ICS67.050 A019 T/SSX002—2022 谷物中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐的 测定液相色谱－电感耦合等离子体质谱联法 Determinationofselenomethionine,selenateandselenite incerealsbyliquidchromatography-inductivelycoupled plasmamassspectrometry 2022-10-18发布 2022-11-18实施 陕西省食品科学技术学会发布团体标准 全国团体标准信息平台 T/SSX002—2022 I目次 前  言................................................................................................................................................................II 1范围.....................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件.................................................................................................................................................1 3方法原理.............................................................................................................................................................1 4试剂和材料.........................................................................................................................................................1 5仪器与设备.........................................................................................................................................................2 6分析步骤.............................................................................................................................................................2 7分析结果表述.....................................................................................................................................................3 8精密度.................................................................................................................................................................4 附录A..................................................................................................................................................................5 全国团体标准信息平台 T/SSX002—2022 II前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》和GB/T 20001.4-2015《标准编写规则第4部分：试验方法标准》给出的规则起草。 本文件由陕西省食品科学技术学会提出。 本文件由陕西省食品科学技术学会归口。 本文件起草单位：安康市富硒产品研发中心、北京市疾病预防控制中心、陕西国硒谷富硒产品研发 中心有限公司。 本文件主要起草人：刘丽萍、唐德剑、陈绍占、孟莉、许亚丽、贺博、夏曾润、刘鑫、卜贤盼、张珂、 黄波、杜小平、祁蒙。 本文件系首次发布。 全国团体标准信息平台 T/SSX002—2022 1谷物中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐的测定 液相色谱－电感耦合等离子体质谱用法 1范围 本文件规定了液相色谱－电感耦合等离子体质谱联用法测定谷物中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐 含量的方法。 本文件适用于大米和小麦中硒代蛋氨酸、亚硒酸盐和硒酸盐的测定；玉米中硒代蛋氨酸和硒酸盐的 测定。 当样品称样量为0.3g，提取液体积为5mL时，硒代蛋氨酸方法定量限为0.015mg/kg、硒酸盐方法 定量限为0.010mg/kg、亚硒酸盐方法定量限为0.007mg/kg。 2规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3方法原理 试样中硒代蛋氨酸、硒酸盐和亚硒酸盐通过蛋白酶酶解后，经离子交换色谱柱分离，电感耦合等离 子体质谱仪测定，以色谱保留时间定性，外标法定量。 4试剂和材料 除另有说明外，本法所用试剂均为分析纯，试验用水为GB/T6682规定的一级水。 4.1试剂 4.1.1磷酸氢二铵（(NH4)2HPO4）。 4.1.2蛋白酶XIV：生化试剂（酶活力≥3.5U/mg固体）。 4.1.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。 4.2试剂配制 4.2.1甲酸溶液（10%，v/v）：准确量取10mL甲酸，缓慢加水稀释至100mL，混匀。 4.2.2流动相配制（40mmol/L磷酸氢二铵溶液，pH=6.0）：称取2.6412g磷酸氢二铵，用水稀释至 500mL，用甲酸溶液（4.2.1）调节pH值至6.0，混匀，于超声水浴中超声脱气10min，备用，临用现配。 4.3标准品 4.3.1硒代蛋氨酸（C5H11NO2Se，CAS号：9001-05-2），纯度≥98%。 4.3.2硒酸钠（Na2O4Se，CAS号：13410-01-0），纯度≥99% 4.3.3亚硒酸钠（Na2O3Se，CAS号：10102-18-8），纯度≥99% 4.4标准溶液 4.4.1硒代蛋氨酸标准溶液（1.0mg/mL，以Se计）：准确称取0.2480g硒代蛋氨酸标准品，用水 溶解并定容至100mL，配制成1.0mg/mL硒代蛋氨酸标准溶液，2℃～8℃避光保存，保存期6个 月。或购买国家有证硒代蛋氨酸溶液标准物质（C5H11NO2Se，GBW10034）。 全国团体标准信息平台 T/SSX002—2022 24.4.2硒酸根标准溶液（1.0mg/mL，以Se计）：准确称取0.2393g硒酸钠标准品，用水溶解并定 容至100mL，配制成1.0mg/mL硒酸根标准溶液，2℃～8℃避光保存，保存期6个月。或购买国 家有证硒酸根溶液标准物质（SeO42-，GBW10033）。 4.4.3亚硒酸根标准溶液（1.0mg/mL，以Se计）：准确称取0.2190g亚硒酸钠标准品，用水溶解 并定容至100mL，配制成1.0mg/mL亚硒酸根标准溶液，2℃～8℃避光保存，保存期6个月。或 购买国家有证亚硒酸根溶液标准物质（SeO32-，GBW10032）。 4.4.4单标准储备溶液（10.0μg/mL，以Se计）：分别吸取一定量的硒代蛋氨酸标准溶液（4.4.1）、 硒酸根标准溶液（4.4.2）、亚硒酸根标准溶液（4.4.3），用水逐级稀释配制成10.0μg/mL的单标准储 备溶液，2℃～8℃避光保存，保存期6个月。 4.4.5混合标准系列溶液：分别准确吸取1.0mL浓度为10.0μg/mL的硒代蛋氨酸、硒酸根、亚硒 酸根（4.4.4）标准储备液于10mL容量瓶中，用水稀释定容至刻度，配制成1.0μg/mL的硒形态混合 标准溶液。再用水逐级稀释浓度为1.0μg/mL的硒形态混合标准溶液，配制成浓度为0.0μg/L、2.0μg/L、 5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L、100.0μg/L、200.0μg/L的混合标准系列溶液，临用现配。 注：可根据样品中硒代蛋氨酸、硒酸盐、亚硒酸盐的实际含量适当调整标准系列溶液中硒代蛋氨酸、硒酸根、亚硒酸 根的质量浓度。 5仪器与设备 5.1液相色谱－电感耦合等离子体质谱联用仪（LC-ICP-MS）。 5.2天平：感量分别为0.01mg、0.1mg和1mg。 5.3低温离心机：转速≥9000r/min。 5.4恒温超声波清洗器：可控温0℃～80℃（温度精度±2℃） 5.5pH计：精度为0.01。 5.6高速粉碎机：转速≥3000r/min。 5.7水系滤膜：