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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210683433.6 (22)申请日 2022.06.16 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO:M 2020914 2020.12.18 (71)申请人 上海市农业科 学院 地址 201403 上海市闵行区北翟路2 901号 (72)发明人 孙丽娜 高新华 陈伟 黄开华  邱文  (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 孙斌 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) B09C 1/10(2006.01) C02F 3/34(2006.01)C12R 1/38(2006.01) C02F 101/30(2006.01) C02F 101/32(2006.01) C02F 101/34(2006.01) (54)发明名称 一株有机污染降解菌株A7及其生产 的菌剂 和应用 (57)摘要 本发明公开了一株有机污染降解菌株A7及 其生产的菌剂和应用, 该有机污染广谱降解菌株 A7经鉴定为假单胞菌(Pseudomonas  sp.), 已保 藏于中国典型培养物保藏中心, 保藏时间为2 020 年12月18日, 保藏编号为CCTCC  NO:M 2020914。 本发明经分离筛选获得降解菌株A7可 以快速有 效地降解高浓度的灭草灵、 联苯醇及苯系物等多 种有机污染; 能将无机盐培养基中的灭草灵、 联 苯醇及苯系物残留都降解90%以上, 同时该菌株 制备的降解菌剂能在短时间内降解土壤或水体 中高浓度的灭草灵、 联苯醇及苯系物残留达88% 以上, 解决了有机污染残留对土壤水体环境、 农 作物和人体健康的危害问题。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图2页 CN 114990019 A 2022.09.02 CN 114990019 A 1.一株有机污染降解菌株A7, 经鉴定为假单胞菌(Pseudomon as sp.), 已保藏于中国典 型培养物保藏中心, 保藏时间为2020年12月18日, 保藏编号 为CCTCC NO:M 2020914。 2.如权利要求1所述的有机污染 降解菌株A7在降解灭草灵、 联苯醇及苯系物残留中的 应用。 3.根据权利要求2所述的应用, 其特征在于, 所述苯系物优选包括苯、 甲苯、 二甲苯中的 任意一种或者几种。 4.一种利用权利要求1所述的有机 污染降解菌株A7生产的降解菌剂。 5.一种权利要求 4所述的降解菌剂的制备 方法, 其特 征在于, 包括如下步骤: (1)将降解菌株A7培养到对数期的试管液按发酵培养基体积的0.5 ‑1%接种于发酵培 养基中, 振荡培 养至对数期, 制得发酵菌种; (2)将上述制得发酵菌种按种子罐的培养基体积的1 ‑10%接种于种子罐的培养基中, 培养至对数生长期, 制得种子液; (3)将种子液按生产罐的培养基体积的1 ‑10%接种于生产罐的培养基中培养发酵, 发 酵完成后的培 养液即为降解菌剂。 6.根据权利 要求5所述的制备方法, 其特征在于, 步骤(2)和步骤(3)所述培养过程中每 分钟无菌空气的通气量 为1:(1‑0.8)vvm, 搅拌速度为16 0‑200rpm, 培养温度为28 ‑32℃。 7.根据权利 要求5所述的制备方法, 其特征在于, 步骤(3)所述培养发酵时间为36 ‑48小 时。 8.如权利要求 4所述的降解菌剂在降解灭草灵、 联 苯醇及苯系物 残留中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用, 其特征在于, 所述降解菌剂在降解土壤或水体环境中灭 草灵、 联苯醇及苯系物 残留中的应用。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 114990019 A 2一株有机污染降解菌株 A7及其生产的菌剂 和应用 技术领域 [0001]本发明涉及微生物的有机污染处理, 具体涉及一株有机污 染广谱降解菌株A7及其 生产的菌剂和应用。 背景技术 [0002]随着人类社会生产和经济活动规模的不断扩张, 有机污染普遍存在于土壤、 水体 等生态系统中, 不仅会造成环境污染, 而且会通过食物链富集, 最终进入人体, 严重危害了 人类的健康, 近年来越来越多的有机污染事件发生, 造成了极其严重的不良后果。 因此, 需 要进一步研究有机物污染修复问题。 [0003]灭草灵的化学名称为N ‑3, 4‑二氯苯基氨基甲酸甲酯, 是一种氨基甲酸酯类选择性 除草剂, 兼具内 吸及触杀作用, 主要用于水稻、 玉米、 小麦和大豆等作物田, 防除一年生禾本 科杂草及某些阔叶杂草, 如稗草、 马唐和看麦娘等。 灭草灵在使用的过程中, 对环境造成污 染, 且不容易被环境所分解。 [0004]联苯菊酯又名天王星、 虫螨灵, 联苯菊酯是一种新型的拟除虫菊酯类杀虫剂, 对自 然界中的害虫有一定的触杀和胃毒作用。 联苯醇是联苯菊酯的中间代谢产物, 同样具有杀 死多种害 虫的功效。 自从拟除虫菊酯进入市场以来, 其作用效果 非常明显, 在生活中广泛应 用, 受到人们依赖。 但是在这类农药试剂的生产和使用过程中, 造成了环境中的农药残留污 染, 在一定程度上危害着人类的健康和发展。 联苯菊酯是第三代合成拟除虫菊酯, 已被美国 环境保护署列为二级中等毒性。 其对 水生生物鱼、 虾、 蟹、 贝等为剧毒, 对哺乳动物具有神经 毒性、 心血管毒性和遗传 毒性。 由于联苯菊酯农药的大量使用, 在农产品和环 境中检出率较 高。 [0005]苯系物中三苯, 是指工业上的苯、 甲苯、 二甲苯, 可作为化工原 料或溶剂, 主要应用 于染料工业、 农药生产、 香料制作、 造漆、 喷漆、 制药、 制鞋、 家具制造等行业。 在经济高速发 展的今天, 人们对大自然资源的索取量急剧增加, 同时对环 境造成的污染也越来越来严重。 如何防治和减少对自然环境的污染已经成为国家和社会各界广泛关注的问题。 [0006]生物修复是利用生物特别是微生物的生命代谢活动将有机污染物转为无公害的 无机物(二氧化碳和水)或其他无害的代谢产 物。 它被公认为具有安全、 有效、 低耗和环保等 显著优点, 已经成为研究环境修复的热点。 生物修复过程中的微生物主要有3种类型: 土著 微生物、 基因工程菌和外来微生物。 已报道的能降解有机物的微生物包括细菌、 放线菌、 真 菌、 藻类等。 细菌由于容 易诱变和适应性强等特性而在生物修复中占据主导 地位。 [0007]目前关于假单胞菌(Pseu domonas sp.)降解菌株已有一些报道到, 但是这些降解 菌株都是效果单一, 一般能降解一种类型的有机物, 缺乏广谱性。 如苯系物降解菌 Pseudomonas  putida SW‑3能降解苯、 甲苯和苯乙烯, 但不能降解灭草灵和联苯醇。 目前有 关灭草灵的降解菌, 还没有报道。说 明 书 1/6 页 3 CN 114990019 A 3

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