ICS 67 X 04 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 5189.11 —2020 天然植物提取物中危害成分检测 第 11 部分：叶黄素中苯的测定 2020 - 06 - 28 发布 河北省市场监督管理局 2020 - 07 - 28 实施 发 布 DB13/T 5189.11—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 DB13/T 5189《天然植物提取物中危害成分的测定》共分12个部分： ——第 1 部分：亚硝酸盐的测定； ——第 2 部分：二氧化硫的测定； ——第 3 部分：正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇 5 种有机溶剂残留的测定； ——第 4 部分：辣椒提取物中砷、铅、镉、铬、汞的测定； ——第 5 部分：万寿菊提取物中对氧基苯胺的测定； ——第 6 部分：万寿菊提取物中乙氧基喹啉的测定； ——第 7 部分：天然番茄红中苯并[α ]芘的测定； ——第 8 部分：辣椒提取物中苏丹红的测定； ——第 9 部分：辣椒提取物中叔丁基对苯二酚的测定； ——第 10 部分：辣椒红中赭曲霉毒素 A 的测定； ——第 11 部分：叶黄素中苯的测定； ——第 12 部分：甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的测定。 本部分为DB13/T 5189的第11部分。 本标准由河北省市场监督管理局提出并归口。 本标准起草单位：晨光生物科技集团股份有限公司、河北省食品检验研究院、石家庄海关技术中 心、清河食品药品检验所。 本标准主要起草人：程远欣、石文杰、张兰天、栗星、王婷、艾连峰、王如景。 I DB13/T 5189.11—2020 天然植物提取物中危害成分检测 第 11 部分：叶黄素中苯的测定 1 范围 本部分规定了叶黄素中苯的气相色谱-串联质谱测定方法。 本部分适用于叶黄素中苯的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 试样溶解于DMF溶剂后，采用顶空进样器进样，用气相色谱-串联质谱检测器检测，根据色谱峰的 保留时间及定性离子对定性，定量离子对定量。 4 试剂和材料 4.1 试剂 N,N-二甲基甲酰胺（DMF）（C3H7NO）：色谱纯。 4.2 标准品 苯（C6H6，CAS：71-43-2）：纯度大于99.0%，或具有标准物质证书。 4.3 标准溶液配制 4.3.1 苯标准储备溶液（1000 mg/L）：称取苯 100 mg（精确至 0.01 mg），用 DMF 定容至 100 mL， 摇匀，4 ℃避光保存，有效期 6 个月。 4.3.2 苯标准中间工作溶液（10 mg/L）：准确量取 1000 mg/L 苯标准储备液 1 mL，于 100 mL 容量 瓶中，用 DMF 定容，4 ℃避光保存，有效期 3 个月。 4.3.3 苯标准系列溶液：分别量取 DMF6 mL 于 20 mL 顶空瓶中，再移取 0.01 mL、0.03 mL、0.05 mL、 0.1 mL、0.2 mL 中间工作液（10 mg/L）至 20 mL 顶空瓶，涡旋混匀，上机测试，同时做标曲空白， 现配现用。 5 仪器和设备 1 DB13/T 5189.11—2020 5.1 气相色谱-质谱联用仪：配顶空自动进样器和 EI 离子源。 5.2 电子天平：感量为 0.1 mg 和 0.01 mg。 5.3 超声波清洗器。 6 分析步骤 6.1 试样制备 称取样品0.1 g（精确至0.1 mg）于顶空瓶中，加入6 mL DMF溶液，超声，摇匀，待测。 6.2 气相色谱-质谱条件 6.2.1 气相色谱条件 气相色谱条件如下： a) 色谱柱：HP-5MS 石英毛细管柱，长度 30 m，内径 0.25 mm，膜厚 0.25 µm，或性能相当者； b) 进样口温度：200 ℃； c) 程序升温：初始柱温 40 ℃，保持 3 min，以 10 ℃/min 升温至 60 ℃，保持 1 min，再以 45 ℃ /min 升温至 190 ℃，保持 2 min； d) 载气：氦气（纯度≥99.999%），流速 1.0 mL/min； e) 进样量：1 mL； f) 进样方式：分流进样 g) 分流比：50:1。 6.2.2 自动进样器条件 自动进样器条件如下： a) 温度：加热箱 82 ℃，定量环 100 ℃，传输线 105 ℃； b) 时间：GC 循环时间 15 min，样品平衡时间 60 min，压力平衡时间 0.1 min，进样时间 0.5 min； c) 样品瓶：摇动 3 次； d) 载气：氮气。 6.2.3 质谱条件 质谱条件如下： a) 色谱与质谱接口温度：200 ℃； b) 离子源温度：230℃； c) 离子源类型：电子轰击离子源（EI）； d) 碰撞室气体：氮气（纯度≥99.999%）； e) 电离能量：70 eV； f) 监测方式：选择离子监测模式（SIM）保留时间及监测离子对见下表。 化合物名称 特征离子 定量离子 苯 78、77、51 78 6.3 测定 2 DB13/T 5189.11—2020 6.3.1 定性 在仪器条件下，试样待测液和标准品的选择离子色谱峰在相同保留时间处（±0.5%）出现，并且 对应质谱碎片离子的质荷比与标准品一致，其丰度比与标准品相比符合：相对丰度＞50%时，允许±20% 的偏差；相对丰度20%～50%时，允许±25%的偏差；相对丰度10%～20%时，允许±30%的偏差；相对丰度 ≤10%时，允许±50%的偏差。满足上述条件时可定性确证目标分析物。苯标准溶液总离子流色谱图见附 录A。 6.3.2 定量 将得到的定量离子峰面积代入式（1），得到待测试液中苯的浓度。样品溶液中待测物的响应值均 应在标准工作曲线的线性范围内，若超出线性范围，则应用DMF稀释到线性范围所包含的浓度。 7 试验结果 试样中苯含量按式（1）计算。 X  V m ……………………………………………………（1） 式中： X—试样中苯的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； ρ—从标准工作曲线上查出的试样溶液中苯的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V—样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； m—试样质量，单位为克（g）。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留至小数点后一位。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 9 检出限和定量限 检出限为0.1 mg/kg，定量限为0.3 mg/kg。 3 DB13/T 5189.11—2020 AA 附 录 A （资料性附录） 苯标准溶液总离子流色谱图 A.1 苯标准溶液总离子流色谱图，如图A.1 所示。 苯 图 A.1 苯标准溶液总离子流色谱图 4