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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210517926.2 (22)申请日 2022.05.12 (71)申请人 成都大学 地址 610000 四川省成 都市外东十陵镇 (72)发明人 张亚玉 梁浩 孙海 周季欣 付育臣 (74)专利代理 机构 成都华复知识产权代理有限 公司 512 98 专利代理师 朱娇艳 (51)Int.Cl. C07K 14/415(2006.01) C12N 15/29(2006.01) C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 人参PgWRKY2转录因子及其应用 (57)摘要 本发明涉及生物技术领域, 具体涉及人参 PgWRKY2转录因子及其应用; 本发明公开了人参 PgWRKY2转录因子对磷营养的调控作用, 通过揭 示人参磷胁迫途径中关键酶的表达特异性, 实现 检测人参逆境胁 迫中的磷营养胁迫, 从而提出有 效调控措施, 具有重要的应用价 值。 权利要求书1页 说明书3页 序列表2页 附图2页 CN 115260299 A 2022.11.01 CN 115260299 A 1.人参PgWRKY2转录因子, 其特征在于, 所述的人参PgWRKY2转录因子 的核苷酸序列如 SEQ ID No.1所示; 所述的人参PgWRKY2转录因子的编码蛋白序列如SEQ ID No.2所示。 2.根据权利要求1所述的人参PgWRKY2转录因子, 其特征在于, 扩展所述的人参PgWRKY2 转录因子的cDNA序列引物对为: 上游引物序列如SEQ ID No.3所示, 下游引物序列如SEQ ID No.4所示。 3.根据权利要求1所述的人参PgWRKY2转录因子, 其特征在于, 荧光检测所述的人参 PgWRKY2转录因子的引物对为: 上游引物序列如SEQ ID No.5所示, 下游引物序列如SEQ ID No.6所示。 4.一种人参PgWRKY2转录因子在人参器官组织中的应用, 其特征在于, 所述的人参 PgWRKY2转录因子在人参的主根、 侧根、 茎和叶中均有表达, 且在侧根和主根中的表达量最 高, 在叶和茎中的表达量 最低。 5.一种人参PgWRKY2转录因子在不同外源磷浓度胁迫下提高人参抗逆性的应用, 其特 征在于, 所述的人参PgWRKY2转录因子在2.0mM浓度下表达量最高, 在4.0mM浓度下次之, 在 0mM、 0.5mM和1.0mM浓度下表达量相对较低, 且表达从0mM浓度至2.0mM浓度随磷浓度的增加 而上升, 并呈正相关的趋势。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115260299 A 2人参PgWRKY2 转录因子及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技 术领域, 具体涉及人参PgWRKY2转录因子及其应用。 背景技术 [0002]磷(P)是植物必需的大量营养元素, 在植物中参与 多种代谢过程, 对其生长 发育起 着至关重要的作用。 植物对磷环境的适应包括形态生理基础和基因表达调控。 例如磷转运 体(PTs)的调控、 氨基酸及衍生物、 类黄酮、 磷酸 酶的分泌以及根结构的改变。 磷的代谢途径 受多种基因调控, 在不同的磷条件下, 这些基因的表达也不同。 如在水稻中, 低磷反应的主 要转录调节因子OsPHR2通过激活磷饥饿诱导的基因PHT1与基因启动子区域中的P1BS(PHR1 结合序列GNATATNC) 基序结合, 以此来调控 对磷环境的适应。 [0003]此外, 也有研究在玉米、 大豆、 黑麦草、 大麦和小麦等作物中分析了植物对磷胁迫 反应的分子机制。 目前在研究植物磷胁迫方面, 主要集中于拟南芥、 水稻、 玉米等模式植物 和大田作物中, 在药用植物中的研究甚少, 而在人参中仍未见报道, 同时, WRKY型转录因子 在人参中的研究也较少, 虽然有研究报道了人参中的几个WRKY型转录因子受水杨酸、 脱落 酸、 Na Cl等激素和盐诱导表达, 但未有研究发现人参在磷胁 迫诱导下特异 性表达的WRKY型 转录因子, 也未有一种从基因表达水平上去检测人参受磷胁迫的标志 物及技术方法。 发明内容 [0004]针对现有技术所存在的上述缺点, 本 发明公开了人参PgWRKY2 转录因子对磷营养 的调控作用, 通过揭示人参磷胁迫途径中关键酶的表达特异性, 实现检测人参逆境胁迫中 的磷营养胁迫, 从而提出有效调控措施, 具有重要的应用价 值。 [0005]为实现上述目的, 本发明提供了如下技 术方案: [0006]人参PgWRKY2转录因子, 所述的人参PgWRKY2转录因子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示; [0007]所述的人参PgWRKY2转录因子的编码蛋白序列如SEQ ID No.2所示。 [0008]进一步的, 扩展所述的人参PgWRKY2转录因子的cDNA序列引物对为: 上游引物序列 如SEQID No.3所示, 下游引物序列如SEQ ID No.4 所示。 [0009]进一步的, 荧光检测所述的人参PgWRKY2转录因子的引物对为: 上游引物序列如 SEQID No.5所示, 下游引物序列如SEQ ID No.6所示。 [0010]本发明还提供了一种人参PgWRKY2转录因子在人参器官组织中的应用, 所述的人 参PgWRKY2转录因子在人参的主根、 侧根、 茎和叶中均有表达, 且在侧根和主根中的表达量 最高, 在叶和茎中的表达量 最低。 [0011]此外, 本发明还提供了一种人参PgWRKY2转录因子在不同外源磷浓度胁迫下提高 人参抗逆性的应用, 所述的人参PgWRKY2转录因子在2.0mM浓度下表达量最高, 在4.0mM浓度 下次之, 在0mM、 0.5mM和1.0mM浓度下表达量相对较低, 且表达从0mM浓度至2.0 mM浓度随 磷浓度的增 加而上升, 并呈正相关的趋势。说 明 书 1/3 页 3 CN 115260299 A 3
专利 人参PgWRKY2转录因子及其应用
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