(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210575489.X (22)申请日 2022.05.25 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 202 2309 2022.03.24 (71)申请人 武汉轻工大 学 地址 430000 湖北省武汉市东西湖区汉口 常青花园学府南路68号 (72)发明人 李琳玲　程华　程水源　 (74)专利代理 机构 北京华清迪源知识产权代理 有限公司 1 1577 专利代理师 陈晨 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 9/00(2006.01) A23L 33/135(2016.01)A23L 33/16(2016.01) A23K 10/18(2016.01) A23K 20/20(2016.01) C12R 1/125(2006.01) (54)发明名称 一株来源于青储草料的富硒枯草芽孢杆菌 L11及其应用 (57)摘要 本发明实施例公开了一株来源于青储草料 的富硒枯草芽孢杆菌L11。 枯草芽孢杆菌 (Bacillus  subtilis)L11， 于2022年3月24日保 藏于中国典型培养物保藏中心， 保藏编号为 CCTCC NO： M 2022309。 本发明从青储 草料中分离 获得的菌株， 不仅耐硒 能显著转化有机硒， 最高 能耐30mmol/L的亚硒酸钠， 48h对3mmol/L的无机 硒的转化率高达98.93％， 而且对常见的霉菌等 病害具有明显的拮抗作用。 权利要求书1页 说明书9页 序列表1页 附图2页 CN 115261257 A 2022.11.01 CN 115261257 A 1.枯草芽孢杆菌(Bacillus  subtilis)L11， 于2022年3月24日保藏于中国典型培养物 保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO： M 2022309。 2.含权利要求1所述的枯 草芽孢杆菌L1 1的菌剂。 3.利用权利要求1所述的枯草芽孢杆菌L11制备的富有机硒菌剂， 其特征在于， 在发酵 培养中， 使用的培 养基中亚硒酸钠的浓度为3.0 ±1mmol/L。 4.一种利用权利要求1所述的枯草芽孢杆菌L11生产生物源纳米硒的方法， 其特征在 于， 将枯草芽孢杆菌L11静息细胞接种于含亚硒酸钠的培养基中， 进行发酵培养， 发酵结束 后， 向发酵产物中加入溶菌酶， 经分离纯化获得纳米硒； 其中， 所述培养基中亚硒酸钠的浓 度为3.0±1mmol/L。 5.根据权利 要求4所述的方法， 其特征在于， 所述培养基的配方为： 葡萄糖20 ±2g/L、 蛋 白胨15±2g/L、 氯化钠5 ±1g/L、 牛肉膏0.5 ±0.1g/L， 溶剂为水。 6.根据权利 要求4所述的方法， 其特征在于， 所述发酵培养的条件为： 通气比为1:(0.8 ‑ 1.2)， 搅拌转速为15 0‑200r/min， 培养温度为3 5‑40℃， 培养时间为 4±1d。 7.一种生物源纳米硒， 其特 征在于， 由权利要求 4‑6任一项所述的方法制备 得到。 8.根据权利要求7所述生物源纳米硒， 其特征在于， 所述生物源纳米硒的粒径为80 ‑ 100nm。 9.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌L11、 权利要求2所述的菌剂、 权利要求3所述的富有 机硒菌剂、 或权利要求8所述的生物源纳米硒在制备食品、 保健品、 禽畜饲料中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 在制备禽畜饲 料中的应用中， 禽畜饲 料中 枯草芽孢杆菌L11的添加量为1 ‑10×105CFU/g； 或， 禽畜饲料中富有机硒固态冻干菌剂的添 加量为1‑10g/25kg。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115261257 A 2一株来源于青储草料的富硒枯草芽孢杆菌L1 1及其应用 技术领域 [0001]本发明实施例涉及 微生物技术领域， 具体涉及一株来源于青储草料的富硒枯草芽 孢杆菌L1 1及其应用 背景技术 [0002]硒元素是人和动植物生命活动不可或缺的微量元素， 是人体内组成谷胱甘肽过氧 化物酶的重要元素。 研究表明硒元素可以提高机体的免疫力且能够增加机体抗氧化性能， 减少自由基对机体的伤害， 达到抗癌作用。 硒 在自然界的含量很低， 我们国家 缺硒地区达到 了72％， 甚至有30％的地区属于严重缺硒； 合理的膳食补硒显得尤为重要。 同时， 有机硒因 其毒性低， 吸收和利用率高的特点， 被公认为是人们膳食补硒的最佳途径。 植食性动物通过 摄入富硒饲料， 通过自身转化将硒元素进一步转化为有机态硒， 不仅能够提高动物自身免 疫力和生长代谢， 而且能进一 步为人类提供 更加安全可靠的硒蛋白、 硒核酸 等高效有机硒。 [0003]微生物突变和适应环境能力非常强， 自然界中存在着丰富的对无机硒具有代谢能 力的微生物类群， 这类微生物可以将无机硒高效转化成可供动植物利用的有机态的硒蛋 白、 硒核酸、 硒多糖。 有益菌常被用来运用于工业富硒以及农业富硒， 生产富硒肥料或富硒 饲料。 因此， 天然的具有高效聚硒、 富硒及硒转化的微生物菌种的筛选、 鉴定和开发利用具 有重要的研究价 值和广阔的应用前 景。 发明内容 [0004]为了解决现有技术中缺乏能够高效转化有机硒的、 可用于富硒农产品生产的微生 物菌剂的现状， 本发明实施例提供一株来源于青储草料的富硒枯 草芽孢杆菌L1 1。 [0005]为了实现上述目的， 本发明实施例提供如下技 术方案： [0006]根据本发明实施例的第一方面， 提供一种枯草芽孢杆菌(Bacillus  subtilis) L11， 于2022年3月24日保藏于中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO： M 2022309。 [0007]根据本发明实施例的第二方面， 提供一种含如上 所述的枯 草芽孢杆菌L1 1的菌剂。 [0008]所述菌剂可在本领域常用培养基的基础上发酵获得。 一般地， 含枯草芽孢杆菌L11 的液态菌剂中活菌含量为10～30 ×108cfu/mL， 含枯草芽孢杆菌L11的固态菌剂中活菌含量 为80～15 0×108cfu/g。 [0009]根据本发明实施例的第三方面， 提供一种利用如上所述的枯草芽孢杆菌L11制备 的富有机硒菌剂， 在发酵培 养中， 使用的培 养基中亚硒酸钠的浓度为3.0 ±1mmol/L。 [0010]根据本发明实施例的第四方面， 提供一种利用如上所述的富硒枯草芽孢杆菌L11 生产生物源纳米硒的方法， 将枯草芽孢杆菌L 11静息细胞接种于含亚硒酸钠的培养基中， 进 行发酵培养， 发酵结束后， 向发酵产 物中加入溶菌酶， 经分离纯化 获得纳米硒； 其中， 所述培 养基中亚硒酸钠的浓度为3.0 ±1mmol/L。 [0011]进一步地， 所述培养基的配方为： 葡萄糖20 ±2g/L、 蛋白胨15 ±2g/L、 氯化钠5 ± 1g/L、 牛肉膏0.5 ±0.1g/L， 溶剂为水。说　明　书 1/9 页 3 CN 115261257 A 3