(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210499499.X (22)申请日 2022.05.09 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114703299 A (43)申请公布日 2022.07.05 (73)专利权人 安徽农业大 学 地址 230000 安徽省合肥市长江西路13 0号 (72)发明人 金四华　江洪峰　耿照玉　夏晶晶　 贾羽晴　税斐　张泰康　曹程程　 丁元飞　姜丽君　 (74)专利代理 机构 合肥中谷知识产权代理事务 所(普通合伙) 34146 专利代理师 杜瑶 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01)C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (56)对比文件 CN 111676295 A,2020.09.18 CN 111676295 A,2020.09.18 WO 2005114211 A1,2005.12.01 US 201015 3016 A1,2010.0 6.17 肖成等.家畜剩余采 食量性状候选 基因的研 究进展. 《黑龙江畜牧兽医》 .2017,(第0 5期), 审查员 赵亚丽 (54)发明名称 一种基于神经肽Y5受体NPY5R基因鉴定鸭饲 料利用率 性状的分子标记及其方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种基于神经肽Y5受体NPY5R 基因鉴定鸭饲料利用率性状的分子标记及其方 法和应用， 所述NPY5R基因具有如SEQ  ID NO.1所 示的核苷酸序列， 所述分子标记为T或C， 所述分 子标记位于所述核苷酸序列的第782位。 本发明 利用PCR‑SSCP的方法来检测NPY5R基因的突变， 根据基因型对鸭的饲料利用率性状进行选择， 建 立了一种家禽饲料利用率早期选择的育种方法， 该法简单、 快速、 低成本、 不需要特殊的仪器， 适 合实验的需要。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图2页 CN 114703299 B 2022.12.23 CN 114703299 B 1.一种基于神经肽Y5受体 NPY5R基因鉴定鸭饲料利用率性状的分子标记， 其特征在于， 所述分子标记的核苷 酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 其中， 所述核苷酸序列的第782位碱基为T 或C。 2.一种如权利要求1所述的分子标记在鉴定鸭饲料利用率 性状中的应用。 3.一种利用如权利要求1所述的分子标记鉴定鸭饲 料利用率性状的方法， 其特征在于， 包括以下步骤： （1） 提取鸭翅静脉 血液总DNA； （2） 以所述分子标记所在位点及其上下游碱基组成的序列为目标序列设计特异性扩增 引物， 以所述总DNA为模板， 利用特异性扩增引物进行PCR扩增， 获得扩增产物； 其中， 所述分子标记所在位 点的上下游扩增产物长度介于20 0~250 bp之间； 所述特异性扩增引物序列为： SEQ ID NO.2: Forward primer： AT TCTTCTTT GAGTTAGGCA； SEQ ID NO.3: Reverse primer： GCAGACAGAC  AGGGTCCGAG； （3） 对扩增产物进行基因分型检测 和测序， 获得待测鸭的分子标记类型； （4） 根据分子标记类型判断鸭饲料利用率性状， 具体为： 若待测鸭分子标记类型为CC 型， 该鸭饲料利用率性状极高； 若待测鸭分子标记类型为TT型， 该鸭饲料利用率性状较差； 若待测鸭分子标记类型为TC型， 该鸭饲料利用率 性状中等。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114703299 B 2一种基于神经肽Y5受体NPY5R基因鉴定鸭饲料利用率性状的 分子标记及其方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子标记技术领域， 具体涉及一种基于神经肽Y5受体NPY5R基因鉴定 鸭饲料利用率 性状的分子标记及其方法和应用。 背景技术 [0002]饲料效率性状是畜禽生产中的重要经济性状之一， 其中饲料转化率(FCR)和剩余 采食量(RFI)是评估饲料效率指标之一。 饲料转化效率(FCR)是指饲喂单位饲料获得多少产 品(Liang  S,Guo Z,Tang J,et al.Genomic  divergence  during artificial  sele ction  by feed conversion  ratio in Pekin ducks[J].Ani m Biotechnol,2021:1 ‑9)， 随着对饲 料效率的深入探索研究者将畜禽某一时间段实际采食的饲料量减去其维持生长所需的饲 料量所得的差值定义为剩余采食量(RFI)(Koch  R M,Swiger  L A,Chambers  D,et  al.Efficiency  of feed use in beef cattle[J].Journal  of Animal Science,1963,22 (2):486‑494.)。 可以使用RFI和FCR对家禽饲料效率的利用情况进行评估， 然而影 响饲料效 率的因素众多， 其中包括采食量以及遗传因素(潘韵致 《猪饲料效率分化选择与全基因组关 联分析》 [D].吉林大学， 2016； 张小雪 《不同剩 余采食量羔羊生产性能和瘤胃微生物区系及 肝脏转录组研究》 [ D].兰州大 学， 2019.)。 [0003]研究发现神 经肽Y其5型受体NP5YR介导动物采食行为同时还和能量代谢相关， 属 于G蛋白偶联受体超家族成员之一(Michel  M C,Beck‑Sickinger  A,Cox H,et  al.XVI.International  Union of Pharmacology  recommendations  for the  nomenclature  of neuropeptide  Y,peptide  YY,and pancreatic  polypeptide   receptors[J].Pharmacol  Rev,1998,50(1):143 ‑150.)。 Tang ‑Christensen等采用与NPY5R 反义的寡核苷酸(ODN)来研究NPY5R与NPY对食物摄入影响， 通过反复中央给药， 发现ODN显 著减少自发食物 摄入， 导致体重显著下降(Tang ‑Christensen M,Kristensen P,Stidsen  C  E,et al.Central  administration  of Y5 receptor antisense  decreases  spontaneous   food intake and attenuates  feeding in response  to exogenous  neuropeptide  Y [J].J Endocrinol,1998,159(2):307 ‑12.)。 通过在对不同剩余采食量(RFI)个体的鸭研 究， 科研人员在高RF  I个体的下丘脑中检测到NPY和NPY5R的mRNA表达量较高(Zeng  T,Chen  L,Du X,et al.Association  analysis  between feed efficiency  studies and  expression  of hypothal  amic neuropep tide genes in laying ducks[J].Anim  Genet, 2016,47(5):606 ‑609.)。 由此我们推定NPY5R参与鸭饲料效率的调节， 这为研究鸭饲料效率 提供了关于该基因多态性与家禽饲料效率 性状相关的一种猜想 。 [0004]此外， 中国专利文献CN111676295A公开了一种采食量调控相关基因的研究方法， 并具体公开了根据NCBI  GenBank中已知鸭的CCK、 CCKAR、 NPY以及NPY5R基因设计多态性检 测引物， 用于基于上述基因开发与鸭采食量相关的SNPs位点， 结果 发现CCKAR基因具有与鸭 采食量相关的SNPs位点， 对CCK、 NPY以及NPY5R基因的SNPs位点未见报道。 目前， 也没有其它说　明　书 1/6 页 3 CN 114703299 B 3