ICS 71.100.70 Y 42 DB 37 山 东 省 地 方 标 准 DB 37/T 4090—2020 化妆品中无机砷的测定 液相色谱-原子荧 光光谱法 Determination of inorganic arsenic in cosmetics—Liquid chromatography - atomic fluorescence spectrometry 2020 - 08 - 20 发布 山东省市场监督管理局 2020 - 09 - 20 实施 发 布 DB37/T 4090—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省市场监督管理局提出、归口并组织实施。 本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、济南市计量检定测试院、山东出入境检验检疫局检 验检疫技术中心、南京市产品质量监督检验院。 本标准主要起草人：徐正、邓宁、杜澎、宋才湖、陈月、周莉莉、侯广月、王一村、陈安琪、卞英 芳、曹世源、曹琦、张鑫、许士明、邹惠玲、苏本玉、李林林。 I DB37/T 4090—2020 化妆品中无机砷的测定 液相色谱-原子荧光光谱法 1 范围 本标准规定了化妆品中无机砷含量的测定方法——液相色谱-原子荧光光谱法。 本标准适用于液态、半固态等乳霜类和部分膏霜类化妆品中无机砷含量的测定。 本方法检出限：无机砷0.02 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 化妆品中无机砷经稀硝酸提取后，以液相色谱进行分离，分离后的目标化合物在酸性环境下与还原 剂反应，生成气态砷化合物，以原子荧光光谱仪进行测定。按保留时间定性，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所有试剂均为优级纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 磷酸氢二铵。 4.1.2 硼氢化钾。 4.1.3 氢氧化钾。 4.1.4 硝酸。 4.1.5 盐酸。 4.1.6 甲酸。 4.1.7 正己烷。 4.2 试剂配制 4.2.1 流动相（15 mmol/L 磷酸氢二铵溶液）：称取 1.98 g 磷酸氢二铵，溶于 1 000 mL 水中，以甲酸 调节 pH 至 6.0，经 0.45 μm 水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气 30 min，现配现用。 4.2.2 盐酸溶液[10%（v/v）]：量取 100 mL 盐酸，溶于水并稀释至 1 000 mL。 4.2.3 硝酸溶液[20%（v/v）]：量取 200 mL 硝酸，溶于水并稀释至 1 000 mL。 4.2.4 硝酸溶液[1%（v/v）]：量取 10 mL 硝酸，溶于水并稀释至 1 000 mL。 1 DB37/T 4090—2020 4.2.5 氢氧化钾溶液（100 g/L）：称取 100 g 氢氧化钾，溶于水并稀释至 1 000 mL。 4.2.6 氢氧化钾溶液（5 g/L）：称取 5 g 氢氧化钾，溶于水并稀释至 1 000 mL。 4.2.7 硼氢化钾溶液（30 g/L）：称取 30 g 硼氢化钾，用 5 g/L 氢氧化钾溶液溶解并定容至 1 000 mL。 现配现用。 4.3 标准品 4.3.1 三氧化二砷（CAS 号：1327-53-3），纯度不低于 99.0%。 4.3.2 砷酸二氢钾（CAS 号：7784-41-0），纯度不低于 99.0%。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 亚砷酸盐[As(Ⅲ)]标准储备液 （100 mg/L， 以 As 计)）： 准确称取三氧化二砷 0.013 2 g， 加 100 g/L 氢氧化钾溶液（4.2.5）1 mL 和少量水溶解，转入 100 mL 容量瓶中，加入适量盐酸调整其酸度近中 性，加水稀释至刻度。4 ℃保存，保存期一年。或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质。 4.4.2 砷酸盐[As(V)]标准储备液(100 mg/L，以 As 计)：准确称取砷酸二氢钾 0.024 0 g，水溶解，转入 100 mL 容量瓶中并用水稀释至刻度。4 ℃保存，保存期一年。或购买经国家认证并授予标准物质证书 的标准溶液物质。 4.4.3 As(Ⅲ)、As(V)混合标准使用液(1.00 mg/L，以 As 计)：分別准确吸取 1.0 mL As(Ⅲ)标准储备液 （4.4.1）、1.0 mL As(V)标准储备液（4.4.2）于 100 ml 容量瓶中，加水稀释并定容至刻度。现配现用。 