(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210543925.5 (22)申请日 2022.05.18 (71)申请人 药明激创 （佛山） 生物科技有限公司 地址 528300 广东省佛山市顺德区大良逢 沙村委会德胜东路2号创业楼6楼之 601室 (72)发明人 梁洞泉　谢永臻　梁柏堂　张为　 李佩玲　王建伟　 (74)专利代理 机构 佛山科涵知识产权代理事务 所(普通合伙) 44818 专利代理师 孔凡亮 (51)Int.Cl. G01N 21/31(2006.01) G01N 21/01(2006.01) G01N 35/00(2006.01)C12M 1/00(2006.01) C12M 1/26(2006.01) C12M 1/32(2006.01) C12M 1/34(2006.01) G01N 33/50(2006.01) (54)发明名称 一种基于离子通道的药物筛 选装置及方法 (57)摘要 本发明公开了一种基于离子通道的药物筛 选装置及方法， 所述装置用于制备细胞裂解液的 自动移液工作平台， 所述自动移液工作平台包括 机械臂、 标准溶液放置平台、 微孔放置平台、 注射 清洗模块和注 射泵； 对细胞裂解液中示踪离子浓 度进行检测的原子吸收光谱仪， 所述原子吸收光 谱仪包括 沿光路方向设置的光学系统、 原子化器 和检测器， 所述光学系统用于提供待测元素的特 征波长光， 所述原子化器用于将待测试液转变成 基态原子(原 子蒸汽)， 所述检测器用于检测光线 强度。 本发 明克服了离子共转运通道因电中性无 法使用膜片 钳检测的困难， 同时规避了荧光标记 和同位素标记存在的结果误差和安全隐患， 为药 物筛选提供了全新的方法。 权利要求书2页 说明书6页 附图5页 CN 115015138 A 2022.09.06 CN 115015138 A 1.一种基于 离子通道的药物筛 选装置， 其特 征在于， 包括： 用于制备细胞裂解液的自动移液工作平台， 所述自动移液工作平台包括机械臂、 标准 溶液放置平台、 微孔放置平台、 注射清洗模块和注射泵， 所述注射清洗模块包括样品注射入 口、 防止样品交叉污染的清洗槽， 且所述样品注射入口和清洗槽各自独立设置在注射清洗 模块的两侧； 所述样品注射入口与注射泵的注射端连接， 注射泵的进液端设有进样针接口 和蒸馏水接口， 所述进样 针接口用于连接进样 针， 所述蒸馏水接口用于连接清洗液瓶， 所述 注射泵的一侧设有带动进样针移动的步进电机； 对细胞裂解液中示踪离子浓度进行检测的原子吸收光谱仪， 所述原子吸收光谱仪包括 沿光路方向设置的光学系统、 原子化器和检测器， 所述光学系统用于提供待测元素 的特征 波长光， 所述原子化器用于将待测试液转变成基态原子(原子蒸汽)， 所述检测 器用于检测 光线强度。 2.根据权利要求1所述的基于离子通道的药物筛选装置， 其特征在于， 所述样品注射入 口可测量至少但不限于10uL的样品。 3.根据权利要求1所述的基于离子通道的药物筛选装置， 其特征在于， 所述微孔板放置 平台容纳有96微 孔的微孔板。 4.根据权利要求1所述的基于离子通道的药物筛选装置， 其特征在于， 所述光学系统包 括光源、 单色器和光栅角度调节装置； 所述原子化器包括采用点火器火花引导的点火系统 和用于调节气 体流量的手动控制阀； 所述检测器包括用于测定进入光谱仪的光的强度的光 电倍增管。 5.根据权利要求4所述的基于离子通道的药物筛选装置， 其特征在于， 所述光源采用空 心阴极灯(H CL)或无极放电灯(EDL)。 6.根据权利要求5所述的基于离子通道的药物筛选装置， 其特征在于， 所述原子化器包 括采用点火器火花引导的点火系统和用于调节气 体流量的手动控制阀， 点火器的燃烧头呈 细长形， 与光路重合。 7.根据权利要求6所述的基于离子通道的药物筛选装置， 其特征在于， 所述光栅角度调 节装置包括设定于特定位置的光耦、 限位开关一、 丝杆和限位开关二， 限位开关一和限位开 关二配合对光耦限位。 8.一种基于离子通道 的药物筛选方法， 使用权利要求1 ‑6所述的基于离子通道的药物 筛选装置， 其特 征在于， 包括以下步骤： S100、 模型细胞的培 养与缓冲液制备； S200、 仪器测定细胞裂解液内示踪离 子浓度及仪器条件； S300、 抑制曲线绘制。 9.根据权利要求8所述的基于 离子通道的药物筛 选方法， 其特 征在于， 步骤S10 0包括： S101、 常规培 养高度表达 离子通道的细胞株： 将细胞株放入含10％FCS(Sigma)、 100μg/mL链霉素/100000U/L青霉素 的培养液中， 并 在37℃和5％CO2的湿润条件下培养24小时， 直到细胞汇合度达到80 ‑90％， 弃其培养基， 使 用胰蛋白酶将贴壁细胞消化， 使细胞脱落变成待用细胞悬液， 细胞培养浓度控制在50000 个/200uL， 并接种到96孔 微孔板中， 在37℃和5％CO2的湿润条件下培 养过夜； S102、 采用含适合浓度的示踪离子的低渗溶液清洗2 ‑3次， 加入200uL示踪缓冲液在37权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115015138 A 2℃和5％CO2条件下培 养60分钟； S103、 采用20 0 μl的无示踪离 子的清洗缓冲液 连续2‑3次洗涤； S104、 将待测药物溶于100％DMSO中并取2 μl加入198 μl清洗缓冲液中， 每孔的最终体积 为200 μl， 在37℃、 5％CO2的环境下孵 育10分钟； S105、 采用198 μl的去极化缓冲液和2 μl待测药物， 孔的最终体积为200 μl， 激活通道6分 钟； S106、 从上清中收集200 μl的细 胞外样品， 转移到新的96孔微孔板中， 然后用200 μl裂解 缓冲液进行全细胞裂解获得细胞内样品。 10.根据权利要求9所述的基于 离子通道的药物筛 选方法， 其特 征在于， 步骤S20 0包括： S201、 200uL细 胞裂解液用药物筛选装置测定示踪离子浓度， 将含不同浓度待测药物的 去极化缓冲液重复测定， 根据测定示踪离子浓度数据分析不同浓度的待测药物对离子通道 的影响； S202、 基于药物筛 选装置的无荧 光标记法分析离 子通道活性； 步骤S300包括： 根据不同的待测药物浓度和所得的相应数据， 以药物浓度为横坐标， 相 应示踪离 子流出率％为纵坐标， 抑制曲线。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115015138 A 3