T/GZCX020-2022 ICS67.080.10 X04 T/GZCX 团 体 标 准 T/GZCX020-2022 刺梨及其制品中总酚含量的测定 2022-11-22发布 2022-12-01实施 贵州省刺梨行业协会发布 全国团体标准信息平台 T/GZCX020-2022 第1页共7页前言 本标准按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分： 标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。 本标准由国药集团贵州大健康产业发展有限公司提出。 本标准由贵州省刺梨行业协会归口。 本标准起草单位：国药集团贵州大健康产业发展有限公 司、国药集团同济堂（贵州）制药有限公司、贵州初好农业 科技开发有限公司、贵州金维宝生物技术有限公司、贵州天 赐贵宝食品有限公司、贵州明安实业有限公司、中志浩刺梨 产业开发(贵州)有限公司。 本标准主要起草人：漆正方、孙宜春、钱品、陈杉、闫 福泉、朱荣金、蔡志林、王鹏娇、龙久铃。 本标准为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/GZCX020-2022 1刺梨及其制品中总酚含量的测定 1范围 本标准规定了刺梨及其制品中总酚含量测定的紫外分光光度法。 本标准适用于刺梨鲜果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨冻干粉、 刺梨喷干粉、刺梨原汁、刺梨浓缩汁等刺梨及其制品中总酚含量的 测定。 本标准总酚的检出限：0.6mg/100g；定量限：2.1mg/100g。 2规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注 日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的 引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1刺梨鲜果 新鲜、未经过加工的刺梨成熟果实。 3.2刺梨干果 以刺梨果实为原料，经脱水，未经糖渍，添加或不添加食品添 加剂制成的刺梨制品。 3.3刺梨果脯 以刺梨果实、白砂糖或其他甜味剂为主要原料，添加或不添加 全国团体标准信息平台 T/GZCX020-2022 2食品添加剂，经预处理、糖渍、干燥或不干燥等工艺制成的刺梨制 品。 3.4刺梨冻干粉 通过真空冷冻干燥方法制成的刺梨粉末制品。 3.5刺梨喷干粉 以刺梨果实、刺梨原汁或刺梨浓缩汁，经喷雾干燥制成的刺梨 粉末制品。 3.6刺梨原汁 以刺梨果实为原料，经清洗、物理破碎、机械压榨、过滤或不 过滤、灭菌后取得的清汁或浊汁制品。 3.7刺梨浓缩汁 以刺梨果实为原料，经清洗、物理破碎、机械压榨等工艺后， 再经浓缩工艺除去一定水分后制得的制品。 4方法原理 在碱性条件下利用多酚的还原性，多酚可以将磷钨酸钼酸还原 成蓝色，蓝色深浅与多酚含量成正相关，在760nm下测定吸光度值， 外标法定量。 5试剂 5.1试剂 除另有规定外，仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水。 5.1.1没食子酸（C7H6O5，CAS：149-91-7）标准品：纯度≥98%。 5.1.2无水乙醇（C2H6O）。 全国团体标准信息平台 T/GZCX020-2022 35.1.3碳酸钠（Na2CO3）。 5.1.4福林酚试剂（Folin-Phenol，BR，1mol/L）。 5.2试剂配制 5.2.1没食子酸对照品储备液（0.1mg/mL）：精密称取10mg（精 确至0.1mg）没食子酸标准品，加入少量水溶解，转移至100mL 棕色容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，4℃避光保存。 5.2.2没食子酸标准系列浓度溶液：准确量取没食子酸对照品储备 液（5.2.1）0.0mL、0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25 mL、1.5mL于25mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，4℃ 保存。没食子酸标准系列浓度为0μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、 3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.0μg/mL、6.0μg/mL。现用现配。 5.2.312%碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠12g（精确至0.01g）， 加适量水溶解，转移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀。 5.2.480%乙醇提取剂：量取无水乙醇80mL，置100mL容量瓶中， 加水溶解并定容至刻度。 6仪器和设备 6.1分光光度计。 6.2高速破壁机。 6.3超声波提取器。 6.4高速冷冻离心机：转速10000rpm。 6.5分析天平：感量0.0001g。 6.6涡旋振荡器。 全国团体标准信息平台 T/GZCX020-2022 46.7组织捣碎机。 7分析步骤 7.1试样制备 将刺梨鲜果（3.1）刺梨鲜果去皮、去籽，组织捣碎机打浆，混 合均匀，备用；去除刺梨果干（3.2）和刺梨果脯（3.3）中可见杂 质，用高速破壁机粉碎，将其制成粉状，备用；刺梨冻干粉（3.4） 和刺梨喷干粉（3.5）研磨均匀备用。 7.2试样提取 7.2.1固态试样： 取7.1样品0.5~2g，精密称定（精确到0.0001g），置50 mL具塞离心管内，加5mL水浸润样品，加80%乙醇溶液30mL超声 处理90分钟，超声过程中振摇数次，保持固相完全分散。超声结束 后离心（9000rmp、4℃）5分钟，滤过，用水洗涤沉淀物，合并 洗液及滤液，加水定容至50mL容量瓶，即得。 7.2.2液态试样： 刺梨原汁（3.6）、刺梨浓缩汁（3.7）等液体样品，精密量取 样品1~10mL，置50mL具塞离心管内，加80%乙醇溶液30mL超声 处理90分钟。超声结束后离心（9000rmp、4℃）5分钟，滤过， 用水洗涤沉淀物，合并洗液及滤液，加水定容至50mL容量瓶，即 得。 7.3标准工作曲线 准确量取没食子酸标准系列浓度溶液（5.2.2）1.0mL于25mL 全国团体标准信息平台 T/GZCX020-2022 5刻度试管中，加1.0mol/LFolin-Phenol试剂1.0mL，摇匀后静 置5分钟，再加入12%碳酸钠溶液（5.2.3）2.0mL，加水定容至刻 度线，30℃水浴加热90分钟，在760nm处测定吸光度。以25mL 溶液中没食子酸质量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准 曲线。 7.4空白试验 与试样的测定平行进行，取相同量的所有试剂，采用相同的分 析步骤，但不添加试样。 7.5试样的测定 准确量取提取液（7.2）1mL，置于25mL刻度试管中，加入 1.0mol/LFolin-Phenol试剂1.0mL，再加入12%的碳酸钠溶液 （5.2.3）2.0mL，加水定容至刻度线，30℃水浴加热90分钟，在 760nm处测定吸光度。 若样品多酚含量较高（吸光度不在0.1~0.8之间），可适当稀 释后再进行分析测定。 8分析结果的表述 8.1刺梨鲜果、刺梨干果等固态试样 试样中总酚含量（以没食子酸计）以百分含量（%）表示，按公 式（1）进行计算。 x=m×d M×1000×100%……………………（1） 式中: x───试样中总酚含量（以没食子酸计）； 全国团体标准信息平台 T/GZCX020-2022 6m───由标准曲线查出的样品中没食子酸质量，单位为毫克 （mg）； M───试样质量，单位为克（g）； d───样品稀释倍数； 计算结果保留小数点后两位。 8.2刺梨原汁、刺梨浓缩汁等液态试样 样品中总酚含量（以没食子酸计）以百分含量（%）表示，按式 （2）计算： x=m×d v×1000×100%……………………（2） 式中: x───试样中总酚含量（以没食子酸计）； m───由标准曲线查出的样品中没食子酸质量，单位为毫克 （mg）； v───试样体积，单位为毫升（mL）； d───样品稀释倍数； 计算结果保留小数点后两位。 9精密度 在重复条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算 术平均值的10%。 _______________________________ 全国团体标准信息平台