ICS 65.020.30 CCS B 40 团体 标准 T/SHZSAQS 00162—2022 牛羊布鲁氏菌病快速诊断技术规范 2022-11-09发布 2022-11-09实施 石河子市质量标准化协会 发布 全国团体标准信息平台 T/SHZSAQS 00162—2022 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ II 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 原理 ................................ ................................ .............. 1 5 材料设备 ................................ ................................ .......... 1 5.1检测卡 ................................ ................................ ............ 1 5.2其他 ................................ ................................ .............. 2 6 实验流程 ................................ ................................ .......... 2 6.1血清检测样本的制备 ................................ ................................ 2 6.2胶体金试纸条快速检测 ................................ .............................. 2 7 结果判定 ................................ ................................ .......... 2 8 废弃物处理 ................................ ................................ ........ 2 9 人员防护 ................................ ................................ .......... 3 10注意事项 ................................ ................................ ........... 3 全国团体标准信息平台 T/SHZSAQS 00162—2022 II 前 言 本文件参照 GB/T1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则 》给出 的规则起草。 本文件起草单位： 石河子大学动物科技学院 。 本文件主要起草人 ：张辉、邓兴梅、王震、郭嘉、王勇、孙志华、吴洁、周霞、刘良波 、张 豫、何开兵、赵天艺、刘航、张静、何白雪、陈杨 。 全国团体标准信息平台 T/SHZSAQS 00162—2022 1 牛羊布鲁氏菌病快速诊断技术规范 1 范围 本文件规定了牛羊布鲁氏菌病快速诊断 的术语与定义及原理、材料设备、实验流程、 结果判定、废弃物处理、人员防护、注意事项等，适用于牛羊布鲁氏菌病的快速诊断 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版 本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB19489 实验室生物安全通用要求 GB/T18646 动物布鲁氏菌病诊断技术 NY/T541 动物疫病实验室检验采样方法 3 术语和定义 GB19489、GB/T18646 、NY/T541中界定的术语与定义适用于本文件。 4 原理 本文件采用胶体金免疫分析技术，将氯金酸还原法制定一定直径的金颗粒，标记布鲁 氏菌蛋白。以硝酸纤维素膜为载体，膜上含有被事先固定于膜上的检测带（ T）的布鲁氏菌 蛋白和质控带（ C）的二抗。检测时，将血清加到试纸条的加样孔中，血清在层析作用下向 试纸条的另一端移动，此过程中布鲁氏菌抗体与胶体金形成复合物，再与固定在膜上的抗 体特异性结合，并被其截获而显现红色。 5 材料设备 5.1检测卡 布鲁氏菌抗体 检测试纸条装在塑料卡中制成检测卡，铝箔密封， 内装干燥剂，室温或 冷藏保存。测试卡结构及测试部位如下图所示。 全国团体标准信息平台 T/SHZSAQS 00162—2022 2 图1检测卡组成示意图 5.2其他 毛细滴管 、离心机。 6 实验流程 6.1 血清检测样本的制备 将收集的 待测牛羊血液 样品置于采集 管中37℃温箱1小时,再置4℃冰箱内3～4小时.待 血液凝固血块收缩后 ,用毛细滴管吸取血清 ，于2000rpm离心15分钟,取上清待检。 6.2 胶体金试纸条快速检测 取适量的检测样品（ 80L～120μL，滴管3滴～4滴），缓慢滴加到样品孔中，当 看到红 色液体在试纸条上移动时，放慢加样速度。整个加样过程控制在 1min内完成。加样完成后 将试纸条平放在桌面上， 5min～30min内观察结果。 7 结果判定 阳性结果：在试纸条上出现两条红色的条带。 阴性结果：在试纸条上仅在质控线处出现一条红色的条带。 无效结果：在质控线未出现红色的条带。 8 废弃物处理 检测过程中的废弃物，应收集后高压灭菌处理。高压灭菌后，交由指定的医疗垃圾处 理站销毁。 S T C 样品孔 检测区 检测线 质控线 全国团体标准信息平台 T/SHZSAQS 00162—2022 3 9 人员防护 实验室工作人员在上班前应进行个人卫生处置，对全身进行喷雾消毒；进入实验室后 必须穿工作衣、戴工作帽、手套、胶套、医 用防护口罩、防护眼镜或面罩，穿隔离衣；实 验室工作人员在每次接触标本后立即进行清洗和消毒， 手消毒可用 75%乙醇或用 0.3%～0.5% 碘伏，严格按照洗手法搓揉 1～2分钟，洗手应采用非接触式的洗手装置。 10 注意事项 若质控线不出现时，检测结果无效，必须重新检测；检测过程中的废弃物，应收集后 高压灭菌处理。高压灭菌后送到指定的医疗垃圾处理站销毁。 ------------------------------------------------- 全国团体标准信息平台