(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221073820 3.5 (22)申请日 2022.06.27 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 24866 2022.05.09 (71)申请人 陕西海斯夫生物工程有限公司 地址 712100 陕西省西安市杨凌示范区自 贸大街火炬园C1 (72)发明人 刘昌财　杨璐　郭建琦　牛永洁　 孟永宏　 (74)专利代理 机构 北京君智知识产权代理事务 所(普通合伙) 11305 专利代理师 黄绿雯 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 1/00(2006.01)C12P 1/04(2006.01) A23L 33/135(2016.01) A23L 33/10(2016.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/89(2006.01) (54)发明名称 一株植物乳杆菌 HSF-LAB-13 03及其用途 (57)摘要 本 发 明 涉 及 一 株 植 物 乳 杆 菌 (Lactobacillusplantarum)HSF ‑LAB‑1303及其 用途。 该植物 乳杆菌HSF‑LAB‑1303用于螺旋藻发 酵时， 该发酵步骤包括菌种活化、 种子培养、 扩大 培养与螺旋藻发酵等步骤。 利用植物乳 杆菌HSF‑ LAB‑1303菌株制 得的螺旋藻发酵产物的DPPH自 由基清除率为98.7％以上、 羟基自由基清除率为 92.4％以上、 超氧阴离子清除率为33.5％以上、 总还原力82.5％以上与亚铁离子螯合率51.2％ 以上， 因此， 本发明为后续开发利用螺旋藻及螺 旋藻的加工处 理奠定了扎实基础。 权利要求书1页 说明书15页 附图2页 CN 115261262 A 2022.11.01 CN 115261262 A 1.一株植物乳杆菌(Lactobacillus  plantarum)HSF ‑LAB‑1303， 该菌株已于2022年05 月09日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏 管理委员会 普通微生物中心保藏， 其保藏 号为CGMCCNo.24866。 2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌 HSF‑LAB‑1303在螺旋藻发酵中用途。 3.根据权利要求2所述的用途， 其特 征在于螺旋藻发酵的步骤如下： A、 菌种活化 保存植物乳杆菌HSF ‑LAB‑1303菌株用灭菌生理盐水稀释， 再涂布在MRS培养基平板上， 在恒温震荡摇床中在温度37℃下培养1.5天， 生长出表面光滑、 凸起、 边缘整齐、 直径2.9～ 3.1mm的乳白色单菌落； B、 种子培养 使用接种环挑取步骤A得到的一个单菌落， 接种于50ml灭菌的MRS肉汤培养基中， 在恒 温震荡摇床中在温度36℃与转速120r/min的条件下培养24h， 然后使用紫外分光光度计测 定在波长 600nm处的OD值 为3.52时就得到种子 培养液； C、 扩大培 养 按照以毫升计种子培养液与以毫升计MRS肉汤培养基的比1： 10， 将种子培养液接种到 MRS肉汤培养基中， 在恒温震荡摇床中在温度36℃与转速120r/min的条件下培养24h， 然后 使用紫外分光 光度计测定在波长 600nm处的OD值 为3.52时就得到扩大种子 培养液； D、 螺旋藻发酵 按照以克计螺旋藻与以毫升计蒸馏水的比1： 5， 把螺旋藻加到蒸馏水中配制成螺旋藻 发酵培养基， 然后按照以克计螺旋 藻与以毫升计扩 大种子培养液的比2:1， 再加入扩大种子 培养液， 在恒温震荡摇床中在温度36℃与转速120r/ min的条件 下培养5天， 得到螺旋藻发酵 液。 4.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于在步骤A中， 保存植物乳杆菌HSF ‑LAB‑1303 菌株与灭菌生理盐水的体积比1:10 0000。 5.根据权利要求3所述的用途， 其特 征在于在步骤A中， MRS培 养基平板制备 方法如下： 把200ml MRS培养基装到500ml锥形瓶中， 使用立式蒸汽压力灭菌锅在温度121℃下灭 菌15min， 灭菌培养基与一次性培养皿放到超 净工作台中进行紫外灭菌25 min， 待MRS培养基 温度降低到40℃时倒入培 养皿中， 冷却至室温， 得到 MRS培养基平板 。 6.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于在步骤B中， 在250ml锥形瓶中的MRS肉汤培 养基在立式蒸汽压力灭菌锅中在温度121℃下灭菌15mi n， 得到灭菌的MRS肉汤培 养基。 