(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210932916.5 (22)申请日 2022.08.04 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO:M20216 69 2021.0 6.04 (71)申请人 兰州大学 地址 730000 甘肃省兰州市城关区天水南 路222号 (72)发明人 张金林　张明旭　赵玲玉　赵祺　 (74)专利代理 机构 北京力量专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 11504 专利代理师 戴治娟 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01C 1/06(2006.01) A01G 22/40(2018.01)A01N 63/20(2020.01) A01P 21/00(2006.01) C12R 1/41(2006.01) (54)发明名称 一株能够促进扁蓿豆生长和结瘤固氮的根 瘤菌及其应用 (57)摘要 本发明提供了一种根瘤菌菌剂及其制备和 应用， 属于微生物技术领域。 该发明所采用的根 瘤菌GBXD30菌株， 已保藏于中国典型培养物保藏 中心， 保藏编号为CCTCC  NO： M2021669， 本发明的 根瘤菌菌剂适用于高寒豆科牧草扁蓿豆的种植， 能够促进青藏高原重要豆科牧草扁蓿豆植株的 生长和结瘤固氮， 所述的根瘤菌GBXD ‑30菌株接 种扁蓿豆 具有高效结瘤和固氮能力， 可促进扁蓿 豆的生长， 并进一步提高高寒豆科牧草的品质和 生物量， 具有广阔的应用前 景。 权利要求书1页 说明书6页 附图5页 CN 115287229 A 2022.11.04 CN 115287229 A 1.一株根瘤菌(Rhizobiumyanglingense)GBXD ‑30， 于2022年6月4日保藏于中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO： M20216 69。 2.如权利要求1所述的根瘤菌GBXD ‑30， 其特征在于， 培养条件为： 乳糖10g  L‑1， 酵母7g  L‑1， CaCl20.7g L‑1。 3.如权利要求1所述的根瘤菌GBXD ‑30在促进植物生长中的应用。 4.如权利要求1所述的根瘤菌GBXD ‑30在促进植物固氮中的应用。 5.如权利要求3或4所述的应用， 其特 征在于， 所述的植物为扁蓿豆 。 6.一种含有权利要求1所述的根瘤菌GBXD ‑30的微生物菌剂。 7.如权利要求1所述的根瘤菌GBXD ‑30在制备促进植物生长制剂中的应用， 其特征在 于， 所述的促进植物生长制剂为 微生物菌剂或微 生物肥料。 8.如权利要求7 所述的应用， 其特 征在于， 所述的植物为扁蓿豆 。 9.一种固氮菌剂， 其特 征在于， 包括权利要求1所述的根瘤菌GBXD ‑30。 10.如权利要求6所述的微生物菌剂或如权利要求9所述的固氮菌剂的施用方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： ①预先将土层表皮翻耕， 整平以备播种； ②准备好豆科牧草种子， 将其装入干净的拌种器 内， 添加所述根瘤菌和预冷的开水， 搅 拌均匀， 该根瘤菌菌剂使用量为每1千克种子使用菌剂0.2升， 加水量以菌剂全部粘附在种 子上为宜； ③将拌好的种子在避光 通风处晾15 ‑30分钟； ④按常规方法播种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115287229 A 2一株能够促进扁蓿豆生长和结瘤固氮的根瘤菌及其应用 技术领域 [0001]本发明属于农业微生物技术领域， 具体涉及一株能够促进扁蓿豆生长和结瘤固氮 的根瘤菌及其应用。 背景技术 [0002]近年来， 全球极端天气现象频繁 发生， 我国部分地区出现极寒天气， 导致高寒草地 大面积， 优质牧草品种比例下降， 草地放牧价值降低。 随着高寒草地畜牧业的不断发展， 国 家对天然草地的改良和人工草地的建设力度不断加大， 对适应不同地区和环境特点的牧草 也提出了一系列新的要求， 如抗冷， 抗寒， 抗盐碱等成为了牧草向环境更极端的区域 发展和 推广的重要考量指标。 因此， 一些具有代表性的禾本科植物成为了首选的种质资源。 但是， 这些治理措施中只重视禾本科牧草的作用， 造成了牧草多样性单一化， 因此必须重视优质 的豆科牧草在高寒草 地中发挥的重要作用， 从而增 加高寒草 地牧草多样性和丰富度。 [0003]扁蓿豆(Medicago  ruthenica)又称为野苜蓿、 花苜蓿和扁豆子等， 是豆科植物苜 蓿属中寿命较长的草本植物。 扁 蓿豆与其他牧草相比返青较晚， 在甘南地区一般于4～5月 初返青， 春季生长缓慢， 进入夏季后扁蓿豆迅速生长， 6月中下旬孕蕾， 7月初开花， 8月底种 子基本成熟， 整个生长发育其大致在120天左右。 扁蓿豆属于抗寒能力极强的豆科牧草， 幼 苗可在‑3～‑4℃下正常生长， 成株则能够在 ‑45℃的高寒 牧草区域安全越冬， 同时扁蓿 豆也 具有较强的耐旱能力， 并且可在pH值为8 ‑9的盐碱地正常生长。 但是， 扁蓿豆在生长过程中 的氮素供应问题一 直没有解决。 [0004]氮素供应匮乏是我国大规模牧草种植和推广中存在的突出问题， 传统的化工类氮 肥能够为牧草提供氮肥， 但是， 传统的施肥方式不适用于大面积天然牧草和人工牧草。 利用 微生物固氮是本领域技术人员解决植物固氮能力差的技术手段， 例如， 发明专利 CN109735468A公开了一株具有广谱结瘤特性的大豆慢生根瘤菌及其应用和以其制备的复 合根瘤菌剂； 发明专利CN104387150B公开了苜蓿种子根瘤菌种衣剂及其应用； 发明专利 CN113005059A公开了一株四翅槐中间根瘤菌及其培养方法、 黄芪根瘤菌剂及方法和应用。 但是， 现有的类似农用菌剂产品很难适应扁蓿 豆生长的寒冷、 干旱和高海拔的环境条件， 根 瘤菌株难以存活、 结瘤及固氮， 导致高寒豆科牧草种植中缺 乏高效安全的根瘤菌剂产品的 问题， 很难结瘤或形成有效根瘤。 [0005]发明人在研究过程中， 从高寒草地扁蓿豆根际分离得到了一株针扁蓿豆根瘤菌， 所述的根瘤菌能够适应寒冷、 干旱和高海拔的环 境， 接种扁蓿 豆能够有效固氮， 并促进扁蓿 豆的生长 。 发明内容 [0006]本发明的首要目的是提供一株根瘤菌(Rhizobium  yanglingense)GBXD ‑30， 于 2022年6月4日保藏于中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO： M20216 69。 [0007]优选的， 所述的根瘤菌GBXD ‑30的培养条件为： 乳糖10g  L‑1， 酵母7g L‑1， CaCl2 0.7 说　明　书 1/6 页 3 CN 115287229 A 3