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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211014259.2 (22)申请日 2022.08.23 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.23658 2021.10.25 (71)申请人 北京三元食品股份有限公司 地址 100163 北京市大兴区瀛海瀛昌街8号 (72)发明人 陈历俊 季亚栋 李先平 刘璐  贾舸 乔为仓 赵军英  (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 张璐 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23C 9/123(2006.01) A23K 10/12(2016.01)A23L 33/135(2016.01) A61K 35/747(2015.01) A61P 3/02(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一株罗伊氏乳杆菌及其应用 (57)摘要 本发明涉及微生物 技术领域, 尤其涉及一株 罗伊氏乳杆菌及其应用。 本发明提供了一株稳定 高产叶酸的罗伊氏乳杆菌, 其为罗伊氏乳杆菌 (Lactobacillus  reuteri)HM ‑R28, 其保藏号为 CGMCC No.23658。 本发明解决了微生物生产的活 性叶酸产量不高且不稳定的技术难题。 而且本发 明首次以母乳来源的益生菌进行分析, 将其代谢 途径中的指标进行检测, 明确其合成机理, 为进 一步提高叶酸的产量奠定 基础。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115478027 A 2022.12.16 CN 115478027 A 1.一株罗伊氏乳杆菌, 其特征在于, 其为罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus  reuteri)HM ‑ R28, 其保藏 号为CGMCC No.23658。 2.一种微 生物菌剂, 其特 征在于, 其包 含权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌 。 3.一种产品, 其特征在于, 其含有权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌或权利要求2所述的 微生物菌剂; 所述产品为选自药物、 保健品、 食品或食品添加剂、 以及饲料或饲料添加剂 中 的任意一种。 4.权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌或权利要求2所述的微生物菌剂在制备产品中的应 用, 所述产品为选自药物、 保健品、 食品或食品添加剂、 以及饲料或饲料添加剂中的任意一 种。 5.权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌或权利要求2所述的微生物菌剂在制备含有叶酸的 产品中的应用。 6.一种产品, 其特征在于, 其以权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌或权利要求2所述的微 生物菌剂为原料制得; 所述产品为选自药物、 保健品、 食品或食品添加剂、 以及饲料或饲料 添加剂中的任意 一种。 7.一种发酵乳的制备方法, 其特征在于, 包括: 采用含有权利要求1所述的罗伊氏乳杆 菌的发酵剂进行发酵。 8.根据权利要求7所述的制备方法, 其特征在于, 包括: 将权利要求1所述的罗伊氏乳杆 菌接种于牛乳中, 在37℃ ±5℃下发酵制得。 9.根据权利要求8所述的制备方法, 其特征在于, 所述罗伊氏乳杆菌与 所述牛乳的重量 比为1: 45~5 5。 10.一种发酵乳, 其特 征在于, 其由权利要求7~ 9中任一项所述的制备 方法制得。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115478027 A 2一株罗伊氏乳杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及微 生物技术领域, 尤其涉及一株罗伊氏乳杆菌及其应用。 背景技术 [0002]随着科学研究的不断深入, 叶酸对人体健康的重要程度不断增加, 但它在天然样 品中的含量很低, 组成复杂而且稳定性差, 因此叶酸很可能是所有维生素中给分析工作者 带来最大挑战的物质。 天然叶酸的主要来源是绿色植物的叶子、 动物 肝脏、 蛋黄、 大豆、 小麦 和以叶酸发酵产生的早餐谷物类及酵母。 市售的叶酸以化学合成为主, 但化学合成的叶酸 和天然叶酸在人体内的代谢不尽相同, 摄入过多的人工叶酸, 会引起不良作用, 比如 减弱巨 噬细胞的吞噬作用, 甚至会促进部 分癌细胞的生长。 而微生物发酵产生的叶酸质量安全, 不 会给人体带来副作用, 研究较多的菌种主 要有酵母菌, 乳酸菌, 双歧杆菌 。 [0003]其中, 荷兰的Amo  Wegkamp等利用代谢工程手段来提高乳酸乳球菌产叶酸的能力, 印度的Dhanya  Gandgadharan等在发酵乳和果汁中加入乳脂乳球菌来提高产品中叶酸的含 量并进行了发酵条件的优化。 此外, 青霉菌如青霉属胃瘤球菌也具有生产叶酸的能力, 为 发 酵法生物合成叶酸产业 化开辟了重要途径。 [0004]微生物细胞和植物能利用自身的蝶呤、 对氨基苯甲酸(PABA)和谷氨酸在叶酸合成 酶的作用下从头合成叶酸, 生产的总叶酸量包括细胞内和细胞外的含量。 其中, 胞内的叶酸 含量一般是胞外叶酸的2 ‑6 倍, 而人和其他高等哺乳动物缺乏完整的叶酸合成系统, 只能 通过食物摄取叶酸。 由于目前叶酸的生产主要是以化学合 成为主, 安全性不高, 通过微生物 方法发酵所得的叶酸品质很高, 对人体无副作用, 但所得的叶酸含量比较低。 因此, 从自然 界存在的菌株中筛 选出高产叶酸的菌株成为了研究的热点。 发明内容 [0005]本发明提供了一株罗伊氏乳杆菌, 其为罗伊氏乳杆菌  (Lactobacillus  reuteri) HM‑R28, 其分离自新鲜母乳中。 该菌株已于  2021年10月25日保藏于中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中心。 保藏单位地址: 北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微 生物研究所; 邮政编码: 100101, 分类命名: 罗伊氏乳杆菌Lactobacillus  reuteri, 保藏编 号为CGMCC No.23658。 [0006]本发明提供的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus  reuteri)HM ‑R28, 能够通过发酵过 程稳定地获得 大量的叶酸。 [0007]进一步, 本发明还提供了一种微 生物菌剂, 其包 含上述罗伊氏乳杆菌 。 [0008]进一步, 本发明还提供了一种产品, 其含有上述罗伊氏乳杆菌或微生物菌剂; 所述 产品为选自药物、 保健品、 食品或食品添加剂、 以及饲料或饲料 添加剂中的任意 一种。 [0009]进一步, 本发明提供了上述罗伊氏乳杆菌或微生物菌剂在制 备产品中的应用, 所 述产品为选自药物、 保健品、 食品或食品添加剂、 以及饲料或饲料 添加剂中的任意 一种。 [0010]进一步, 本发明提供了上述罗伊氏乳杆菌或微生物菌剂在制备含有叶酸的产品中说 明 书 1/5 页 3 CN 115478027 A 3

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