7.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于恒温震荡摇床是HZC ‑250、 HZQ‑F160、 HZQ ‑ X100或THZ‑22型恒温震荡摇床。 8.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于紫外分光光度计是UV2100、 UV2600A、 UV2600 或UV2802型紫外分光 光度计。 9.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于在步骤D中， 得到的螺旋藻发酵液在菌种保 藏真空冷冻干燥机中在温度 ‑80℃下进行冻干处 理， 得到螺旋藻发酵产物。 10.根据权利要求9所述的用途， 其特征在于所述螺旋藻发酵产物的DPPH自由基清除率 为97.7％以上、 羟基自由基清除率为92.4％以上、 超 氧阴离子清除率为33.5％以上、 总还原 力82.5％以上与亚铁 离子螯合率51.2％以上。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115261262 A 2一株植物乳杆菌HSF ‑LAB‑1303及其用途 【技术领域】 [0001]本发明属于天然食品发酵技术领域。 更具体地， 本发明涉及一种植物  乳杆菌 (Lactobaci llusplantarum)HSF ‑LAB‑1303， 还涉及所述 植物乳杆菌  HSF‑LAB‑1303的用途。 【背景技术】 [0002]螺旋藻(Spirulinaplatensis)一种多细胞丝状蓝藻， 其营养丰富， 蛋白含  量高达 60％， 其中藻蓝素是一种营养丰富的蛋白质， 其氨基酸组成齐全，  人体必需氨基酸含量高， 占氨基酸总量的37.42％； 类胡萝卜素含量可达  4.43mg/g。 此外， 它还含有藻多糖、 SOD酶、 多种维生素、 矿物质、 多种  脂肪酸等物质。 它非常适合人体每天补 充对营养物质的需求。 一 些研究结  果表明， 长期服用螺旋 藻不仅能够提高免疫力， 增强机体的抗氧化能力，  而且还 不会产生任何副作用。 螺旋藻能抗辐射损伤、 抗肿瘤、 抗菌， 降低  血清胆固醇、 提高铁的生 物有效性和调理贫血症， 其生物活性物质在提高  人体免疫力、 提高运动能力、 促进机体新 陈代谢、 抗衰老等多方面都有重  要作用。 因此， 螺 旋藻是一种极具应用潜力的食品原料。 [0003]乳酸菌在消化方面起到重要作用， 同样乳酸菌也具有一定的抗氧化能  力。 因此， 利用乳酸菌进 行植物基发酵研究越来越多。 一些研究结果表明，  发酵螺旋 藻和未发酵螺旋 藻均具有抗氧化和抗炎作用， 且发酵后效果更好。  因此， 利用乳酸菌进行螺旋藻发酵的研 究是一个热点。 目前， 螺旋 藻发酵 方式包括： 1)螺旋 藻多种乳酸菌 混合发酵， 未比较不同菌 种之间的差异；  2)螺旋藻单菌乳酸菌发酵， 未开展发酵后功效性成分和活性物质的研究；   3)已知螺旋藻单菌乳酸菌发酵， 并研究活性成分的变化， 比较抗氧化活性  等， 未得到能显 著提高螺旋 藻抗氧化活性的乳酸菌， 具体参见文献： 刘云  鹏， 论文题目 “螺旋藻乳酸菌发酵 工艺优化及发酵产物抗衰老作用的研究 ”， 山东师范大学， 2021年。 [0004]针对现有技术存在的技术缺陷， 本发明人在总结现有技术基础之上，  通过大量实 验研究与分析总结， 终于 完成了本发明。 【发明内容】 [0005][要解决的技 术问题] [0006]本发明的目的是提供一株植物乳杆菌(Lactobacillus  plantarum)  HSF‑LAB‑ 1303。 [0007]本发明的另一个目的是提供 所述植物乳杆菌 HSF‑LAB‑1303的用途。 [0008][技术方案] [0009]本发明是通过 下述技术方案实现的。 [0010]本发明涉及一株植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HSF ‑LAB‑1303， 该菌株 已于2022年05月09日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科  学院微生物研究所中 国微 生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心保藏，  其保藏号为CGMCCNo.24866。 [0011]本发明还涉及所述的植物乳杆菌 HSF‑LAB‑1303在螺旋藻发酵中用途。 [0012]根据本发明的一种优选实施方式， 该螺 旋藻发酵的步骤如下：说　明　书 1/15 页 3 CN 115261262 A 3