ICS 65.020.01 B 30 江 DB36 西 省 地 方 标 准 DB36/T 1245—2020 茄子品种对黄萎病抗性苗期人工接种鉴定 技术规程 Technical regulations for identification of resistance of eggplant varieties to verticillium dahliae by artificial inoculation at seedling stage 2020 - 04 - 07 发布 江西省市场监督管理局 2020 - 10- 01 实施 发 布 DB36/T 1245—2020 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 鉴定方法 .......................................................................... 1 5 病情调查 .......................................................................... 2 6 抗病性评价 ........................................................................ 2 附录 A（规范性附录） 茄子黄萎病接种体制备、严重度分级和病情指数计算方法 .............. 4 I DB36/T 1245—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由江西省农业农村厅提出并归口。 本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所、江西省农业科学院蔬菜花卉研究所。 本标准主要起草人：黄瑞荣、胡建坤、方荣、黄蓉、陈学军、周坤华、黄国东、钟振华、朱业斌。 II DB36/T 1245—2020 茄子品种对黄萎病抗性苗期人工接种鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了茄子品种对黄萎病抗性苗期人工接种鉴定的术语和定义、鉴定方法、病情调查及抗病 性评价。 本标准适用于茄子品种苗期对黄萎病人工接种抗性鉴定和评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 2118 蔬菜育苗基质 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 植物病害人工接种 artificial inoculation of plant disease 采用人工方法将病原物直接或间接接种到寄主植物的种子或组织上，使其发病。 3.2 抗性鉴定对照品种 control variety of resistance identification 在抗性鉴定试验中，选择抗性水平较稳定的感病品种作为对照品种。 4 鉴定方法 4.1 育苗基质 以质优泥炭（粒径≤6mm）为育苗基质。捣碎后加入适量肥料与适量的清水混配均匀，调节基质含 水率至60%，参照NY/T 2118执行。 4.2 基质装盘播种 将制备好的基质置入底部有孔的塑料育秧盘（规格：54cm×28cm×5cm，孔径：6cm×6cm～3cm×3cm， 32孔）中，基质量以装平秧盘为准。秧盘中每孔穴播茄子种子2粒～3粒，每个品种播种1盘。 4.3 接种前茄苗管理 1 DB36/T 1245—2020 种子发芽出苗后，保持秧盘基质湿润。出苗7d～10d定苗，每穴保留健壮茄苗1株，苗龄20d～25d， 每盘追施尿素2g（兑水配成溶液）。露地育苗，雨天需做避雨处理，方法可用竹条与塑料薄膜制成拱棚 覆盖茄苗。茄苗可使用杀虫剂防虫，但不使用杀菌剂防病。 4.4 接种时间 以春、秋季为宜。露地接种，气温宜在18℃～25℃进行；温室（棚）接种，气温可调节至20℃左右。 4.5 接种菌株 采用强致病力菌株接种。 4.6 接种方法 4.6.1 灌根法 于茄苗长全2片～3片真叶时接种。用移液器定量吸取10ml制备好的接种菌悬液注入到茄苗生长的基 7 质中。接种菌悬液孢子浓度均为1×10 个/mL参照附录A，接种菌悬液量均为每穴10mL。 4.6.2 伤根灌根法 于多数茄苗长全3片真叶时接种，用规格为15cm×1cm钢制药勺的条形手柄在距离茄苗主根2cm～3cm 的位置按等边三角形的三边方向分边垂直插入，切断茄苗部分须根，然后用移液器定量吸取10mL制备好 7 的接种菌悬液均匀滴加到伤根形成的孔洞里。接种菌悬液孢子浓度均为1×10 个/mL，接种菌悬液量均 为每穴10mL。 4.7 接种后期管理 接种病菌后的茄苗可置温室（棚）进行管理，温度适宜条件下也可在露地进行管理。茄苗接菌后保 湿24h，之后喷清水保持盘中基质湿润。露地管理雨天需做避雨处理，晴天气温偏高需做遮阳处理。保 湿与避雨处理均可用竹条与塑料薄膜制成拱棚覆盖茄苗。 5 病情调查 5.1 调查时间 灌根法于人工接种后45d进行病情调查，伤根灌根法于人工接种30d进行病情调查。 5.2 调查方法与数据处理 调查各参鉴品种的所有茄苗，检查每株茄苗病情，按分级标准记载病情,统计病株率和病情指数参 照附录A。 6 抗病性评价 6.1 评价标准 根据人工接种鉴定的结果评价茄子品种的抗病性。以抗性鉴定对照品种的病情指数达到感病划分范 围，为人工接种鉴定结果有效性标准。 2 DB36/T 1245—2020 6.2 抗病性分级标准 根据调查统计的各品种的病情指数，按照表1评定各参鉴品种对黄萎病的抗性。 表1 茄子品种苗期抗黄萎病评价标准 抗性类型 病情指数 高抗（HR） DI=0 抗（R） 0＜DI≤15 中抗（MR） 15＜DI≤30 耐病（T） 30＜DI≤50 中感（MS） 50＜DI≤70 感（S） 70＜DI≤100 3 DB36/T 1245—2020 附 录 A （规范性附录） 茄子黄萎病接种体制备、严重度分级和病情指数计算方法 A.1 接种体制备 在无菌条件下将参试的黄萎病菌从斜面中转接到含有150mL马铃薯蔗糖培养基(PS)的三角摇瓶中， 150r/min、26℃条件下震荡培养4d。将菌液用双层纱布过滤，弃菌丝体留过滤液，将过滤液2000r/min 离心10min，弃上清液，沉淀即为黄萎病菌孢子。用无菌水将孢子重新悬浮并稀释，在光学显微镜下使 7 用血球计数板对菌悬液中的孢子进行计数，配制成浓度为1×10 个/ml的孢子悬浮液供接种备用。 A.2 病情严重度分级标准 见表A.1。 表A.1 病情严重度分级标准 病级 症状 0级 无发病症状 1级 第一片真叶变黄卷曲 2级 第三片真叶以下部分变黄卷曲 3级 整株发病明显，仅新生叶片健康 4级 真叶脱落，仅剩一片旗叶 5级 全株枯死 A.3 病情指数计算方法 按公示（A.1）计算： 病情指数（DI）=[∑(各级病株数×相对病级数值)/调查总株数×最高病级数值] ×100..... (A.1) _________________________________ 4