(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210499498.5 (22)申请日 2022.05.09 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114703298 A (43)申请公布日 2022.07.05 (73)专利权人 安徽农业大 学 地址 230000 安徽省合肥市长江西路13 0号 (72)发明人 金四华　耿照玉　江洪峰　税斐　 夏晶晶　贾羽晴　曹程程　丁元飞　 张泰康　贾富民　 (74)专利代理 机构 合肥中谷知识产权代理事务 所(普通合伙) 34146 专利代理师 杜瑶 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (56)对比文件 CN 112753650 A,2021.0 5.07 CN 111676295 A,2020.09.18 CN 106434909 A,2017.02.2 2 CN 109868323 A,2019.0 6.11 肖成等.家畜剩余采 食量性状候选 基因的研究进展. 《黑龙江畜牧兽医》 .2017,(第0 5期), 刘本帅等.北京鸭剩余采 食量与生产性能、 屠宰性能的相关性研究. 《中国家禽》 .2021,第43 卷(第9期),10 6-109. Hsiu-Lin Huang等.A n ovel SNP marker of ovalbumi n gene i n association with duck hatc hability. 《Theri ogenology》 .2013, 第79卷(第8 期),第1218-12 23页. T. Zeng等.As sociation analysis between feed efficiency studies and expression of hypothalamic neuropeptide genes in laying ducks. 《An imal Genetics》 .2016,第1-4页. 金四华等.肉鸭下丘脑C CKAR基因表达水平 及其与饲料利用率 性状的相关 分析. 《扬州大 学 学报(农业与生命科 学版)》 .2018,(第02期),97- 102. 谭斌等.天柱番鸭NPY 基因克隆及其在组织 中的表达分析. 《中国畜牧兽医》 .2019,(第04 期),19-28. 李亨.家禽繁殖性状相关基因的遗传效应及 组织表达规 律研究. 《中国博士学位 论文全文数 据库》 .2013,(第0 6期),D050-27. 审查员 谢庆宁 (54)发明名称 一种基于神经肽基因NPY鉴定鸭饲料利用率 性状的分子标记及其方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种基于神经肽基因NPY鉴定 鸭饲料利用率性状的分子标记及其方法和应用， 所述NPY基因具有如SEQ  ID NO.1所示的核苷酸 序列， 所述分子标记为T或C， 所述分子标记位于 所述核苷酸序列的第577位。 本发明利用PCR ‑ SSCP的方法来检测NPY基因的突变， 根据基因型 对鸭的饲料利用率性状进行选择， 建立了一种家 禽饲料利用率早期选择的育种方法， 该法简单、快速、 低成本、 不需要特殊的仪器， 适合实验的需 要。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图2页 CN 114703298 B 2022.10.25 CN 114703298 B 1.一种分型检测分子标记的试剂在鉴定鸭饲料利用率性状中的应用， 其特征在于， 所 述分子标记为位于如SEQ  ID NO.1所示核苷酸序列第557位， 所述分子标记为T或C， 所述SEQ   ID NO.1所示核苷酸序列为鸭神经肽基因 NPY的核苷酸序列； 若待测鸭分子标记类型为CC型， 该鸭饲料利用率性状高； 若待测鸭分子标记类型为CT 型或TT型， 该鸭饲料利用率 性状一般 。 2.一种利用分子标记鉴定鸭饲料利用率性状的方法， 其特征在于， 所述分子标记为位 于如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列第55 7位， 所述分子标记为T或C， 所述SEQ  ID NO.1所示核 苷酸序列为鸭神经肽基因 NPY的核苷酸序列， 所述方法包括以下步骤： （1） 提取鸭翅静脉 血液总DNA； （2） 以所述总DNA为模板， 利用特异性扩增引物进行PCR扩增， 获得扩增产物； 其中， 所述 特异性扩增引物的序列为： SEQ ID NO.2: Forward primer： G GACATGGCCAGATACTACTCG G； SEQ ID NO.3: Reverse