(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221074239 2.3 (22)申请日 2022.06.27 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 202 2435 2022.04.20 (71)申请人 中国科学院南海 海洋研究所 地址 511458 广东省广州市南沙区海 滨路 1119号 申请人 南方海洋科学与工程广东省实验室 （广州） (72)发明人 杨清松　张文谦　董俊德　杨斌　 杨冰　凌娟　张颖　李洁　龙丽娟　 张偲　 (74)专利代理 机构 广州科粤专利商标代理有限 公司 44001 专利代理师 刘明星(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 7/22(2006.01) A61K 31/05(2006.01) A61K 35/741(2015.01) A61P 31/00(2006.01) A61P 31/04(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一株珊瑚来源产群体感应抑制剂的假交替 单胞菌株SCSIO 43740及其应用 (57)摘要 本发明公开了一株珊瑚来源产群体感应抑 制剂的假交替单胞菌株SCSI O43740及其应用， 属 于微生物技术领域。 本发明假交替单胞菌 (Pseudoalteromonaspiscicida)SCSIO43740， 保 藏编号为： CCTCCNO： M2022435。 该菌分离自中国 海南省三亚鹿回头岸礁区的鹿角杯形珊瑚 (Pocilloporadamicornis)中， 其代谢产物中含 有群体感应抑制剂2， 4 ‑二叔丁基苯酚(C14H22O)， 对细菌群体感应有显著的的抑制效应， 菌株 SCSIO43740对热胁迫下鹿角杯形珊瑚的光合生 理健康有一定改善作用， 可应用于珊瑚人工养殖 以及珊瑚礁生态修复和保护工程中。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图5页 CN 115161232 A 2022.10.11 CN 115161232 A 1.一株假交替单胞菌(Pseudoalteromonaspiscicida)SCSIO  43740， 其保藏编号为： CCTCC NO： M 2022435。 2.一种制剂， 其特征在于， 含有权利 要求1所述的假交替单胞菌SCSIO  43740和/或其代 谢产物。 3.权利要求1所述的假交替单胞菌SCSIO  43740或权利 要求2所述的制剂在制备群体感 应抑制剂、 抑制群 体感应或调理造礁石珊瑚健康状态中的应用。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述的群体感应抑制剂是2， 4 ‑二叔丁基苯 酚。 5.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述的调理造礁石珊瑚健康状态包括缓解 珊瑚白化和/或病害防治。 6.一种2， 4 ‑二叔丁基苯酚的制备方法， 其特征在于， 是先培养假交替单胞菌得到发酵 液， 再对发酵 液中的代谢产物进行分离纯化获得2， 4 ‑二叔丁基苯酚。 7.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于， 所述的培养， 是将假交替单胞菌接种 于2216E液体培养基培养获得假交替单 胞菌发酵 液。 8.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于， 所述的分离纯化， 包括以下步骤： 向发 酵液中加入乙酸乙酯， 而后进 行超声波破碎和萃 取； 分液保留上层 有机相， 并对样品进行浓 缩至干； 完全旋蒸干后， 使用甲醇溶解 粗提物； 利用正相硅胶柱对样品进行初步分离， 对甲醇粗提物中加入硅胶进行拌样， 风干后填 入正相硅胶柱中， 以石油醚和乙酸乙酯为流动相进行层析， 体积比为1:0、 50:1、 25:1、 9:1、 6:1、 3:1、 1:1、 1:3， 最后使用100％甲醇进行冲洗， 目标活性产物2， 4 ‑二叔丁基苯酚在石油 醚： 乙酸乙酯＝25： 1的浓度洗脱中分离得到 。 9.根据权利要求6 ‑8任一项所述的制备方法， 其特征在于， 所述的假交替单胞菌为假交 替单胞菌SCSIO  43740， 其保藏编号 为： CCTCC NO： M 2022435。 10.2， 4‑二叔丁基苯酚在制备抑制群 体感应制剂中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115161232 A 2一株珊瑚来源产群体感应抑制剂的假交替单胞菌株SCS IO  43740及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物技术领域， 具体涉及一株珊瑚来源产群体感应抑制剂的假交替 单胞菌株SCSIO  43740及其应用。 背景技术 [0002]珊瑚礁生态系统被誉为海洋中的热带雨林， 它们是地球上最具生产力和生物多样 性的生态系统之一， 具有重要的生态服务功能和社会经济价值(Mumby等， 2008)。 截至2020 年， 全球已发现超过2000种珊瑚。 尽管如此， 在国际自然保护联盟红色名录上， 已有200多种 珊瑚被列为濒临灭绝的物种(IUCN， 2021)。 工业化进程导致的温室效应和人类活动加快了 珊瑚礁生态系统退化的脚步。 海水升温引发的大规模的珊瑚白化是造成珊瑚礁生态系统退 化的重要原因(Hoegh ‑Guldberg， 1999)。 除了珊瑚热白化外， 还存在黑带病、 黑斑病、 白带 病、 白色瘟疫、 白斑病 、 黄带病等多种疾病对珊瑚的生存造成威胁。 [0003]珊瑚礁生态保护方式正经历快速发展阶段， 从减少人为影响的被动恢复模式过渡 到以人工干预 的主动恢复模式。 珊瑚礁主动修复模式主要包括珊瑚移植、 幼虫辅助工程和 微生物工程等方法。 珊瑚共附生微生物具有多种益生功能， 因此利用微生物工程方法进行 珊瑚礁修复和保护有着巨大的潜力。 群体感应(QS， quorum  sensing)是某些细菌通过多种 信号分子的级联控制在细菌种群水平上进 行基因和行为调控的一种化学交流形式。 珊瑚的 某些机会致病菌可以通过群体感应机制参与影响珊瑚的疾病进程。 群体感应抑制剂(QSI， quorum sensing inhibitor)是具有群体猝灭(QQ， qu orum quenching)效应的化合物， 群体 淬灭是微生物抑制群体感应的重要机制。 运用群体猝灭菌株或群体 感应抑制剂对珊瑚中的 机会致病菌的群体感应过程进行抑制， 可能有助于珊瑚微生物病害的防治和 健康调理。 因 此， 通过分离获得产群体感应抑制剂的珊瑚共附生菌株， 检测其群体感应抑制效应， 并验证 其对珊瑚健康的促进效应， 可以为珊瑚礁生态修复和保护提供新工具。 发明内容 [0004]为解决上述问题， 本发明提供了一株假交替单胞菌(Pseudoalteromonas   piscicida)SCSIO43740。 所述的假交替单胞菌SCSIO  43740分离自鹿角杯形珊瑚， 可以用 2216E液体培养基进行培养。 本发 明的假交替单胞菌S CSIO 43740及其产生的微生物群体感 应抑制剂对 模式菌紫色杆菌 CV026的群 体感应具有高效的抑制作用。 [0005]本发明的第一个目的是提供一株假交替单胞菌(Pseudoalteromonas  piscicida) SCSIO43740， 其保藏编号 为： CCTCC NO： M 2022435。 [0006]通过在升温条件下向鹿角杯形珊瑚添加假交替单胞菌SCSIO  43740， 并对其光化 学效率、 叶绿素a含量和虫黄藻密度等生理指标进生测定， 评估菌剂对珊瑚的益生效应。 结 果发现在升温条件 下， 相比对照组， 添加假交替单胞菌SCSIO  43740显著改善珊瑚光化学效 率、 叶绿素a含量和虫黄藻密度等光合生理指标。 证实假交替单胞菌SCSIO  43740对鹿角杯说　明　书 1/6 页 3 CN 115161232 A 3