(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210765575.7 (22)申请日 2022.07.01 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.246 05 2022.03.28 (71)申请人 安徽农业大 学 地址 安徽省合肥市长江西路13 0号 (72)发明人 刘威　康茹雪　李耀星　杨杰　 白倩　 (74)专利代理 机构 太原华弈知识产权代理事务 所 14108 专利代理师 马秦锁 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/22(2020.01) A01P 3/00(2006.01)C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一株拮抗足癣病原真菌的短小芽孢杆菌及 其应用 (57)摘要 本发明公开了一株拮抗足癣病原真菌的菌 株X1， 属于短小芽孢杆菌 （ Bacillus  pumilus） ， 保藏号CGMCC  NO.24605， 所述菌株 X1可以同时拮 抗属于互隔交链孢菌的菌株K1及红色毛癣菌， 降 低拮抗足癣病原真菌时抗生素的使用量， 增加足 部洁净度和健康水平。 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 CN 115074286 A 2022.09.20 CN 115074286 A 1.一株拮抗足癣病原真菌的短小芽孢杆菌X1， 属于短小芽孢杆菌（ Bacillus   pumilus） ， 保藏号CGMCC NO.24605。 2.权利要求1所述短小芽孢杆菌X1的培养方法， 其特征是包括如下步骤： 将菌株X1接种 于液体培 养基， 于180r/mi n、 28℃的条件下培 养。 3.根据权利要求2所述的培养方法， 其特征是所述培养基为pH5.8 −6.1的YG培养基， 包 括： 酪蛋白、 酵母浸粉、 半胱氨酸、 NaHCO3、 K2HPO4、 KH2PO4、 NaCl、 MgSO4·7H2O、 CaCl2、 葡萄糖、 叶酸、 生物素、 维生素B12、 P ‑对氨基苯甲酸钾(P ‑aminobenzoic)、 氯高铁血红素、 维生素B6 。 4.根据权利要求3所述的培养方法， 其特征是每升所述培养基中含有10g酪蛋白， 2.5g 酵母浸粉， 1g半胱氨酸， 4g  NaHCO3， 3g K2HPO4， 3g KH2PO4， 0.9g NaCl， 1g MgSO4·7H2O， 1g  CaCl2， 2.5g 葡萄糖， 10 μL叶酸， 10 μL生物素， 10 μL维生素B12， 10 μL  P‑对氨基苯甲酸钾(P ‑ aminobenzoic)， 10 μL氯 高铁血红素， 10 μL维生素B6 。 5.权利要求1所述的短小芽孢杆菌X1作为抑制足癣病原真菌的菌株的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征是所述短小芽孢杆菌X1作为抑制互隔交链孢菌 制剂的应用。 7.根据权利要求5所述的应用， 其特征是所述短小芽孢杆菌X1作为抑制红色毛癣菌制 剂的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115074286 A 2一株拮抗足癣病原真 菌的短小芽孢杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及微 生物领域， 具体涉及一株拮抗足癣病原真菌的短小芽孢杆菌 。 背景技术 [0002]足癣是由真菌感染所引起的一类复发率极高的慢性皮肤性疾病， 具有极强的传染 性。 一般情况下， 针对足癣采用外用药品涂抹的方式治疗， 但对于顽固足癣， 也会给予口服 药， 此类内服药品可能会给人体带来一些肝毒性等副作用， 而外用药品针对孕妇及儿童也 是需要谨慎斟酌的。 [0003]近年来， 足癣研究大多致力于化学药物开发和临床病例统计， 极少从微生物组水 平上研究足癣的发生 发展进程与机制。 前人基于微生物培养的研究并未完全展现出足癣相 关的微生物群落， 仅认为其是 红色毛癣菌及其他皮肤表皮癣菌感染。 然而， 其反 复的感染过 程提示微生物群落在足癣致病中发挥着一定的作用。 目前对于 皮肤微生物的调节大致包括 抗生素、 益生菌和皮肤微生物复合体的移植。 前者对于消除致病菌的有益效果是毋庸置疑 的， 但其长时间的使用必 然会增加机体对其产生依赖性的几率， 甚至还可能会引起耐药性、 抗药性， 那这必将会使病原菌的寄生更加猖獗， 最终对疾病的治疗缓解丝毫不起作用。 且微 生物制剂疗法或是利用微生物与宿主间作用关系的替代疗法越来越成为微生物研究领域 的热点。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一株拮抗足癣病原真菌的短小芽孢杆菌X1及其应用， 可以 同时拮抗互隔交链孢菌及红色毛癣菌， 降低拮抗足癣病原真菌时抗生素 的使用量， 增加足 部洁净度和健康水平。 [0005]本发明所述的菌株是从足部样本中分离出的一株可以拮抗足癣病原真菌的短小 芽孢杆菌， 该菌在YG和PDA培养基上均生长良好， 培养24h， 形成1 ‑2mm， 圆形、 半透明、 乳白 色， 边缘光滑的菌落； 继续培养至48h， 菌落略增大， 大小为2 ‑3mm， 呈圆形、 不透明、 乳白色， 表面出现褶皱， 边 缘略显不 规则。 [0006]取短小芽孢杆菌X1的基因组DNA （1440bp） ， 测序。 得到结果经BLAST比对后得出菌 株X1与短小芽孢杆菌相似度达99.51%， 结合菌落、 菌体特征及分子生物学特征， 确定菌株为 短小芽孢杆菌 （ Bacillus  pumilus ）， 将基因序列提交至GenBank， 获取的登录号为 MT798142。 结合菌落、 菌体的形态观察、 分子生物学鉴定及系统发育分析， 确定该菌株为短 小芽孢杆菌 （ Bacillus pumilus） ， 将其命名为X1。 [0007]该菌株已于2022年3月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 心(CGMCC)。 地址： 北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微生物研究所， 邮编： 100101。 菌种保藏 号CGMCC NO.24605。 [0008]本发明还公开了短小芽孢杆菌X1的培养方法， 是将菌株X1接种于液体培养基， 于 180r/min、 28℃的条件下培 养。说　明　书 1/6 页 3 CN 115074286 A 3