(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210534568.6 (22)申请日 2022.05.17 (71)申请人 南京邮电大 学 地址 210003 江苏省南京市 鼓楼区新模范 马路66号 (72)发明人 张帅　万洪丹　陈新玉　鹿姚　 梁中伟　林雪莹　 (74)专利代理 机构 南京纵横知识产权代理有限 公司 32224 专利代理师 董建林 (51)Int.Cl. G01N 21/64(2006.01) G01N 21/01(2006.01) (54)发明名称 一种降低微腔核酸探测极限的方法及探测 装置 (57)摘要 本发明公开了一种降低微腔核酸探测极限 的方法及探测装置， 其方法包括对微腔内壁进行 清洗； 将食 人鱼溶液通入微腔中并封存进行一次 静置， 对微腔内壁进行羟基化处理； 在一次静置 过程中， 微腔温控于70℃； 在一次静置后， 对微腔 内壁进行清洗； 将多聚赖氨酸溶液通入微腔中并 进行二次静置， 使得多聚赖氨 酸溶液中的氨基与 微腔内壁的羟基进行充分结合； 在二次静置后， 对微腔内壁进行清洗； 将核酸型探针溶液通入微 腔中并进行三次静置， 使 得核酸型探针培植到微 腔内壁； 在三次静置后， 对微腔内壁进行清洗； 本 发明通过温控表面功能化处理提升核酸型探针 在微腔表面结合的数量、 效率， 降低核酸探测探 测极限， 从而提升核酸检测的准确性。 权利要求书1页 说明书4页 附图4页 CN 115078320 A 2022.09.20 CN 115078320 A 1.一种降低微腔核酸探测极限的方法， 其特 征在于， 包括： 通过去离 子水对微腔内壁进行一次清洗； 在一次清洗后， 将食人鱼溶液通入微腔中并封存进行一次静置， 对微腔内壁进行羟基 化处理； 在一次静置过程中， 微腔温控于70℃； 在一次静置后， 通过去离 子水对微腔内壁进行二次清洗； 在二次清洗后， 将多聚赖氨酸溶液通入微腔中并进行二次静置， 使得多聚赖氨酸溶液 中的氨基与微腔内壁的羟基进行充分结合； 在二次静置后， 通过去离 子水对微腔内壁进行三次清洗； 在三次清洗后， 将核酸型探针溶液通入微腔中并进行三次静置， 使得核酸型探针培植 到微腔内壁； 在三次静置后， 通过去离 子水对微腔内壁进行四 次清洗。 2.根据权利要求1所述的一种降低 微腔核酸探测极限的方法， 其特征在于， 所述一 次清 洗、 二次清洗、 三次清洗以及四次清洗均包括通过蠕动泵将去离子水泵入微腔中， 并持续 10min。 3.根据权利要求1所述的一种降低 微腔核酸探测极限的方法， 其特征在于， 所述一 次静 置时长为3 0min， 所述二次静置和三次静置时长均为1h 。 4.根据权利要求1所述的一种降低 微腔核酸探测极限的方法， 其特征在于， 所述食人鱼 溶液由浓硫酸和30％过氧化氢的水 溶液以体积比3:1配置而成。 5.根据权利要求1所述的一种降低 微腔核酸探测极限的方法， 其特征在于， 所述微腔温 控于70℃包括将微腔处于温控箱中并将温控箱温度设置为70℃。 6.根据权利要求1所述的一种降低 微腔核酸探测极限的方法， 其特征在于， 在四次清洗 后， 通过荧 光检测对微腔结合核酸型探针的情况进行表征。 7.一种微腔核酸探测装置， 其特征在于， 包括闭环且通过光纤熔接方式连接的可调谐 窄带激光器、 衰减器、 偏振控制器、 耦合单元、 光电探测器以及反馈装置， 所述耦合单元包括 微纳光纤和微腔， 所述微纳光纤和 微腔通过耦合并封装形成耦合单元， 所述微腔采用如权 利要求1‑6中任一项所述的一种降低微腔核酸探测极限的方法进行处 理。 8.根据权利要求7所述的一种微腔核酸探测装置， 其特征在于， 所述微腔为 回音壁模式 光学微腔。 9.根据权利要求7所述的一种微腔核酸探测装置， 其特征在于， 所述微纳光纤由光纤熔 融拉锥拉制而成。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115078320 A 2一种降低微腔核酸探测极限的方 法及探测装置 技术领域 [0001]本发明涉及 一种降低微腔核酸探测极限的方法及探测装置， 属于核酸传感技术领 域。 背景技术 [0002]目前预防这种流行病传播的诊断方法是核酸检测。 当前， 核酸检测有多种方法， 如 荧光检测、 电化学检测和光学检测等； 然而这些方法都存在几个重要的问题：  (1)探针与传 感界面的结合数量有限， (2)探针与传感界面以及探针与目标核酸的结合效率不高。 探针与 传感界面的结合数量限制了核酸探测的灵敏度的提升， 由此限制了核酸检测最低检测极 限； 同时， 结合效率不高会导致探针与目标核酸之 间的杂交速率降低， 可能导致探针在检测 过程易受到外力等影响， 难以保证检测分子与表面的稳定吸 附从而使得实验结果不可靠， 降低了核酸检测的准确性。 发明内容 [0003]本发明的目的在于克服现有技术中的不足， 提供一种降低微腔核酸探测极限的方 法及探测装置， 通过温控表面功能化处理提升核酸型探针在微腔表面结合的数量、 效率， 降 低核酸探测探测极限， 从而提升核酸检测的准确性。 [0004]为达到上述目的， 本发明是采用下述 技术方案实现的： [0005]第一方面， 本发明提供了一种降低微腔核酸探测极限的方法， 包括： [0006]通过去离 子水对微腔内壁进行一次清洗； [0007]在一次清洗后， 将食人鱼溶液通入微腔中并封存进行一次静置， 对微腔内壁进行 羟基化处 理； 在一次静置过程中， 微腔温控于70℃； [0008]在一次静置后， 通过去离 子水对微腔内壁进行二次清洗； [0009]在二次清洗后， 将多聚赖氨酸溶液通入微腔中并进行二次静置， 使得多聚赖氨酸 溶液中的氨基与微腔内壁的羟基进行充分结合； [0010]在二次静置后， 通过去离 子水对微腔内壁进行三次清洗； [0011]在三次清洗后， 将核酸型探针溶液通入微腔中并进行三次静置， 使得核酸型探针 培植到微腔内壁； [0012]在三次静置后， 通过去离 子水对微腔内壁进行四 次清洗。 [0013]可选的， 所述一次清洗、 二次清洗、 三次清洗以及四次清洗均包括通过蠕动泵将去 离子水泵入微腔中， 并持续10mi n。 [0014]可选的， 所述 一次静置时长为3 0min， 所述二次静置和三次静置时长均为  1h。 [0015]可选的， 所述食人鱼溶液由浓硫酸和30％过氧化氢的水溶液以体积比3:1  配置而 成。 [0016]可选的， 所述微腔温控于70℃包括将微腔处于温控箱中并将温控箱温度设置为70 ℃。说　明　书 1/4 页 3 CN 115078320 A 3