primer： G GGTACATGAC CCCTGCATCT TT； （3） 对扩增产物进行基因分型检测 和测序， 获得待测鸭的分子标记类型； （4） 根据分子标记类型判断鸭饲料利用率 性状； 若待测鸭分子标记类型为CC型， 该鸭饲料利用率性状高； 若待测鸭分子标记类型为CT 型或TT型， 该鸭饲料利用率 性状一般 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114703298 B 2一种基于神经肽基因NPY鉴定鸭饲料利用率性状的分子标记 及其方法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子标记技术领域， 具体涉及一种基于神经肽基因NPY鉴定鸭饲料利 用率性状的分子标记及其方法和应用。 背景技术 [0002]鸭肉是我国消费者重要的优质蛋白质来源， 风味独特， 富含有益于人体健康的不 饱和脂肪酸， 占家禽消费量约25%， 深受消费者喜欢。 肉鸭主要有白羽肉鸭、 麻羽肉鸭、 番鸭 等， 其中白羽肉鸭的出栏量占整个肉鸭出栏量的80%~90%。 当前， 饲养的白羽肉鸭主要品种 有樱桃谷肉鸭、 Z型北京鸭等。 白羽肉鸭Q1系是新选育的一个品系， 以美国枫叶鸭父母代种 鸭为育种素材， 连续开展了六个世代的选育， 但对其生长发育规律等缺少研究。 以 NPY基因 作为影响屠宰性状的候选基因， 筛查Q 1系鸭的SNPs位点， 并分析其对屠宰性状的影响， 为白 羽肉鸭Q1系持续 开展选育和分子标记辅助选择、 饲养管理提供参 考。 [0003]NPY基因是1982年Tatemoto等研究人员 在研究肽酰胺时在猪脑组织中发现， 该基 因主要存在于动物的神经组织中， 对刺激动物采食活动以及参与机体能量代谢作用， 因此 得名神经肽 （Kazuhiko  Tatemoto,  Mats Carlquist  and Viktor Mutt. Neuropeptide   Y‑‑a novel brain peptide with structural  similarities  to peptide YY and  pancreatic  polypeptide[J].  Nature, 1982, 296 （5858） :  659‑660. ） 。 Clark等对成年 雌 性大鼠关于 NPY对采食量 （FI） 的研 究， 发现NPY对大鼠采食量有影响， 其不仅能够刺激饱食 大鼠进食， 而且同注射胰岛素组大鼠做对比， 发现其摄食量 （FI） 是注射胰岛素组的3倍， 由 此可知NPY是一种强烈刺激摄食的一种多肽， 同时研究还发现 NPY介导多种基因表达， 而导 致机体产生肥胖， 如 NPY不仅介导炎症因子Pentraxin3的表达， 还促进活性氧 （ROX） 的产生， 而ROX是已知的脂肪生成触发因素之一， 导致小鼠前脂肪细胞3T3 ‑L1细胞中的脂质积累 （Clark J T, Kalra P S, Crowley  W R, et al. Neuropeptide  Y and human  pancreatic polypeptide  stimulate  feeding behavior  in rats[J]. Endocrinology,   1984, 115 （1） : 427‑9； Shin M K, Choi B, Kim E Y, et al. Elevated  Pentraxin 3 in  Obese Adipose Tissue Promotes  Adipogenic  Differentiation  by Activating   Neuropeptide  Y Signaling[J].  Front Immunol, 2018, 9: 1790. ） 。 在 2011年Zhang等对 中国地方牛种的 NPY基因研究发现， 该基因的第32463位出现A/C突变以及第32302位出现C/ G突变， 且该突变与中国地方牛 ‑南阳牛的6、 12、 18月龄的体长和胸围相关 （P<0.05） （Zhang   L, Zhang A‑L, Zhang L‑Z, et al. Association  analysis  between variants  in  bovine NPY gene and growth traits in Nanyang cattle （Bos tarus） [J].  Gen Comp  Endocrinol,  2011, 170 （1） : 189‑192. ） 。 Perkin s等发现神经肽 （NPY） 在高低RFI组安格斯 牛表达有差异， 在低RFI组 中其表达量下降64% （Perkins  S D, Key C N, Garrett C F, et  al. Residua