(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210533035.6 (22)申请日 2022.05.17 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114622013 A (43)申请公布日 2022.06.14 (73)专利权人 中南大学湘雅医院 地址 410008 湖南省长 沙市湘雅路87号 (72)发明人 贺曦　刘彦伶　郑扬　 (74)专利代理 机构 长沙湘之星知识产权代理事 务所(普通 合伙) 43271 专利代理师 刘向丹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01)(56)对比文件 CN 109055528 A,2018.12.21 CN 106841593 A,2017.0 6.13 CN 113789376 A,2021.12.14 CN 113295815 A,2021.08.24 佚名.rs202152371. 《dbSNP》 .2021, Regie Lyn P Santos- Cortez等 .Identificati on of ASAH1 as a susceptibi lity gene for fami lial keloids. 《European Journal of Human Genetics》 .2017, 审查员 魏应亮 (54)发明名称 一种青少年特发性 脊柱侧弯检测产品 (57)摘要 本发明涉及生物 技术及医学领域， 具体公开 了一种青少年特发性脊柱侧弯 检测产品， 所述产 品包括能特异性扩增致病基因的引物， 致病基因 为突变的 AGPAT5基因， 所述突变的 AGPAT5基因与 野生型AGPAT5基因的差异包括1个突变， 突变为 野生型AGPAT5基因编码区7号外显子第856位碱 基G突变为A， 突变的 AGPAT5基因的核苷酸序列如 SEQ ID NO.1所示。 产品为检测试剂盒时， 检测灵 敏度高、 检测结果 准确， 经济节约。 权利要求书1页 说明书6页 序列表4页 附图3页 CN 114622013 B 2022.08.19 CN 114622013 B 1.一种引物在制备青少年特发性脊柱侧弯致病基因的检测产品中的应用， 其特征在 于， 所述检测产品包括能特异性扩增青少年特发性脊柱侧弯致病基因的引物， 所述引物包 括核苷酸序列如SEQ  ID NO:15所示的引物B7 ‑F以及核苷酸序列如SEQ  ID NO:16所示的引 物B7‑R； 所述致病基因为突变的 AGPAT5基因， 所述突变的 AGPAT5基因与野生型 AGPAT5基因 的差异包括1个突变， 突变为野生型 AGPAT5基因编码区7号外显子第 856位碱基 G突变为A， 突 变的AGPAT5基因的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.根据权利要求1所述的引物在制备青少年特发性脊柱侧弯致病基因的检测产品中的 应用， 其特 征在于， 所述产品包括芯片或试剂盒 或生物试剂。 3.根据权利要求1所述的引物在制备青少年特发性脊柱侧弯致病基因的检测产品中的 应用， 其特征在于， 所述产品为检测试剂盒， 所述检测试剂盒还包括DNA扩增酶、 缓冲液、 dNTP混合物。 4.根据权利要求3所述的引物在制备青少年特发性脊柱侧弯致病基因的检测产品中的 应用， 其特征在于， 所述DNA扩增酶为Taq  DNA聚合酶， Taq  DNA聚合酶的浓度为1U/ μL； 所述 缓冲液为MgCl2溶液， MgCl2溶液的浓度为10mM； 所述dNTP混合物的浓度为10  mM。 5.根据权利要求4所述的引物在制备青少年特发性脊柱侧弯致病基因的检测产品中的 应用， 其特 征在于， 检测试剂盒中， 引物组、 DNA扩增酶、 缓冲液、 水的体积比为2:1:2:  4。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114622013 B 2一种青少年 特发性脊柱侧弯检测产品 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术及医学领域， 具体涉及一种青少年特发性脊柱侧弯检测产 品。 背景技术 [0002]脊柱侧弯 又称脊柱侧凸， 它是一种脊柱的三维畸形， 包括冠状位、 矢状位和轴位上 的序列异常。 其中， 青少年特发性脊柱侧弯是一种常见的脊柱畸形， 常发生于患者 10岁至骨 骼成熟期 。 青少年特发性脊柱侧弯的发病率在青少年中大约为2% ‑4%， 女性发病率显著高于 男性， 男女发病率大约为 1:8。 目前针对青少年特发性脊柱侧弯处理的手段主要有非手术治 疗和手术治疗， 非手术治疗主要适用于程度较低， 例如Cobb角在四十度以下同时进展较慢 的情况； 手术治疗用于畸形较为 严重的情况， 例如Cob b角在四十度以上的情况。 [0003]青少年特发性脊柱侧弯的病因很多， 例如 激素紊乱、 发育性神经肌肉功能障碍 （椎 旁肌） 等， 然而这些因素都不能完全揭示其机制。 越来越多的研究发现， 青少年特发性脊柱 侧弯有明显的遗传倾向， 多个相关的家系也被报道。 基于家系 连锁分析定位了多个与其相 关的区间， 例如， 19p13.3  (IS1)、 17p11.2  (IS2)、 8q12  (IS3)、 9q31 –q34 (IS4)以及17q2 5‑ qter (IS5)。 通过关联分析， 研究已经报道 LBX1、DNAAF1、ZMYND10 、PAX1、KIF6、SLC39A8 、 CHD7及PTK7与青少年特发性脊柱侧弯相关。 然而， 目前通过家系研究， 报道与青少年特发性 脊柱侧弯相关的基因仅有 MAPK7、HSPG2、POC5、AKAP2、 TTLL11与CELSR2。 针对以上可能的致 病基因的研究也只能部分揭示青少年特发性脊柱侧弯的发病机制 。 因此， 定位更多的疾病 相关基因， 且开发更多的检测产品， 为 其诊断、 预防与治疗提供新的思路迫在眉睫。 发明内容 [0004]本发明所解决的技术问题在于提供一种首次发现的青少年特发性脊柱侧弯的致 病基因为突变的 AGPAT5基因， 并提供了一种青少年特发性脊柱侧弯检测产品， 检测 灵敏度 高、 检测结果 准确， 经济节约。 [0005]本发明所解决的技 术问题采用以下技 术方案来实现： [0006]一种青少年特发性脊柱侧弯检测产品， 所述产品包括能特异性扩增所述青少年特 发性脊柱侧弯致病基因的引物， 致病基因为突变的 AGPAT5基因， 所述突变的 AGPAT5基因与 野生型AGPAT5基因的差异包括1个突变， 突变为野生型 AGPAT5基因编码区7号外显子第856 位碱基G突变为A， 突变的 AGPAT5基因的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 [0007]进一步地， 所述引物包括核苷酸序列如SEQ  ID NO:15所示的引物B7 ‑F以及核苷酸 序列如SEQ  ID NO:16所示的引物B7 ‑R。 [0008]进一步地， 所述产品包括芯片或试剂盒 或生物试剂。 [0009]进一步地， 所述产品为检测试剂盒， 所述检测试剂盒还包括DNA扩增酶、 缓冲液、 dNTP混合物。 [0010]进一步地， 所述DNA扩增酶为Taq  DNA聚合酶， Taq  DNA聚合酶的浓度为1U/ μL； 所述说　明　书 1/6 页 3 CN 114622013 B 3