4.4.4 As(Ⅲ)、As(V)混合标准系列溶液：取 6 支 10 mL 容量瓶，分别准确加入 1.00 mg/L 混合标准使 用液（4.4.3）0.00 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.30 mL、0.50 mL 和 1.0 mL，加水稀释至刻度，此标准系 列溶液的浓度分别为 0.0 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、30 μg/L、50 μg/L 和 100 μg/L。现配现用。 4.5 材料 4.5.1 有机相微孔滤膜：0.45 μm。 4.5.2 水系微孔滤膜：0.45 μm。 4.5.3 塑料离心管：50 mL。 5 仪器和设备 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 液相色谱-原子荧光光谱联用仪(LC-AFS)：由液相色谱仪与原子荧光光谱仪组成。 分析天平：感量分别为 1 mg 和 0.1 mg。 恒温超声波提取机（常温～90 ℃）。 涡旋混合器。 离心机：转速不低于 6 000 r/min。 pH 计：精度为 0.01。 注：玻璃器皿使用前经硝酸（4.2.3）浸泡24 h后，清洗、晾干后备用。 6 试验步骤 6.1 试样提取 6.1.1 液态化妆品 2 DB37/T 4090—2020 称取试样1.0 g（精确至0.1 mg），置于50 mL具塞离心管中，准确加入20.00 mL硝酸溶液（4.2.4）， 涡旋混合均匀，浸提12 h后，于90 ℃超声提取2.5 h。提取完毕，取出冷却至室温，6 000 r/min 离心15 min， 取上清液经0.45 μm有机滤膜（4.5.1）过滤后上机测定。同时作空白试验。 6.1.2 乳、膏霜类化妆品 称取试样1.0 g（精确至0.1 mg），置于50 mL具塞离心管中，准确加入20.00 mL硝酸溶液（4.2.4）， 涡旋混合均匀，浸提12 h后，于90 ℃超声提取2.5 h。提取完毕取出，冷却至室温，6 000 r/min离心15 min。 取5 mL上清液置于离心管中，加入5 mL正己烷（4.1.7），振荡1 min后6 000 r/min离心15 min，弃去上 层正己烷。按此过程重复一次。吸取下层清液经0.45 μm有机滤膜（4.5.1）过滤后进行测定。同时作空 白试验。 6.2 液相色谱参考条件 6.2.1 色谱柱：阴离子交换色谱柱，250 mm×4.6 mm(i.d.)，或性能相当者。阴离子交换色谱保护柱， 250 mm×4.6 mm(i.d.)，或性能相当者。 6.2.2 流动相：磷酸氢二铵溶液（4.2.1）。 6.2.3 流速：1.0 mL/min。 6.2.4 柱温：常温。 6.2.5 进样体积：20 μL。 6.3 原子荧光检测参考条件 6.3.1 负高压：320 V。 6.3.2 砷灯总电流 90 mA；主电流辅助电流：55/35。 6.3.3 原子化器炉温：200 ℃。 6.3.4 载气流速：400 mL/min。 6.3.5 辅助气流速：400 mL/min。 6.3.6 载液：20%盐酸溶掖，流速 4 mL/min。 6.3.7 还原剂：30 g/L 硼氢化钾溶液，流速 4 mL/min。 6.4 测定 分别上机测定标准系列溶液和试样溶液。试样溶液与标准溶液中As(Ⅲ)、As(V)的保留时间相对偏 差在±2.5 %之内，As(Ⅲ)、As(V)标准溶液图谱参见附录A。以As(Ⅲ)、As(V)的浓度为横坐标，以其响 应值（峰面积）为纵坐标，绘制标准曲线，标准曲线相关系数不低于0.997。As(Ⅲ)、As(V)的响应值应 在标准工作曲线测定的线性范围内。如超出线性范围，应稀释（n倍）后，重新进样分析。As(Ⅲ)、As(V) 含量的加和为总无机砷含量，平行测定次数不少于两次。 7 试样数据处理 试样中无机砷含量以质量分数计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，多点校准按式(1)计算： （C  C 0） V  1000  n X ................................................................. (1) m  1000  1000 式中： 3 DB37/T 4090—2020 X ——试样中无机砷的含量（以As计），单位为毫克每千克（mg/kg）； C ——测定溶液中无机砷化合物浓度，单位为微克每升（μg/L）； C0 ——空白溶液中无机砷化合物浓度，单位为微克每升（μg/L）； V ——提取液的体积，单位为毫升（mL）； m ——试样的质量，单位为克（g）； n ——上机测定的试样溶液超出线性范围后，进一步稀释的倍数。 总无机砷含量为As(Ⅲ)含量与As(V)含量的加和。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。 4 DB37/T 4090—2020 AA 附 录 A （资料性附录） 亚砷酸 As(Ⅲ)、二甲基砷 DMA、一甲基砷 MMA、砷酸 As(V)的典型色谱图 不同砷形态标准溶液色谱图见图A.1。 图A.1 不同砷形态标准溶液色谱图 _________________________________ 5