(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210537258.X (22)申请日 2022.05.18 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114652736 A (43)申请公布日 2022.06.24 (73)专利权人 浙江省肿瘤医院 地址 310022 浙江省杭州市拱 墅区半山 东 路1号 (72)发明人 王晓稼　雷蕾　 (74)专利代理 机构 北京国翰知识产权代理事务 所(普通合伙) 11696 专利代理师 张天辰 (51)Int.Cl. A61K 31/7088(2006.01) A61K 31/565(2006.01)A61K 48/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 7/01(2006.01) (56)对比文件 CN 113201534 A,2021.08.0 3 审查员 贾星航 (54)发明名称 一种非编码RNA TDRKH-AS1作为标志物和治 疗靶点的用途 (57)摘要 本发明提供一种非编码RNA  TDRKH‑AS1作为 标志物和治疗靶点的用途， 属于肿瘤生物治疗领 域， 公开了一种 非编码RNA  TDRKH‑AS1在制备预 测乳腺癌氟维司群耐药的检测剂中的用途， 公开 了抑制非编码RNA  TDRKH‑AS1表达的shRNA的用 途， 该shRNA的编码序列如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID  NO.2所示， 或SEQ  ID NO.3和SEQ  ID NO.4所示， 或SEQ ID NO.5和SEQ  ID NO.6所示， 能够有效敲 低非编码RNA  TDRKH‑AS1的表达， 从而提高耐药 乳腺癌细胞对氟维司群的敏感性， 具备良好的药 物开发前 景。 权利要求书1页 说明书12页 序列表3页 附图5页 CN 114652736 B 2022.08.30 CN 114652736 B 1.一种抑制非编码RNA  TDRKH‑AS1表达的shRNA在制 备逆转乳腺癌氟维司群耐药的药 物中的用途， 其特 征在于： 所述shRNA的编码序列选自1)、 2)、 3)中的一种： 1) SEQ ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示的编码序列； 2) SEQ ID NO.3和SEQ  ID NO.4所示的编码序列； 3) SEQ ID NO.5和SEQ  ID NO.6所示的编码序列。 2.一种构建物在制备增加乳腺癌细胞对氟维司群敏感性的药物中的用途， 其特征在 于： 所述构建物由权利要求1所述的shRNA插 入慢病毒载体质粒pLKO.1 ‑GFP‑Puro所得。 3.一种检测非编码RNA  TDRKH‑AS1表达情况的引物对在制备预测乳腺癌氟维司群耐药 的检测剂中的用途。 4.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于： 所述引物对如SEQ  ID NO.7和SEQ  ID NO.8 所示。 5.一种抑制非编码RNA  TDRKH‑AS1表达的慢病毒的构 建方法， 其特征在于： 包括将权利 要求1所述的shRNA通过Age  I和EcoR I酶切位点插入慢病毒载体质粒pLKO.1 ‑GFP‑Puro， 然 后与psPAX2和pMD2.G共转染到宿主细胞2 93FT培养。 6.一种抑制非编码RNA  TDRKH‑AS1表达的shRNA和氟维司群在制备治疗乳腺癌药物中 的用途， 其特 征在于： 所述shRNA的编码序列选自1)、 2)、 3)中的一种： 1) SEQ ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示； 2) SEQ ID NO.3和SEQ  ID NO.4所示； 3) SEQ ID NO.5和SEQ  ID NO.6所示。 7.一种药物 组合物， 包括氟维司群， 其特征在于： 还包括权利要求1所述的shRNA或权利 要求2所述的构建物， 以及药 学上可接受的载体和/或辅料。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114652736 B 2一种非编码RNA  TDRKH‑AS1作为标志物和治疗靶点的用途 技术领域 [0001]本发明属于肿瘤生物治疗领域， 具体涉及一种非编码RNA  TDRKH‑AS1作为标志物 和治疗靶点的用途。 背景技术 [0002]乳腺癌是当今全球范围内发病率最高的女性恶性肿瘤， 每年发病约为30.4万， 发 病率呈现持续上升的趋势， 严重影响 女性健康。 而乳腺癌中又有将近70% 为激素受体阳性乳 腺癌， 所以基于激素受体阳性乳腺癌的治疗方法和药物显得至关重要。 内分泌治疗就是现 有技术中常见 的治疗该类乳腺癌的方法， 其虽然是现有技术中较有效的治疗方法， 但其仍 存在较大缺陷， 即内分泌治疗中的原发或继发内分泌耐药， 该类耐药特性会严重影响患者 的治疗效果， 使得治疗效果无法达到预期。 而目前尚无有效的生物标志物可用于预测氟维 司群敏感性或用于靶向治疗 逆转耐药。 [0003]近年来以非编码RNA为核心的表观遗传调控机制在生命活动中的作用越来越受到 重视。 长非编码RNA是一类转录本长度在200nt以上的非编码RNA分子， 通常被认 为不具备编 码蛋白功能。 但越来越多研究显示长非编码RNA的表达在不同的组织具有高度特异 性， 不仅 其表达水平与肿瘤发展的不同阶段、 不同组织学类型密切相关， 可以作为肿瘤检测的特异 标志物； 而且长非编码RNA在肿瘤发生发展中的重要的调控作用也显示其作为肿瘤治疗靶 点的可能性。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种非编码RNA  TDRKH‑AS1作为标志物和治疗靶点的用 途， 通过检测非编码RNA  TDRKH‑AS1在乳腺癌中的表达， 能够预测乳腺癌氟维司群耐药， 通 过敲低非编码RNA  TDRKH‑AS1的表达能够提高耐药乳腺癌细胞对氟维司群的敏感性。 [0005]本发明为实现上述目的所采取的技 术方案为： [0006]一种抑制非编码RNA  TDRKH‑AS1表达的shRNA在制备逆转氟维司群耐药 的药物中 的用途， 上述shRNA的编码序列选自1)、 2)、 3)中的一种： [0007]1) SEQ ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示的编码序列； [0008]2) SEQ ID NO.3和SEQ  ID NO.4所示的编码序列； [0009]3) SEQ ID NO.5和SEQ  ID NO.6所示的编码序列。 [0010]一种构建物在制备增加乳腺癌细胞对氟维司群敏感性的药物中的用途， 该构建物 由上述shRNA插 入慢病毒载体质粒pLKO.1 ‑GFP‑Puro所得。 [0011]在一些实施方式 中， 上述构建物以冻干制剂形式保存。 [0012]一种非编码RNA  TDRKH‑AS1在制备 预测乳腺癌氟维司群耐药的检测剂中的用途。 [0013]在一些实施方式中， 上述检测剂包括用于检测非编码RNA  TDRKH‑AS1的表达情况 的引物对。 [0014]在一些实施方式 中， 上述引物对如SEQ  ID NO.7和SEQ  ID NO.8所示。说　明　书 1/12 页 3 CN 114652736 B 3