(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210709591.4 (22)申请日 2022.06.21 (71)申请人 东南大学 地址 211102 江苏省南京市江宁区东 南大 学路2号 申请人 徐州淮海生命科 学产业研究院有限 公司 (72)发明人 张宇　刘迪　何泓良　马明　 王建国　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 王艳 (51)Int.Cl. A61K 45/06(2006.01) A61K 31/44(2006.01)A61K 31/395(2006.01) A61K 47/34(2017.01) A61K 47/61(2017.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) A61K 49/06(2006.01) (54)发明名称 双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递 送系统及其制备方法与应用 (57)摘要 本发明公开了双靶向的肿瘤微环境响应的 多功能纳米递送系统及其制备方法与应用， 本发 明材料安全易得且制备方法简单， 制备的纳米递 送系统具有较好的双靶向能力、 肿瘤微环境敏 感 释药能力， 能够增强乳 腺癌化学动力学治疗效果 并抑制乳腺癌的转移， 提高免疫治疗的效果。 本 发明的双靶向的多功能纳米递送系统用于克服 肿瘤缺氧耐受性问题， 增强化学动力学治疗、 免 疫治疗， 同时可提供磁共振成像 （MRI） 监测， 本发 明整合了每种治疗方式的治疗潜力， 多模式协同 治疗发挥了显着的协同效应， 强于单一治疗方 式， 可为肿瘤治疗提供一种有价值的诊疗技术。 此外， 纳米递送系统提供了T2加权和T1加权磁共 振成像 （MRI） ， 实现了纳米诊 疗一体化。 权利要求书2页 说明书10页 附图6页 CN 115252790 A 2022.11.01 CN 115252790 A 1.一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统， 其特征在于， 所述多功能纳 米递送系统是以高分子聚合物为载体， 在载体上包封磁性纳米颗粒及 免疫抑制剂为内核， 在内核表面负载二氧化锰并进一 步修饰透明质酸以及趋化因子受体4抑制剂。 2.根据权利要求1所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统， 其特 征在于， 所述高分子聚合物为聚乳酸、 聚乳酸 ‑羟基乙酸共聚物、 聚乳酸 ‑聚乙烯亚胺嵌段聚 合物或聚乳酸 ‑羟基乙酸 ‑聚乙烯亚胺嵌段共聚合物中的一种或几种； 所述磁性纳米颗粒为 四氧化三铁纳米颗粒； 所述免疫抑制剂为PD ‑L1小分子抑制剂； 所述的趋化因子受体4抑制 剂包括但不限于AMD310 0、 E5、 Mavorixafor、 Bal ixafortide的一种或几种组合。 3.权利要求1或2所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 1） 制备包裹磁性纳米颗粒及免疫抑制剂的高分子聚合物纳米颗粒： 将高分子聚合物、 磁性纳米颗粒及 免疫抑制剂溶于有机试剂 中， 并加入到乳化剂水溶液中， 在冰浴条件下超 声破碎得到初乳液转移到三颈瓶中， 机械搅拌并超声震荡以挥发有机试剂， 超滤洗涤去除 多余的乳化剂及其他杂质， 收集包裹磁性纳米颗粒与免疫抑制剂的高分子聚合物纳米颗 粒； 2） 原位合成法制备负载二氧化锰并包裹磁性纳米颗粒与免疫抑制剂的高分子聚合物 纳米颗粒： 将包裹磁性纳米颗粒与免疫抑制剂的高分子聚合物纳米颗粒溶于水， 用氢氧化 钠调节pH至碱性得到水溶液， 然后 将高锰酸钾缓慢滴加至水溶液中， 在室温下继续搅拌， 将 高锰酸钾还原为二氧化锰颗粒， 最后磁分离以去除单独的二氧化锰即得到负载二氧化锰的 磁性纳米颗粒； 3） 制备透明质酸修饰的负载二氧化锰的磁性纳米颗粒： 将1 ‑(3‑二甲氨基丙基) ‑3‑乙 基碳二亚胺盐酸盐溶解于水， 混合于透明质酸水溶液中， 置于恒温摇床中对透明质酸的羧 基进行活化， 随后 缓慢滴加入高分子聚合物磁性纳米颗粒水溶液中， 并在摇床 中下震荡反 应， 之后超滤去除多余的透明质酸， 纯水洗涤， 最终获得透明质酸修饰的负载二氧化锰的磁 性纳米颗粒； 4） 在透明质酸修饰的二氧化锰负载的磁性纳米颗粒表面修饰趋化因子受体4抑制剂： 在将透明质酸修饰的负载二氧化锰的磁性纳米颗粒溶于水中， 用1 ‑(3‑二甲氨基丙基) ‑3‑ 乙基碳二亚胺盐酸盐对透明质酸表面羧基进 行活化， 之后缓慢加入趋化因子受体4抑制剂， 置于摇床 中振荡孵育； 反应结束后， 超滤去除游离趋化因子受体4抑制剂， 纯水洗涤收集趋 化因子受体4抑制剂偶联透明质酸修饰的负载二氧化锰并包裹磁性纳米颗粒与免疫抑制剂 的高分子聚合物纳米颗粒， 即为所述双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统。 4.根据权利要求3所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统的制备 方法， 其特征在于， 步骤1） 中， 免疫抑制剂为BMS ‑202或BMS ‑37， 所述有机试剂为三氯甲烷 或 二氯甲烷。 5.根据权利要求3所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统的制备 方法， 其特征在于， 步骤1） 中所述的超声破碎时间为5～8  min， 超声间隔时间为2～3  s， 超 声功率为180～3 00 W； 机械搅拌时间为3～5  h， 搅拌速度为 400～600 rpm。 6.根据权利要求3所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统的制备 方法， 其特征在于， 步骤2） 中， 所述高锰酸钾注入速度为3～5  mL/h； 机械搅拌速度为400～权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115252790 A 2500 rpm， 搅拌时间为3 0～60 min。 7.根据权利要求3所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统的制备 方法， 其特征在于， 步骤3） 中， 所述的1 ‑(3‑二甲氨基丙基) ‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐对透明 质酸进行活化时其浓度为1～5  mg/mL， 恒温摇床温度为25～30℃， 摇床转速为120～150   rpm， 孵育时间为 4～6 h。 8.根据权利要求3所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统的制备 方法， 其特征在于， 步骤4） 中， 所述的1 ‑(3‑二甲氨基丙基) ‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐对透明 质酸进行活化时其浓度为1～5  mg/mL， 反应 体系pH为7.4～ 9.0， 室温孵 育48～72 h。 9.权利要求1或2所述的一种双靶向的肿瘤微环境响应的多功能纳米递送系统在制备 乳腺癌药物中的用途。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述药物通过抑制乳腺癌转移至肺部或 其他组织并同时增强T细胞对乳腺癌细胞免疫应答作用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115252790 A 3