(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210697851.0 (22)申请日 2022.06.20 (71)申请人 中国医学 科学院皮肤病医院(中国 医学科学院皮肤病研究所） 地址 210000 江苏省南京市玄武蒋 王庙街 12号 (72)发明人 倪娜娜　孙建方　姜祎群　陈浩　 程伟　 (74)专利代理 机构 芜湖思诚知识产权代理有限 公司 34138 专利代理师 宦晓军 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) A61K 31/7105(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种靶向长链非编码RNA的反义寡核苷 酸及 其应用 (57)摘要 本发明公开了一种靶向长链非编码RNA的反 义寡核苷 酸及其应用， 其中反义寡核苷酸序列与 linc0052 0转录物内的核酸片段序列至少85％互 补， 所述反义寡核苷酸的序列长度为10至30个核 苷 酸 。本 发 明 通 过 靶 向 长 链 非 编 码 R N A   linc00520设计并合成ASO， 其能够降低 linc00520的表达水平， 并且显著抑制黑素瘤细 胞的增殖， 迁移和侵袭能力， 对于开发新的抗皮 肤黑素瘤基因药物具有重要意义， 具有广阔的应 用前景和巨大的经济价 值。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图2页 CN 114990117 A 2022.09.02 CN 114990117 A 1.一种靶向长链非编码RNA的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述反义寡核苷酸序列与 linc00520转录物内的核酸片段序列至少85％互补， 所述反义寡核苷酸的序列长度为10至 30个核苷酸。 2.根据权利要求1中所述的一种靶向长链非编码RNA的反义寡核苷酸， 其特征在于： 所 述反义寡核苷酸包含如下 序列 ： 5 ′ ‑GTTCTTGTGAATTGCAGTCC ‑3′； 5′ ‑ ATAGGTCTCTTGAAACATGG‑3′； 5′ ‑GGTTTGCTGAGCTGTAGA AT‑3′中的至少一种。 3.一种linc00520抑制剂， 其特征在于， 包含权利要求1或2中任一项所述反义寡核苷 酸， 所述反义寡核苷酸与l inc00520转录物特异性结合并抑制l inc00520基因表达 。 4.一种抗皮肤黑色素瘤药物组合物， 其特征在于， 包含权利要求1或2中任一项所述反 义寡核苷酸， 以及药学上可接受的载体， 稀释剂或赋形剂； 所述载体包括慢病毒载体， 腺病 毒载体， 或其 他非病毒质粒 载体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114990117 A 2一种靶向长链非编码RNA的反义寡核 苷酸及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药领域， 特别涉及一种靶向长链非编码RNA的反义寡核苷酸及 其应用。 背景技术 [0002]长链非编码RNA(longnoncodingRNA， lncRNA)是一类长度大于200nt且不具备蛋白 质编码能力的RNA。 因为其不编码蛋白质， 很长一段时间， 人们误以为lncRNA是翻译过程中 的“噪音”。 随着对lncRNA的深入研究， 发现lncRNA是动、 植物体内重要的调节子， 其可以在 转录、 翻译、 生长发育， 参与非生物胁迫等多个水平上调控基因的表达， 成为当前研究的热 点。 [0003]皮肤黑色素瘤是黑色素细胞发生突变形成的恶性肿瘤， 具有高度侵袭性， 进展快， 致死率高， 为一种最具威胁性的皮肤肿瘤。 另外， 该病在全球各地的发病率呈逐年递增趋 势。 近年来， 随着诊疗技术的不断进步， 针对BRAF， c ‑kit等基因突变的靶向治疗以及以PD ‑ 1， CTLA‑4为代表的免疫治疗使皮肤黑素瘤患者的死亡率等到一定程度的缓解， 但治疗效果 仍不理想。 一方面， 部分病人仍缺乏临床上可靶向的基因， 另外大量患者对靶向， 免疫治疗 等治疗手段的应答率低 或易产生耐药复发， 毒副作用大等。 因此， 研发新的分子标志物， 治 疗靶点及干预 药物和手段仍是仍是黑素瘤领域的研究重点。 [0004]近年来越来越多的研究表明lnc RNAs在黑素瘤的发生发展以及药物耐受中发挥重 要作用， 可参与调节多种细胞生物学活动， 包括细胞增殖， 凋亡， 迁移与侵袭， 能量代谢， 新 血管生成等。 抑制或过表达一些lncRNA能够起到抗癌的作用。 靶向lncRNA的表达或功能可 为皮肤黑素瘤的治疗提供了一种 新的策略。 另外， lncRNAs具有较高的组织特异性、 高效率 和高稳定性， 有望成为诊断和预后的潜在治疗 靶点和生物标志 物。 发明内容 [0005]本发明所要解决的技术问题： 提供干预linc00520基因的反义寡聚核苷酸以及靶 向linc00520基因的反义寡聚核苷酸在制备治疗皮肤 黑色素瘤药物中的应用。 [0006]为解决上述 技术问题， 本发明提供以下的技 术方案： [0007]一种靶向长链非编码RNA的反义寡核苷酸， 所述反义寡核苷酸序列与linc00520转 录物内的核酸片段序列至少85％互补， 所述反义寡核苷酸的序列长度为10 至30个核苷酸。 [0008]优选地， 所述反义寡核苷酸包含如下序列： 5 ′ ‑GTTCT TGTGA ATTGC AGTCC‑3′； 5′ ‑ ATAGG TCTCT TGAAA CATGG‑3′； 5′ ‑GGTTT GCTGA GCTGT AGAAT‑3′中的至少一种。 [0009]一种linc00520抑制剂， 包含上述反义寡核苷酸， 所述反义寡核苷酸与linc00520 转录物特异性结合并抑制l inc00520基因表达 。 [0010]一种抗皮肤黑色素瘤药物组合物， 包含上述反义寡核苷酸， 以及药学上可接受的 载体， 稀释剂或赋 形剂； 所述载体包括慢病毒载体， 腺病毒载体， 或其 他非病毒质粒 载体。 [0011]本发明获得的有益效果：说　明　书 1/5 页 3 CN 114990117 A 3