(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210635135.X (22)申请日 2022.06.07 (71)申请人 广西大学 地址 530004 广西壮 族自治区南宁市西乡 塘区大学东路10 0号 (72)发明人 姜伟　李淑萍　何勇强　唐纪良　 (74)专利代理 机构 成都知棋知识产权代理事务 所(普通合伙) 51325 专利代理师 马超前 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/22(2020.01) A01P 1/00(2006.01) A01P 3/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一株生防贝莱斯芽孢杆菌 ML21及其应用 (57)摘要 本发明公开了一株生防贝莱斯芽孢杆菌 ML21及其应用。 该菌株于2022年3月14日保藏于 广东省微生物菌种保藏中心， 其菌株保藏号为 GDMCCNo:62293。 本发明提供的芽孢杆菌ML21具 有多种水解酶活性， 不仅能显著抑制芒果细菌性 角斑病菌的生长， 同时对多种植物病原细菌和真 菌具有显著的抑制作用， 为植物病害的防控提供 了新的微 生物资源， 具有很好的应用前 景。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图3页 CN 114933995 A 2022.08.23 CN 114933995 A 1.一株生防贝莱斯芽孢杆菌ML21， 其于2022年3月14日保藏于广东省微生物菌种保藏 中心， 菌株保藏 号为GDMCC No:62293。 2.一种包 含如权利要求1所述贝莱斯芽孢杆菌 ML21的微 生物制剂。 3.一种由权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌 ML21制备 所得的无菌发酵 液。 4.一种如权利要求3所述无菌发酵液的制备方法， 其特征在于， 所述方法包含如下步 骤： 将如权利要求1所述的生防贝莱斯芽孢杆菌ML21在固体培养基上划线， 挑取单菌落接 种于液体培 养基， 过夜培 养； 将上述过夜培养所得的菌液以1％的接种量接种于液体培养基， 与上述培养条件相同 的条件下培 养48h； 将上述培养所得的菌液以12000rpm， 10min离心， 取上清液用0.22 μm滤膜过滤获得无菌 发酵液。 5.如权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌ML21或权利要求2所述的微生物制剂在生物防 治中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特 征在于， 该应用包 含抑制若干种植物病原细菌； 其中， 所述的植物病原细菌包括： 芒果细菌性角斑病菌、 水稻条斑病菌、 水稻白叶枯病 菌、 十字花科黑腐病菌、 柑橘溃疡病菌和甘蔗白条病菌中任意 一种或两种以上。 7.根据权利要求5所述的应用， 其特 征在于， 该应用包 含抑制若干种植物病原真菌； 其中， 所述的植物病原真菌包括： 稻恶苗病菌、 稻瘟病菌、 立枯丝核菌、 芒果炭疽病菌、 莴苣菌核病菌和香蕉枯萎病菌中任意 一种或两种以上。 8.如权利要求3所述的无菌发酵 液在抑制植物病原菌的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述的植物病原菌包括： 芒果细菌性角斑 病菌、 水稻条斑病菌、 水稻白叶枯病菌、 十字花科黑腐病菌、 柑橘溃疡病菌、 甘蔗白条病菌、 稻恶苗病菌、 稻瘟病菌、 立枯丝核菌、 芒果炭疽病菌、 莴苣菌核病菌和香蕉枯萎病菌中任意 一种或两种以上。 10.一种由权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌ML21的挥发性代谢物在抑制芒果炭疽病 菌中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114933995 A 2一株生防贝莱斯芽孢杆菌ML21及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及农作物病害生物防治技术领域， 具体涉及一株生防贝莱斯芽孢杆菌 ML21及其应用。 背景技术 [0002]芒果， 被誉为热带水果之王， 是重要的经济作物。 芒果在生长过程中易 受到病害的 影响， 病害是限制 芒果产量的一大因素， 芒果细菌性角斑病 逐年加重已上升为芒果上 的主 要病害。 该病害危害芒果的枝、 叶、 果， 严重影响芒果的产量和品质。 目前， 有关芒果病害防 治的方法多为化学方法， 但因长期单一使用某一农药而导致病原菌产生抗药性， 化学杀菌 剂的防治效果不理想。 生物防治在芒果病害 上的应用， 是通过引入植物提取物、 生防菌剂或 拮抗微生物等， 抑制病原生物的生长繁殖， 从而控制果 实病害的发生。 因此生物防治逐渐成 为近几年研究的热点， 贝莱斯芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一个新种， 已经报道对多种植物病 原菌有拮抗效果， 但其在芒果细菌性角斑病上的研究还比较少。 发明内容 [0003]本发明的目的是提供一株生防贝莱斯芽孢 杆菌(Bacillus  velezensis)ML21及其 应用， 为解决芒果细菌性角斑病的抗药性 强， 防治难等问题， 为芒果细菌性角斑病的防治提 供新的微 生物资源。 [0004]为了达到上述目的， 本发明提供了一株生防贝莱斯芽孢杆菌ML21， 该菌株已于 2022年3月14日保藏于广东省微 生物菌种保藏中心， 菌株保藏 号为GDMCC No:62293。 [0005]本发明还提供了一种包 含上述贝莱斯芽孢杆菌 ML21的微 生物制剂。 [0006]本发明还提供了一种包 含由上述贝莱斯芽孢杆菌 ML21制备 所得的无菌发酵 液。 [0007]本发明还提供了一种上述无菌发酵 液的制备 方法， 该方法包含如下步骤： [0008]1)将上述的生防贝莱斯芽孢杆菌ML21在固体培养基上划线， 挑取单菌落接种于液 体培养基， 过夜培 养； [0009]2)将上述过夜培养所得的菌液以1％的接种量接种于液体培养基， 与上述培养条 件相同的条件下培 养48h； [0010]3)将上述培养所得的菌液以12000rpm， 10min离心， 取上清液用0.22 μm滤膜过滤获 得无菌发酵 液。 [0011]本发明还提供了一种包含上述的贝莱斯芽孢杆菌ML21或微生物制剂在生物防治 中的应用。 [0012]优选地， 上述应用包 含抑制多种植物病原细菌 。 [0013]优选地， 植物病原细菌包括芒果细菌性角斑病菌、 水稻条斑病菌、 水稻白叶枯病 菌、 十字花科黑腐病菌、 柑橘溃疡病菌和甘蔗白条病菌 。 [0014]优选地， 上述应用包 含抑制多种植物病原真菌 。 [0015]优选地， 植物病原真菌包括稻 恶苗病菌、 稻瘟病菌、 立枯丝核菌、 芒果炭疽病菌、 莴说　明　书 1/5 页 3 CN 114933995 A 3