 最简单的双特异 性抗体就是把分别来自两个单克隆抗体的不同 单链抗体串联起 来， 就可以起到连接靶细胞和功能细胞(如T细胞)的作用。 [0004]CD3靶点是双特异性抗体开发中较早切入的靶点方向， CD3单克 隆抗体可与T细胞 抗原受体(TCR)结合形成受体复合物激活T细胞， 实现T细胞重定向。 与单克隆抗体相比， 双 特异性抗体增加了一个特异性抗原结合位点， 因而特异性更强、 更能准确靶向肿瘤细胞并 降低脱靶毒性， 但双特异性抗体药物的开 发复杂性更高， 技术壁垒更高， 对于技术平台和靶 点选择的适配性要求更高。 [0005]在成年人和动 物中， 卵泡刺激素受体(FSH R)主要在睾丸支持细胞和卵巢颗粒细胞 表面表达， 在睾丸和卵巢血管内皮细胞低表达。 卵泡刺激素(FSH)通过与睾丸支持细胞和 卵 巢粒层细胞表面的FSHR结合， 在性腺发育过程中发挥重要作用。 同时FSHR在多种肿 瘤细胞 中表达， 如卵巢癌、 睾丸癌、 前列腺癌以及子宫内膜癌等， 是肿瘤治疗的一个候选靶点。 发明内容 [0006]有鉴于此， 本发明借鉴于双特异性抗体的方法提出一种靶向FSHR和CD3分子的双 结合蛋白及其应用， 获得具有靶向FSHR和CD 3分子的双结合蛋白， 为FS HR阳性肿瘤的治疗提 供候选药物。 [0007]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0008]本发明提供的一种靶向FSH R和CD3分子的双结合蛋白， 包含至少一个靶向CD3的单 链抗体和至少一个结合FSHR的氨基酸片段。 [0009]作为优选， 所述靶向CD3的单链抗体来源于OKT3单克 隆抗体重链可变区和轻链可 变区通过15个氨基酸短肽连接而成的抗体， 其氨基酸序列为QVQLQQSGAELARPGASVKMSCKAS GYTFTRYTMHWVKQRPGQGLEWIGYINPSRGYTNYNQKFKDKATLTTD KSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARYYD DHYCLDYWGQGTTLTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQIVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMNWYQQKSGTSP KRWIYDTSKLASGVPAHFRGSGSGTSYSLTISGMEAEDAATYYCQQWSSNPFTFGSGTKLEINR(SEQ  ID 说　明　书 1/4 页 3 CN 114891126 A 3