(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210308280.7 (22)申请日 2022.03.28 (71)申请人 山西医科 大学 地址 030600 山西省晋中市榆次区大 学街 98号 (72)发明人 李泽琴　李一丹　张更谦　严江伟　 (74)专利代理 机构 太原华弈知识产权代理事务 所 14108 专利代理师 李毅 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 基于CpG-InDel/S TR标记的精液来源鉴定及 个人识别试剂盒 (57)摘要 本发明公开了一种基于CpG ‑InDel/STR标记 的精液来源鉴定及个人识别试剂盒， 包括有SEQ   NO.1～34所示核苷酸序列的17对特异性PCR引 物， 分别对应用于特异性检测17个精液特异性 CpG位点联合一个或多个InDel/S TR的连锁标记 。 本发明通过扩增、 比对17个精液特异性CpG ‑ InDel/STR标记及其他体液的特异性CpG指示标 记， 检测混合样本中的体液来源及个人识别、 确 认精液供者个体 分型， 可应用于含有精液混合斑 的法医学鉴定 。 权利要求书3页 说明书12页 序列表7页 附图4页 CN 114480678 A 2022.05.13 CN 114480678 A 1.基于CpG ‑InDel/STR标记的精液来源鉴定及个人识别试剂盒， 包括有SEQ  NO.1～34 所示核苷酸序列的17对特异性PCR引物， 分别对应用于特异性检测17个精液特异性CpG ‑ InDel/STR标记， 所述的17个精液特异性Cp G‑InDel/STR标记为17个精液特异性CpG位点按 照下述方式联合 一个或多个I nDel/STR的连锁标记： cg21382890 ‑rs57941264； cg03070236‑rs57326989； cg05696706‑rs589579 2； cg08066035‑rs35021759； cg07865607‑rs200660007； cg13885748‑rs52734973 0； cg15780398‑rs138945785 ‑rs572771462； cg13488570‑rs35471620； cg00115178‑rs199589728‑rs14395845 5； cg1964016 6‑rs66606338； cg14133945‑rs72410937； cg08716982(20 0d)‑rs11315768‑rs139236122‑rs10672777； cg164769 91‑rs71105236； cg04408104‑rs374038625； cg03003434‑rs558700258； cg18437209 ‑rs11400246； cg24133207‑rs150822485。 2.根据权利要求1所述的试剂盒， 其特征是所述17个精液特异性CpG ‑InDel/STR标记对 应的特异性PCR引物如下 所述： cg21382890 ‑rs57941264的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.1的上游引物和SEQ  ID NO.2 的下游引物； cg03070236 ‑rs57326989的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.3的上游引物和SEQ  ID NO.4 的下游引物； cg05696706 ‑rs5895792的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.5的上游引物和SEQ  ID NO.6的 下游引物； cg08066035 ‑rs35021759的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.7的上游引物和SEQ  ID NO.8 的下游引物； cg07865607 ‑rs200660007的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.9的上游引物和SEQ  ID  NO.10的下游引物； cg13885748 ‑rs527349730的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.11的上游引物和SEQ  ID  NO.12的下游引物； cg15780398 ‑rs138945785 ‑rs572771462的特异性PC R引物为SEQ  ID NO.13的上游引物 和SEQ ID NO.14的下游引物； cg13488570 ‑rs35471620的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.15的上游引物和SEQ  ID  NO.16的下游引物；权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114480678 A 2cg00115178‑rs199589 728‑rs143958 455的特异性PC R引物为SEQ  ID NO.17的上游引物 和SEQ ID NO.18的下游引物； cg19640166 ‑rs66606338的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.19的上游引物和SEQ  ID  NO.20的下游引物； cg14133945 ‑rs72410937的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.21的上游引物和SEQ  ID  NO.22的下游引物； cg08716982(200d) ‑rs11315768 ‑rs139236 122‑rs10672777的特异性PC R引物为SEQ  ID  NO.23的上游引物和SEQ  ID NO.24的下游引物； cg16476991 ‑rs71105236的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.25的上游引物和SEQ  ID  NO.26的下游引物； cg04408104 ‑rs374038625的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.27的上游引物和SEQ  ID  NO.28的下游引物； cg03003434 ‑rs558700258的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.29的上游引物和SEQ  ID  NO.30的下游引物； cg18437209 ‑rs11400246的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.31的上游引物和SEQ  ID  NO.32的下游引物； cg24133207 ‑rs150822485的特异性PCR引物为SEQ  ID NO.33的上游引物和SEQ  ID  NO.34的下游引物。 3.根据权利要求1或2所述的试剂盒， 其特征是还包括SEQ  NO.35～36所示核苷酸序列 的特异性PCR引物， 用于 特异性检测来源于血液的CpG位点cg06379435； SEQ  NO.37～38所示 核苷酸序列的特异性PCR引物， 用于特异性检测来源于阴道分泌物的CpG位点cg09765089； SEQ NO.39～40所示核苷酸序列的特异性PCR引物， 用于特异性检测来源于唾液的CpG位点 cg26107890； 以及SEQ  NO.41～42所示核苷酸序列的特异性PCR引物， 用于特异性检测性别 识别Amel ogenin基因座。 4.根据权利要求3所述的试剂盒， 其特征是将用于特异性检测的17个精液特异性CpG ‑ InDel/STR标记和阴道分泌物CpG位点、 唾液CpG位点、 血液CpG位点和性别识别Amelogenin 基因座分为以下4组： 第1组： Amelogenin基因座、 cg21382890 ‑rs57941264、 cg03070236 ‑rs57326989、 cg05696706 ‑rs5895792、 cg08066035 ‑rs35021759、 cg07865607 ‑rs200660007、 cg13885748 ‑ rs52734973 0、 cg15780 398‑rs138945785 ‑rs572771462、 cg1348 8570‑rs35471620； 第2组： cg00115178 ‑rs199589728 ‑rs143958455、 cg26107890、 cg19640166 ‑ rs66606338、 cg14133945 ‑rs72410937、 cg08716982(200d) ‑rs11315768 ‑rs139236122 ‑ rs10672777、 cg164769 91‑rs71105236； 第3组： cg0 6379435、 cg04408104‑rs374038625、 cg0 3003434‑rs558700258； 第4组： cg0976 5089、 cg18437209 ‑rs11400246、 cg2413 3207‑rs150822485。 5.根据权利要求 4所述的试剂盒， 其特 征是： 在特异性PCR引物SEQ  ID NO.41、 SEQ  ID NO.1、 SEQ  ID NO.4、 SEQ  ID NO.5、 SEQ  ID  NO.7、 SEQ ID NO.9、 SEQ ID NO.12、 SEQ  ID NO.13、 SEQ  ID NO.16的5 ’端带有FAM荧 光标记； 在特异性PCR引物SEQ  ID NO.18、 SEQ  ID NO. 39、 SEQ ID NO.19、 SEQ  ID NO.21、 SEQ  权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114480678 A 3