(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210511497.8 (22)申请日 2022.05.11 (71)申请人 山东大学第二医院 地址 250033 山东省济南市天桥区天桥区 北园大街247号 (72)发明人 赵小刚　李培超　田忠献　郭嘉仲　 姜宁　李佩蔚　周洁　李令冰　 杨凌霄　 (74)专利代理 机构 济南金迪知识产权代理有限 公司 37219 专利代理师 孙振家 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/11(2006.01)C12N 15/113(2010.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 人HHIPL1 mRNA在非小细胞肺癌诊断、 预后 评估和靶向治 疗中的应用及试剂盒 (57)摘要 本发明涉及人HHIPL1mRNA在非小细胞肺癌 诊断、 预后评估和靶向治疗中的应用及试剂盒。 本发明率先设计出能够特异性检测HHIPL1mRNA 表达水平的 引物对以 及能够特异性敲低 HHIPL1mRNA表达的siRNA， 并首次证实 HHIPL1mRNA在非小细胞肺癌中的异常上调， 促进 癌细胞增殖与转移， 且与不良预后密切相关。 在 此基础之上， 本发明提出了HHIPL1mRNA在非小细 胞肺癌诊断、 预后评估以及靶向治疗中用途， 以 及本发明所设计的够特异性检测HHIPL1mRNA表 达水平的引物对与特异性敲低HHIPL1mRNA表达 的siRNA在HHIPL1mRNA在非小细胞肺癌诊 断、 预 后评估以及靶向治 疗中的应用。 权利要求书1页 说明书5页 序列表4页 附图2页 CN 114921545 A 2022.08.19 CN 114921545 A 1.人HHIPL1 mRNA在制备非小细胞肺癌诊断、 预后评估和靶向治疗产品中的应用。 2.如权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述应用中HHIPL1  mRNA为非小细胞肺癌诊 断与预后评估的生物标志物； 所述应用中HHIPL1  mRNA为非小细胞肺癌靶向治疗的作用靶 点。 3.如权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述HHIPL1  mRNA的核苷酸序列如SEQ  ID  NO.1所示。 4.如权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述非小细胞肺癌诊断和预后评估产品包括 特异性识别H HIPL1 mRNA逆转录产物cDNA的物质； 所述特异性识别HHIPL1  mRNA逆转录产物cDNA的物质选自特异性扩增HHIPL1mRNA的引 物对； 所述特异性扩增HHIPL1  mRNA的引物对为SEQ  ID NO.2所示的上游引物和SEQ  ID NO.3 所示的下游引物。 5.如权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述非小细胞肺癌靶向治疗产品包括特异性 敲低HHIPL1 mRNA表达的物质； 所述特异性 敲低HHIPL1 mRNA表达的物质选自特异性干扰H HIPL1 mRNA表达的siRNA； 所述特异性干扰H HIPL1 mRNA表达的siRNA靶向识别序列如SEQ  ID NO.4所示。 6.如权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述非小细胞肺癌诊断和预后评估产品的检 测样本选自细胞、 组织、 血浆以及血清。 7.一种非小细胞肺癌诊断和预后 评估试剂盒， 所述试剂盒包括特异性识别HHIPL1mRNA 逆转录产物cDNA的物质。 8.如权利要求7所述的试剂盒， 其特征在于， 所述特异性识别HHIPL1  mRNA逆转录产物 cDNA的物质选自特异性扩增H HIPL1 mRNA逆转录产物cDNA的引物对； 所述特异性扩增HHIPL1  mRNA逆转录产物cDNA的引物对为SEQ  ID NO.2所示的上游引 物和SEQ ID NO.3所示的下游引物； 所述特异性 敲低HHIPL1 mRNA表达的物质选自特异性干扰H HIPL1 mRNA表达的siRNA； 所述试剂盒还 包括实时荧 光定量PCR的检测试剂。 9.一种非小细胞肺癌靶向治疗药物， 所述药物包括特异性敲低HHIPL1  mRNA表达的物 质。 10.如权利 要求9所述的药物， 其特征在于， 所述特异性敲低 HHIPL1 mRNA表达的物质选 自特异性干扰H HIPL1 mRNA表达的siRNA； 所述特异性 敲低HHIPL1 mRNA表达的物质选自特异性干扰H HIPL1 mRNA表达的siRNA； 所述特异性干扰H HIPL1 mRNA表达的siRNA靶向识别序列如SEQ  ID NO.4所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114921545 A 2人HHIPL1 mRNA在非小细胞肺癌诊断、 预后评估和靶向治疗中 的应用及 试剂盒 技术领域 [0001]本发明涉及人HHIPL1  mRNA在非小细胞肺癌诊断、 预后评估和靶向治疗中的应用 及试剂盒， 属于生物医学技 术领域。 背景技术 [0002]肺癌是导致癌症相关死亡的首要病因。 近年来， 尽管肺癌治疗技术得到了显著的 提高， 但患者5年总体生存率仍然 无法令人满意， 仅为20％左右。 肺癌根据组织病理学类型， 主要分为小细胞肺癌(15％)和非小细胞肺癌(Non ‑small cell lung cancer， NSCLC， 85％)， 其中最常见的两种NSCLC为肺腺癌(Lung  adenocarcinoma， LUAD)与肺鳞状细胞癌 (Lung squamous  cell carcinoma， LUSC)。 大多数肺癌患者在确诊时已经处于中晚期阶段， 这为NSCLC的治疗 带来了极大的挑战。 因此， 发现新的诊断标志物， 并明确其在NSCLC增殖与 转移进程中的作用及预后评估中的价值， 对于推动NSCLC临床诊疗策略的发展具有重要意 义。 [0003]逆转录‑定量聚合酶链式反应(Reverse  Transcription ‑quantitative   Polymerase  Chain Reaction,RT ‑qPCR)是一种体外特异性扩增目的DNA片段的技术,其中 逆转录环节以目标mRNA为模板合成互补cDNA片段， 定量PCR环节是以cDNA片段为模板合成 上、 下游引物之间的片段， 合 成目的片段的量与镶嵌在DNA双链中的荧光信号成正比。 因此， 设计出能够识别目的片段的特异性引物序列是目的mRNA定量 准确的重要保证。 发明内容 [0004]针对现有技术的不足， 本 发明提供了人HHIP L1 mRNA在非小细胞肺癌诊断、 预后评 估和靶向治疗中的应用及试剂盒。 [0005]本发明的技 术方案如下： [0006]人HHIPL1 mRNA在制备非小细胞肺癌诊断、 预后评估和靶向治疗产品中的应用。 [0007]根据本发明优选的， 所述应用中HHIPL1  mRNA为非小细胞肺癌诊断与预后评估的 生物标志 物。 [0008]根据本发明优选的， 所述应用中HHIPL1  mRNA为非小细胞肺癌靶向治疗的作用靶 点。 [0009]根据本发明优选 的， 所述诊断产品用于非小细胞肺癌的诊断； 所述预后评估产品 用于评估非小细胞肺癌 患者总生存期。 [0010]根据本发明优选的， 所述H HIPL1 mRNA的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 [0011]根据本发明优选的， 所述非小细胞肺癌诊断和预后评估产品包括特异性识别 HHIPL1mRNA逆转录产物cDNA的物质。 [0012]进一步优选的， 所述特异性识别HHIPL1  mRNA逆转录产物cDNA的物质选自特异性 扩增HHIPL1 mRNA的引物对。说　明　书 1/5 页 3 CN 114921545 A 3