(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221073962 2.0 (22)申请日 2022.06.28 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO:M 20215 58 2021.0 5.19 (71)申请人 甘肃省农业科 学院蔬菜研究所 地址 730000 甘肃省兰州市安宁区农科院 新村1号 (72)发明人 李亚莉　侯栋　岳宏忠　张东琴　 沈永强　 (74)专利代理 机构 兰州锦知源专利代理事务所 (普通合伙) 62204 专利代理师 杜文化 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/20(2020.01)A01P 3/00(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一株拮抗黄瓜枯萎病的唐菖蒲伯克霍尔德 氏菌及其应用 (57)摘要 本发明提供一株拮抗黄瓜枯萎病的唐菖蒲 伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20  L1‑3， 其保藏编号为CCTCC  NO:M 2021558。 本发 明还提供其在防治作物土传病害、 促进作物生长 中的应用。 本发明的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 20L1‑3及其微生物菌肥对连作土壤的修复及土 传病害的防治， 作物持续增产和保护农田生态环 境具有重要意 义。 权利要求书1页 说明书8页 序列表1页 附图3页 CN 115029280 A 2022.09.09 CN 115029280 A 1.一株拮抗黄瓜枯萎病的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3， 其保藏编号 为CCTCC NO:M 2021558。 2.含有权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3的 微生物菌剂。 3.唐菖蒲伯 克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3的微生物菌剂的制备方 法， 其特征在于： 将 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌菌株20L 1‑3接种于液体LB培养基中， 置于恒温摇 床28~30 ℃、 140~220rpm震荡培 养2~3 d。 4.权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3菌株或 权利要求2所述的菌剂在制备防治作物土传病害的药物中的应用。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于： 所述土传病害的病原菌包括黄瓜枯萎病 菌、 辣椒腐霉根腐病菌、 辣椒灰霉病菌、 辣椒立枯病菌、 辣椒疫霉根腐病菌、 辣椒早疫病菌、 甜瓜枯萎病菌、 西瓜枯萎病菌、 甘蓝枯萎病菌 。 6.根据权利要求 4所述的应用， 其特 征在于： 所述作物为黄瓜、 甜瓜、 西瓜、 甘蓝或辣椒 。 7.权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3菌株或 权利要求2所述的菌剂在制备促进作物生长的药物中的应用。 8.权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3菌株或 权利要求2所述的菌剂在制备微 生物菌肥中的应用。 9.一种微生物菌肥， 其特征在于： 将权利要求1所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3菌株或权利要求2所述的菌剂， 加入到载体中， 制备成微 生物菌肥。 10.根据权利要求9所述的微生物菌肥， 其特征在于： 所述载体包括草炭、 木炭和玉米 芯。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115029280 A 2一株拮抗黄瓜枯萎病的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌及其应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物学和植物病害生防技术领域， 具体涉及一株拮抗黄瓜枯萎病的 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌20  L1‑3及其应用。 背景技术 [0002]黄瓜枯萎病是由尖孢镰孢菌黄瓜专化型( Fusarium  oxysporum  f . sp.  cucumerinum  Owen)引起的一种 土传病害， 分布广泛， 在我国各种植区均有发生。 此菌通过 土壤、 农事操作等传播， 从根茎部或根系侵入， 在维管束内寄生的系统性病害。 尖孢镰孢菌 有很强的隐蔽性， 对不良环境有较强的抵抗力， 在土壤中可存活5 ‑6年甚至10年以上， 在温 湿度适宜条件下， 能快速繁殖， 使病害发生。 该病一旦 发生， 将产生严重的经济损失， 因此黄 瓜枯萎病的防治一 直备受人们的关注。 [0003]目前， 生产中用嫁接预防黄瓜枯萎病的发生， 但成本较高。 利用拮抗微生物防治植 物病害， 对环 境和人类的安全性、 减缓病原菌抗药性等具有重要意义。 1973年澳 大利亚植物 病理学家Kerr利用放线土壤杆菌(Agrobacterium  radiobacter  K84)成功防治了植物根癌 病， 此后人们对植物病害的生物防治研究陆续深入。 利用有益拮抗微生物防治黄瓜枯萎病 是一种有效措施， 具有对环境无污染、 对人畜无害、 不影响黄瓜品质等优点， 符合现代农业 发展趋势。 发明内容 [0004]为了解决现有技术中存在的问题， 本发明提供了一株拮 抗黄瓜枯萎病的唐菖蒲伯 克霍尔德氏菌。 本发明从甘肃省武威、 靖远、 兰州的22个黄瓜试验田采集根际土样， 分离得 到205株细菌菌株。 经筛选得到1株对尖孢镰刀菌黄瓜专化型具有极强拮抗作用的菌株20   L1‑3。 根据其菌落和菌体形态特征及gyrB基因序列分析， 鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 （Burkholderia  gladioli ） 。 并将其于2021年5月19日保藏至中国典型培养物保藏中心 CCTCC， 保藏地址为： 湖北省武汉市武 昌区八一路299号， 保藏编号为： CCTCC  NO:M 2021558。 本发明研究了该拮抗菌对黄瓜枯萎病的防治效果及 对黄瓜植株的促生作用， 为黄瓜枯萎病 的生物防治及生防菌剂的进一 步开发利用提供 科学依据。 [0005]本发明提供一株拮抗黄瓜枯萎病的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia   gladioli  20 L1‑3， 其保藏编号 为CCTCC NO:M 2021558。 [0006]本发明还提供含有上述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20  L1‑3的微生物菌剂。 [0007]本发明还提供唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3的微生物 菌剂的制备方法， 将唐菖蒲伯克霍尔德氏菌菌株20L1 ‑3接种于液体LB培养基中， 置于恒温 摇床28~30 ℃、 140~220rpm震荡培 养2~3 d。 [0008]本发明还提供上述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 Burkholderia  gladioli  20 L1‑3菌 株或菌剂在制备防治作物土传病害的药物中的应用。说　明　书 1/8 页 3 CN 115029280 A 3