(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210683736.8 (22)申请日 2022.06.16 (71)申请人 东南大学 地址 211102 江苏省南京市江宁区东 南大 学路2号 申请人 徐州淮海生命科 学产业研究院有限 公司 (72)发明人 马明　赵阳　万豪　谢俊　张宇　 王建国　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 王艳 (51)Int.Cl. A61K 49/00(2006.01) A61K 49/12(2006.01)A61K 49/18(2006.01) A61K 9/127(2006.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 47/60(2017.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 胆固醇修饰的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗 粒及其制备方法与应用 (57)摘要 本发明公开胆固醇修饰的酸敏感PEG化磁性 脂质纳米颗粒及其制备方法和应用， 纳米颗粒以 磁性锌铁氧体纳米颗粒为内部磁核， 以DSPE ‑ PEG‑CLS、 DSPE ‑PEG‑NH2、 蛋黄卵磷脂E80及席夫 碱酸敏键修饰的PEG为外壳， 本发明还公开负载 荧光染料的磁性脂质纳米颗粒及其制备方法和 应用。 该纳米颗粒形貌规则、 粒径均一， 具有良好 的结晶度、 升温能力与磁学性能， 良好的稳定性 与生物相容性。 当酸敏性磁性脂质纳米颗粒通过 EPR效应进入肿瘤酸性微环境时， 酸敏键断裂， 胆 固醇分子暴露并锚定在肿瘤细胞膜上， 增加材料 在肿瘤组织中的累积及滞留时间， 获得有效的磁 感应热疗效果， 同时可结合荧光磁共振双模态成 像， 实现肿瘤的诊 疗一体化。 权利要求书2页 说明书12页 附图8页 CN 115040665 A 2022.09.13 CN 115040665 A 1.一种胆 固醇修饰的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒， 其特征在于， 所述纳米颗粒以磁 性锌铁氧体纳米颗粒为内部磁核， 以DSPE ‑PEG‑CLS、 DSPE ‑PEG‑NH2、 蛋黄卵磷脂E80及席夫 碱酸敏键修饰的PEG为外壳。 2.根据权利要求1所述的胆固醇修饰的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒， 其特征在于， 所述磁性锌铁氧体纳米颗粒粒径为10~34nm， 所述DSPE ‑PEG‑CLS、 DSPE ‑PEG‑NH2中PEG的分 子量为2000~5000， 所述DSPE‑PEG‑CLS、 DSPE‑PEG‑NH2质量比为15:0~15:3。 3.一种偶联ICG荧光染料的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒， 其特征在于， 所述偶联ICG 荧光染料的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒将权利要求1或2所述的纳米颗粒与ICG荧光染 料偶联即得。 4.权利要求1或2所述的胆固醇修饰的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒的制备方法， 其 特征在于， 包括以下步骤： 1） 制备油酸修饰的锌铁氧体磁性纳米颗粒即MNP s@OA： 在三颈烧瓶中加入乙酰丙酮铁、 乙酰丙酮锌、 二苄醚、 油酸和油胺， 在恒定氮气2~10 MPa气压下， 设置程序控温装置以2.5~ 3.5℃/min的加热速率从25℃升温至100℃， 达到100℃后打开瓶塞； 待温度达到210~220℃ 时维持45~90min， 此时反应溶液由红棕色变为光亮的黑色； 继续以相同的加热速率升温， 并 维持30~60min使纳米颗粒充分熟化， 整个 反应过程始终保持冷凝回流状态； 反应结束后， 移 去加热装置， 溶液自然冷却至室温后倒入烧杯 中， 加入无水乙醇， 放于磁铁上静置， 待产物 沉淀后磁分离， 重复上述洗涤3~5次， 以去除溶液中残 留的油酸、 油胺； 加入适量三氯甲烷， 超声溶解后保存待用； 2） 制备混合磷脂修饰的锌铁氧体磁性纳米颗粒MNPs@CLS： 称取DSPE ‑PEG‑NH2、 DSPE‑ PEG‑CLS、 E80， 加入去离子水使其充分溶解； 加入MNPs@OA  1ml， 调控E80的浓度为0~17mg/ ml； 将混合溶液置于超声波细胞破碎仪中， 直至得到澄清透亮的溶液， 将所得溶液过滤膜以 去除聚集体， 采用磁分离柱进行磁分离处理以去除磷脂空泡， 重复几次即可获得纯化的磁 性纳米颗粒 水溶液； 3） 制备酸敏性PEG修饰的磁性脂质纳米颗粒即MNPs@CLS@SB： 用NaOH调节MNPs@CLS 水溶 液pH至7~8， 在MNPs@CLS水溶液中加入适量醛基末端的PEG溶液， 机械搅拌过夜， 搅拌速率 3000~3500rpm， 将获得的溶液超 滤去除游离分子后即可获得纯化的酸敏性磁性脂质纳米颗 粒。 5.权利要求3所述的偶联ICG荧光染料的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 所述制备方法包括权利要求4所述的步骤1）~3） ， 还包括步骤  4） 制备偶联了 ICG荧光染料的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒： 称取ICG粉末， 分散于去离子水中， 并充分 超声溶解， 制成ICG水溶液， 将其与MNPs@CLS@SB溶液充分混合后， 置于摇床中孵育、 震荡， 于 截留分子量120 00~100000D的透析袋中透析 过夜， 去除游离的ICG 分子即得。 6.根据权利要求4所述的胆 固醇修饰的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒的制备方法， 其 特征在于， 步骤2） DSPE ‑PEG‑NH2、 DSPE‑PEG‑CLS的浓度比例为15:0~15:3、 E80的终浓度为0~ 17mg/mL。 7.根据权利要求4所述的胆 固醇修饰的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒的制备方法， 其 特征在于， 步骤3） 超滤转速40 00~5000rpm， 时间为15~20min。 8.根据权利要求5所述的偶联ICG荧光染料的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒的制备方权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115040665 A 2法， 其特征在于， 步骤4） 铁浓度1~2mg/mL的MNPs@CLS@SB溶液与ICG浓度1~2mg/mL的ICG水溶 液体积比1:1混合。 9.权利要求1或2所述的胆固醇修饰的酸敏感PEG化磁性脂质纳米颗粒或权利要求3所 述的偶联IC G荧光染料的酸敏感P EG化磁性脂质纳米颗粒在制备磁共振造影剂和/或治疗肿 瘤的药物中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述磁共振造影剂和/或治疗肿瘤的药物 用于肿瘤的精准诊断、 定位和/或杀 死肿瘤细胞。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115040665 A 3