(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210719167.8 (22)申请日 2022.06.23 (71)申请人 江南大学 地址 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大 道1800号 (72)发明人 杨漾　陈敬华　闵元平　 (74)专利代理 机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权 代理有限公司 2321 1 专利代理师 张勇 (51)Int.Cl. A61K 31/4188(2006.01) A61K 31/352(2006.01) A61K 9/51(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 47/36(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 β-拉帕醌和替莫唑胺在制备治疗或抑制胶 质母细胞瘤药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了β ‑拉帕醌和替莫唑胺在制备 治疗或抑制胶质母细胞瘤药物中的应用， 属于医 药技术领域。 本发明的β ‑拉帕醌联合替莫唑胺 在制备治疗或抑制胶质 母细胞瘤的药物中的应 用， 所述药物包括载体和替莫唑胺、 β ‑拉帕醌； 所述载体为透明质酸 ‑胱胺‑花生四烯酸 ‑ Angiopep ‑2； 两种药物在载体的负载下表现出较 强的协同作用； 在穿透体外BBB模型 实验中， HCA ‑ A2‑TMZ&Lapa表现出比HCA ‑TMZ&Lapa更强的穿透 能力， 证明了HCA ‑A2‑TMZ&Lapa的靶向性； 同时也 说明透明质酸 ‑胱胺‑花生四烯酸 ‑Angiopep ‑2载 体负载β ‑拉帕醌和替莫唑胺在 治疗或抑制胶质 母细胞瘤方面具有巨大的应用潜力。 权利要求书1页 说明书9页 附图7页 CN 115040510 A 2022.09.13 CN 115040510 A 1.一种β‑拉帕醌联合替莫唑胺在制备治疗或抑制胶质母细胞瘤的药物中的应用， 其特 征在于， 所述药物包括替莫唑胺、 β ‑拉帕醌和载体； 所述载体为透明质酸 ‑胱胺‑花生四烯 酸‑Angiopep‑2。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述药物中替莫唑胺TMZ与载体质量比为 1： 2～1： 5， β‑拉帕醌Lapa与载体质量比为1： 15 0～1： 200。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述载体对TMZ载药量为30.1 ±2.2％， 包 封率为85.7±6.0％； Lapa的载 药量为0.41±0.005％， 包封率 为78.4±1.9％。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述替莫唑胺的浓度为10～280μg/mL， β ‑ 拉帕醌的浓度为0.1～4 μg/mL。 5.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述替莫唑胺的浓度为17.5～140μg/mL， β‑拉帕醌的浓度为0.25～ 2 μg/mL。 6.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述透明质酸 ‑胱胺‑花生四烯酸 ‑ Angiopep‑2的制备具体包括如下步骤： (1)透明质酸 ‑胱胺(HC)的合成 将透明质酸溶于装有水的圆底烧瓶中， 充分溶解； 然后向该溶液添加 1‑乙基‑(3‑二甲 基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐和1 ‑羟基苯并三唑， 并搅拌溶解， 调节反应液pH值， 在冰水 浴中活化透明质酸的羧基； 待活化完毕， 向溶液中加入胱胺二盐酸盐， 调节溶液pH值， 在室 温下反应， 反应结束后， 透析， 冻干， 即得H C； (2)透明质酸 ‑胱胺‑花生四烯酸(H CA)的合成 在氮气保护下， 将花生四烯酸用二氯甲烷溶解于圆底烧瓶中， 并依次加入1 ‑乙基‑(3‑ 二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐和1 ‑羟基苯并三唑， 冰 水浴搅拌溶解， 得花生四烯 酸混 合溶液； 