(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210503351.9 (22)申请日 2022.05.10 (71)申请人 郑州大学 地址 450000 河南省郑州市高新 技术开发 区科学大道100号 申请人 河南申友医学检验所有限公司 (72)发明人 郭建成　占闽宁　冯帅升　王丙顺　 朱丹丹　孙晓晓　张悦　史健翔　 许红恩　刘海芳　薛夏　张静　 柳丹华　秦亚平　薛滨雨　杨雪绒　 (74)专利代理 机构 北京卫智易创专利代理事务 所(普通合伙) 16015 专利代理师 朱春野 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01)C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 用于维生素D和钙代谢相关基因分型的扩增 引物组及探 针、 试剂盒、 分型方法 (57)摘要 本发明公开了用于维生素D和钙代谢相关基 因分型的扩增引物组及探针、 试剂盒、 分型方法。 扩增引物组及探针包括： CYP2R1 ‑rs10741657位 点的ARMS引物组及探针： CYP2R1 ‑rs10741657野 生型正向引物、 突变型正向引物、 共用反向引物 及共用探针； GC ‑rs2282679位点的ARMS引物组及 探针： GC‑rs2282679野生型正向引物、 突变型正 向引物、 共用反向引物及共用探针； VDR ‑ rs2228570位点的ARMS引物组及探针： VDR ‑ rs2228570野生型正向引物、 突变型正向引物、 共 用反向引物、 及共用探针， 其序列分别如SEQ  ID  NO： 01～12所示。 能够对CYP 2R1‑rs10741657、 GC ‑ rs2282679以及VDR ‑rs2228570三个基因位点多 态性进行准确检测分析， 检测灵敏度高、 检测时 间短， 检测成本低， 操作方法简便 。 权利要求书2页 说明书11页 序列表3页 附图5页 CN 114807351 A 2022.07.29 CN 114807351 A 1.用于维生素D和钙代谢相关基因分型的扩增引物组及探针， 其特征在于， 包括： CYP2R1‑rs10741657位点的ARMS引物组及探针、 GC ‑rs2282679位点的ARMS引物 组及探针以 及VDR‑rs2228570位点的ARMS引物组及探针； 其中， 所述CYP2R1‑rs107416 57位点的ARMS引物组及探针包括： CYP2R1‑rs107416 57野生型正向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 01所示； CYP2R1‑rs107416 57突变型正向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 02所示； CYP2R1‑rs107416 57共用反向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 03所示； CYP2R1‑rs107416 57共用探针， 其序列如SEQ  ID NO： 04所示； 所述GC‑rs2282679位 点的ARMS引物组及探针包括： GC‑rs2282679野生型正向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 05所示； GC‑rs2282679突变型正向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 06所示； GC‑rs2282679共用反向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 07所示； GC‑rs2282679共用探针， 其序列如SEQ  ID NO： 08所示； 所述VDR‑rs2228570位点的ARMS引物组及探针包括： VDR‑rs2228570野生型正向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 09所示； VDR‑rs2228570突变型正向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 10所示； VDR‑rs2228570共用反向引物， 其序列如SEQ  ID NO： 11所示； VDR‑rs2228570共用探针， 其序列如SEQ  ID NO： 12所示。 2.用于维生素D和钙代谢相关基因分型的试剂盒， 其特征在于， 包括权利要求1所述的 用于维生素D和钙代谢相关基因分型的扩增引物组及探针。 3.根据权利要求2所述的用于维生素D和钙代谢相关基因分型的试剂盒， 其特征在于， 还包括PCR扩增试剂。 4.根据权利要求3所述的用于维生素D和钙代谢相关基因分型的试剂盒， 其特征在于， 包括扩增引物组及探针和PCR扩增试剂的扩增反应 体系配置为： 5.维生素D和钙代谢相关基因的分型方法， 其特征在于， 包括： 利用权利要求1所述的扩 增引物组及探针对维生素D和钙代谢相关基因进行扩增。 6.根据权利要求5所述的维生素D和钙代谢相关基因 的分型方法， 其特征在于， 包括： 利权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114807351 A 2用CYP2R1 ‑rs10741657位点的ARMS引物 组及探针、 GC ‑rs2282679位点的ARMS引物 组及探针 以及VDR‑rs2228570位点的ARMS引物组及探针对维生素D和钙代谢相关基因分别进行扩增。 7.根据权利要求6所述的维生素D和钙代谢相关基因的分型方法， 其特征在于， 扩增反 应体系为： 8.维生素D和钙代谢相关基因的分型方法， 其特征在于， 包括： 利用权利要求2～4任一 项所述的试剂盒对维生素D和钙代谢相关基因进行扩增。 9.根据权利要求8所述的维生素D和钙代谢相关基因的分型方法， 其特征在于， 利用 CYP2R1‑rs10741657位点的ARMS引物组及探针、 GC ‑rs2282679位点的ARMS引物 组及探针以 及VDR‑rs2228570位点的ARMS引物组及探针对维生素D和钙代谢相关基因分别进行扩增。 10.根据权利要求9所述的维生素D和钙代谢相关基因 的分型方法， 其特征在于， 扩增反 应体系为： 权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114807351 A 3