ICS 65.020.20 CCS B 05 14 山西省 地方标准 DB14/T 1613—2023 代替 DB14/T 1613 -2018 大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程 2023 - 11 - 13发布 2024 - 02 - 13实施 山西省市场监督管理局 发布 DB14/T 1613 —2023 I 目次 前言 ................................ ................................ ................. II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 病圃建设 ................................ ................................ ........... 1 5 鉴定前准备 ................................ ................................ ......... 1 6 鉴定方法 ................................ ................................ ........... 2 7 鉴定圃管理 ................................ ................................ ......... 2 8 调查 ................................ ................................ ............... 3 9 抗性评价 ................................ ................................ ........... 3 附录A（资料性） 调查用表 ................................ ............................. 4 附录B（资料性） 生理小种 鉴别 ................................ ......................... 5 DB14/T 1613 —2023 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替 DB14/T 161 3—2018《大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程 》，与DB14/T 1612 — 2018相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： ——增加了病圃建设 （见第 3章）； ——增加了鉴定圃管理 （见第 3章）； ——增加了调查人及 记载人的信息 （见附录 A）。 本文件由山西省农业农村厅提出、组织实施和监督检查。 本文件由 山西省市场监督管理局对标准的组织实施情况进行监督检查。 本文件由 山西省农业标准化技术委员会（ SXS/TC19 ）归口。 本文件起草单位：山西农业大学。 本文件主要起草人： 陈妍、张海平、 聂萌恩。 —— 2018年首次发布 为DB14/T 161 3—2018； —— 本次为第一次修订。 DB14/T 1613 —2023 1 大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了大豆种质资源抗胞囊线虫鉴定技术的病圃建设、鉴定试验准备、鉴定方法、鉴定圃管 理和抗性评价标准。 本文件适用于大豆种质资源抗胞囊线虫抗性鉴定和抗性评价。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 胞囊线虫病 指大豆胞囊线虫病，是由病原物大豆胞囊线虫（ Heterodera Glycines Ichinode ）感染引起的土传 病害，其主要症状为叶片变黄，发育不良，植株矮小，开花少，结荚少甚至不结荚。大豆根系根瘤数明 显减少，且不发达。在感病初期，根系附着白色、黄褐色小颗粒，后期根系开始腐烂，导致地上部分枯 死。 生理小种 简称为“小种”，在形态上相似而在培养性状、生理、生化、病理（致病力）或其他特性上有差异 的生物型或生物群型。 鉴别寄主 用于鉴别病原物生理小种（菌系、毒系）的抗病性不同的一套寄主植物品种。 4 病圃建设 立地条件 病圃所在地块应地势平整，形状规正，肥力均匀，排灌方便，不受阴庇，具有人工灌溉措施。 面积 根据鉴定规模确定病圃面积，但不应小于 100 m2。 5 鉴定前准备 DB14/T 1613 —2023 2 塑钵制备 将厚度 0.1 mm的透气性塑料膜裁为宽 26 cm，高22.5 cm的小块，用订书机将其制成宽 11 cm，高22 cm的袋状塑料钵。 接种病土制备 根据试验需要在病圃取适量的病土（大豆胞囊线虫密度≥ 30个胞囊 /100 g风干土），将病土与无菌 20目细沙以 2:1的比例充分混匀后制备成试验病土。 6 鉴定方法 田间病圃法 6.1.1 选择大豆胞囊线虫密度 ≥30个胞囊/100 g风干土的病圃，当气温大于 20 ℃时播种。 6.1.2 穴播，行距 50 cm，株距13 cm。每份材料播种 10穴。 6.1.3 每穴留苗 1株。 6.1.4 每30个材料设 1个感病对照。 6.1.5 同时种植 1套生理小种鉴别材料。 病土塑钵法 6.2.1 将试验病土装入塑钵至距钵口 1 cm处。 6.2.2 将装好土的塑钵依次装入塑料箱中，放于温室。 6.2.3 将塑料钵中土壤浇透，待钵内土壤干湿程度适宜后开始播种。每钵留苗 3粒种子，表面覆盖病 土1 cm。 6.2.4 出苗后每钵留苗 2株，每个品种 3个重复。 6.2.5 每30个材料设 1个感病对照。 6.2.6 同时种植 1套生理小种鉴别材料，随机摆放。 6.2.7 温室温度保持在 25 ℃ ～ 30 ℃，含水量控制在 50% ～ 60%。 人工接种鉴定法 6.3.1 试验在温室中进行。 将待鉴定的种质在育苗盘中育苗，同时播种小种鉴别材料。 6.3.2 将出苗后子叶展开、根系发达、健壮一致的植株移栽到 装有灭菌沙土的 塑钵中，每钵 2株，三 次重复。 6.3.3 每30个材料设 1个感病对照。 6.3.4 提前在病土中种植感病品 种，在胞囊显盛期，将根系上的胞囊冲洗下来，制备成浓度为 1 000 个/ml的卵悬浮液。 6.3.5 待鉴定材料在移栽后 3天接种卵悬浮液 2 mL。 6.3.6 温室温度保持在 25 ℃ ～ 30 ℃，含水量控制在 50% ～ 60%。 7 鉴定圃管理 播种后，应及时补充水分，保持土壤湿润。及时中耕除草，鉴定期间不使用杀菌剂和除草剂。 DB14/T 1613—2023 3 8 调查 待感病对照白色胞囊突破根系表皮时即可调查。 将待调查植株根系上的土轻轻抖掉或用水冲洗干 净、晾干，统计其根上的胞囊数。鉴定调查表格见附录 A。 9 抗性评价 生理小种鉴别 大豆胞囊线虫生理小种划分具体见附录 B。 鉴定有效性评价 感病对照 品种 Lee根系上的胞囊数应在 30.0个以上，抗性级别达高 感，视为该次鉴定有效。 抗性级别划分 根据根系平均 胞囊数进行抗性 级别划分，划分依据 见表 1。 表1 大豆对胞囊线虫的 抗性级别 划分依据 抗性级别 抗性类别 胞囊数与症状 0 免疫（ I） （根系胞囊数为 0，植株生长正常） 1 高抗（ HR） （0＜根系胞囊数 ≤3.0，植株正常生长） 3 抗（ R） （3.0＜根系胞囊数 ≤10.0，植株生长基本正常或部分矮黄） 7 感（ S） （10.0＜根系胞囊数 ≤30.0，植株矮小，叶片发黄、结实少） 9 高感（ HS） （根系胞囊数＞ 30.0，植株不结实，干枯死亡） 重复鉴定 当鉴定结果为抗或高抗时（抗性 级别划分依据见表1），应进行重复鉴定确定其抗性。若重复鉴定 结果有差异，以抗性级别低的结果为准。确定抗性后，将抗性品种移栽。 DB14/T 1613 —2023 4 附录 A （资料性） 调查用表 A.1 大豆抗胞囊线虫鉴定调查表 大豆抗胞囊线虫鉴定调查表见表 A.1。 表A.1 年大豆抗胞囊线虫鉴定调查汇总表 播种日期： 鉴定 编号 品种名称 出苗日期 调查日期 胞囊数 平均胞 囊数 病情 指数 抗性 评价 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1