(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210513302.3 (22)申请日 2022.05.12 (71)申请人 中国农业大 学 地址 100193 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 冯轶　吕佳红　张萌　吴月　高敏　 李洁　彭梦群　吴欣怡　朱沁原　 王忆　韩振海　张新忠　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 张立娜 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 MdLOG基因启动子缺失片段及其在检测苹果 属植物耐盐性中的应用 (57)摘要 本发明公开了MdLOG基因启动子缺失片段及 其在检测苹果属植物耐盐性中的应用。 本发明提 供了MdLOG基因启动子缺失片段作为 分子标记在 如下任一中的应用： 检测苹果属植物的砧木耐盐 性高低， 检测苹果属植物盐害指数高低， 检测苹 果属植物是否为耐盐植物， 检测苹果属植物能否 用作耐盐砧木， 所述MdLOG基因启动子缺失片段 为SEQ ID No.3所示DNA片段。 MdLOG基因启动子 片段缺失现象与耐盐性正相关， 利用该片段的缺 失和存在可快速筛选后代中的耐盐性植株， 在植 物的耐盐性领域中具有重要意 义。 权利要求书3页 说明书8页 序列表2页 附图1页 CN 114836566 A 2022.08.02 CN 114836566 A 1.MdLOG基因启动子缺失片段作为分子标记在 如下任一中的应用： (A1)检测或辅助检测苹果属植物的砧木耐盐性高低， 或制备用于检测或辅助检测苹果 属植物的砧木耐盐性高低的产品； (A2)检测或辅助检测苹果属植物盐害指数高低， 或制备用于检测或辅助检测苹果属植 物盐害指数高低的产品； (A3)检测或辅助检测待测苹果属植物是否为耐盐植物， 或制备用于检测或辅助检测待 测苹果属植物是否为耐盐植物的产品； (A4)检测或辅助检测待测苹果属植物能否用作耐盐砧木， 或制备用于检测或辅助检测 待测苹果属植物能否用作耐盐砧木的产品； 所述MdLO G基因启动子缺失片段为SEQ  ID No.3所示DNA片段。 2.用于检测MdLO G基因启动子缺失片段的物质在 如下任一中的应用： (A1)检测或辅助检测苹果属植物的砧木耐盐性高低， 或制备用于检测或辅助检测苹果 属植物的砧木耐盐性高低的产品； (A2)检测或辅助检测苹果属植物盐害指数高低， 或制备用于检测或辅助检测苹果属植 物盐害指数高低的产品； (A3)检测或辅助检测待测苹果属植物是否为耐盐植物， 或制备用于检测或辅助检测待 测苹果属植物是否为耐盐植物的产品； (A4)检测或辅助检测待测苹果属植物能否用作耐盐砧木， 或制备用于检测或辅助检测 待测苹果属植物能否用作耐盐砧木的产品； 所述MdLO G基因启动子缺失片段为SEQ  ID No.3所示DNA片段。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于： 所述用于检测MdLOG基因启动子缺失片段 的物质为用于扩增所述MdLO G基因启动子缺失片段的引物对。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于： 所述引物对中的上游引物根据苹果属植物 基因组中位于所述MdLOG基因启动子缺失片段上游的序列设计， 下游引物根据苹果属植物 基因组中位于所述MdLO G基因启动子缺失片段 下游的序列设计； 进一步地， 所述引物对由SEQ  ID No.4所示的单链DNA分子和SEQ  ID No.5所述的单链 DNA分子组成。 5.