然后将上述步骤(1)制备的HC在EP管中用水溶解， 并加入二异丙基乙胺， 得到HC混 合溶液； 最后将HC的混合溶液加入花生四烯酸的混合溶液中搅拌混匀， 氮气保护， 抽真空， 水浴恒温下搅拌 反应； 之后再采用二氯甲烷进行萃取， 收集水相， 透析， 冷冻干燥， 即得H CA； (3)透明质酸 ‑胱胺‑花生四烯酸 ‑Angiopep‑2(HCA‑A2)的合成 称上述步骤(2)制 备的HCA， 加水搅拌， 然后超声破碎， 1 ‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳 化二亚胺盐酸盐和1 ‑羟基苯并三唑， 调节溶液pH值， 在冰 水浴下活化； 然后加入Angiopep ‑2 靶肽， 在室温下搅拌 反应； 反应结束后， 透析， 冷冻干燥， 即得H CA‑A2。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述透明质酸与胱胺的质量比为1： 0.6～ 1.2。 8.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述HC与花生四烯酸的质量比为1： 10～ 20。 9.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述HCA与Angiopep ‑2的质量比为1： 0.5～ 2。 10.一种β ‑拉帕醌在制备治疗或抑制胶质母细胞瘤药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115040510 A 2β‑拉帕醌和替莫唑胺在制备治疗或抑制胶质母细胞瘤药物中 的应用 技术领域 [0001]本发明涉及β ‑拉帕醌和替莫唑胺在制备治疗或抑制胶质母细胞瘤药物中的应用， 属于医药技 术领域。 背景技术 [0002]胶质母细胞瘤(GB M)是一种原发性中枢神经系统癌 症， 是成年人中最常见的、 恶性 的、 有高度侵袭性的原发性脑恶性肿 瘤， 占所有原发性中枢神经系统(CNS)癌症的近50％， 每年发病率约为3.22/100000， 且预后极差， 接受三联疗法后的患者的长期生存率为6.2个 月到 16.7个月不 等。 [0003]近几十年来， 随着对GBM的分子和遗传特征不断的深入研究， 相应的诊断和外科技 术也取得了很大进步； 同时也发展了很多新的治疗方法。 目前对胶质母细胞瘤患者的治疗 主要手段包括手术切除、 放疗和替莫唑胺(TMZ)结合 化疗。 [0004]虽然各种新型药物制剂、 给药系统和肿瘤靶向等用以抑制GBM的肿瘤进展或转移 的策略已被广泛研究， 但血脑屏障(BBB)依然 是降低抗癌药物治疗GBM患者疗效的主要限制 因素。 [0005]此外， 替莫唑胺(TMZ)作为GBM一线治疗药物已经被证明具有血浆半衰期短、 易产 生耐药性、 依耐性、 副作用大等多种缺点。 BBB的障碍和TMZ日益突出的缺陷是治疗GBM  的主 要的两个临床挑战， 这极大的限制了几乎 所有的治疗手段。 发明内容 [0006]为了解决上述现有技术中存在的缺陷， 本发明的目的是提供β ‑拉帕醌和替莫唑胺 在制备治疗或抑制胶质母细胞瘤药物中的应用， 用于解决现有技术采用TMZ治疗胶质母细 胞瘤容易产生TMZ耐药性， 以及血脑屏障等影响治疗效果的问题。 [0007]为了实现上述目的， 本发明所采用的技 术方案为： [0008]本发明的一个目的是提供了一种β ‑拉帕醌联合替莫唑胺在制 备治疗或抑制胶质 母细胞瘤的药物中的应用， 所述药物包括载体和替莫唑胺、 β ‑拉帕醌； 所述载体为透明质 酸‑胱胺‑花生四烯酸 ‑Angiopep‑2。 [0009]本发明利用靶向修饰递送系统的方法用于突破血脑屏障， 靶向载药系统可以将更 多的治疗药物运输到GBM部位以达到良好的疗效； 具体是通过构建氧化还原敏感性的靶向 纳米颗粒透明质酸 ‑胱胺‑花生四烯酸 ‑Angiopep ‑2(HCA‑A2)， 并采用该HCA ‑A2载体对TMZ和 β‑ 拉帕醌( β ‑Lapa)同时进行包载联用， 利用Angiopep ‑2的双重靶向性将两种药物输送到 GBM 中， 起到显著抑制肿瘤 细胞生长的作用， 为临床治疗GBM提供了一种新的策略。 [0010]在本发明的一种实施方式中， 所述药物中替莫唑胺TMZ与载体质量比为1： 2～1： 5， β‑  拉帕醌Lapa与载体质量比为1： 15 0～1： 200。 [0011]在本发明的一种实施方式 中， 所述药物通过谷胱甘肽调控释放包载的TMZ和Lapa。说　明　书 1/9 页 3 CN 115040510 A 3