如下任一方法： 方法1： 一种检测或辅助检测苹果属植物的砧木耐盐性高低的方法， 包括如 下步骤(B1) 和(B2)： (B1)检测待测苹果属植物的基因 组中是否含有MdLO G基因启动子缺失片段； (B2)根据(B1)结果， 按照如下确定所述待测苹果属植物的砧木耐盐性高低： 基因组中 不含有所述MdLOG基因启动子缺 失片段的待测苹 果属植物的砧木耐盐性高于或候选高于基 因组中含有所述MdLO G基因启动子缺失片段的待测苹果属植物的砧木耐盐性； 所述MdLO G基因启动子缺失片段为SEQ  ID No.3所示DNA片段； 方法2： 一种检测或辅助检测苹果属植物盐害指数高低的方法， 包括如下步骤(C1)和 (C2)： (C1)检测待测苹果属植物的基因 组中是否含有MdLO G基因启动子缺失片段； (C2)根据(C1)结果， 按照如下确定所述待测苹果属植物盐害指数高低： 基因组中不含权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114836566 A 2有所述MdLOG基因启动子缺 失片段的待测苹 果属植物的盐害指数低于或候选低于基因组中 含有所述MdLO G基因启动子缺失片段的待测苹果属植物的盐害指数； 所述MdLO G基因启动子缺失片段为SEQ  ID No.3所示DNA片段； 方法3： 一种检测或辅助检测待测苹果属植物是否为耐盐植物的方法， 包括如下步骤 (D1)和(D2)： (D1)检测待测苹果属植物的基因 组中是否含有MdLO G基因启动子缺失片段； (D2)根据(D1)结果， 按照如下确定所述待测苹果属植物是否为耐盐植物： 若待测苹果 属植物的基因组中不含有MdLOG基因启动子缺失片段， 则所述待测苹果属植物为或候选为 耐盐植物； 若待测苹 果属植物的基因组中含有MdLOG基因启动子缺 失片段， 则所述待测苹果 属植物不 为或候选不 为耐盐植物； 所述MdLO G基因启动子缺失片段为SEQ  ID No.3所示DNA片段； 方法4： 一种检测或辅助检测待测苹果属植物能否用作耐盐砧木的方法， 包括如下步骤 (E1)和(E2)： (E1)检测待测苹果属植物的基因 组中是否含有MdLO G基因启动子缺失片段； (E2)根据(E1)结果， 按照如下确定所述待测苹果属植物能否用作耐盐砧木： 若待测苹 果属植物的基因组中不含有MdLOG基因启动子缺失片段， 则所述待测苹果属植物能或候选 能用作耐盐砧木； 若待测苹 果属植物的基因组中含有MdLOG基因启动子缺 失片段， 则所述待 测苹果属植物不能或候选不能用作耐盐砧木； 所述MdLO G基因启动子缺失片段为SEQ  ID No.3所示DNA片段。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于： 检测所述待测 苹果属植物的基因组中是否 含有所述MdLO G基因启动子缺失片段的方法为如下(F1)或(F2)： (F1)直接测序； (F2)以所述待测苹果属植物的基因组为模板， 用权利要求3或4中所述的引物对进行 PCR扩增， 根据扩增结果确定所述待测苹 果属植物的基因组中是否含有所述MdLOG基因启动 子缺失片段。 7.根据权利要求1 ‑6中任一所述的应用或方法， 其特征在于： 所述待测苹果属植物均为 耐盐苹果属 植物、 非耐盐苹果属植物， 或者耐盐苹果属 植物和非耐盐苹果属 植物的杂交后 代。 8.根据权利要求7所述的应用或方法， 其特征在于： 所述耐盐苹果属植物为八棱海棠， 所述非耐盐苹果属植物为M9。 9.如下任一方法： 方法5： 一种培育耐盐苹果属植物或者培育用作耐盐砧木苹果属植物的方法， 包括如下 步骤： 培育基因组中不含有权利要求 1‑6任一中所述MdLOG基因启动子缺 失片段的苹 果属植 物； 方法6： 一种培育非耐盐苹果属植物或者培育用作非耐盐砧木苹果属植物的方法， 包括 如下步骤： 培育基因组中含有权利要求 1‑6任一中所述MdLOG基因启动子缺 失片段的苹 果属 植物。 10.如下任一 生物材料： (G1)DNA片段， 如SEQ  ID No.3所示；权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114836566 A 3