(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210794746.9 (22)申请日 2022.07.07 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.25062 2022.06.10 (71)申请人 天津科技大 学 地址 300457 天津市滨 海新区经济技 术开 发区第十三大街9号 (72)发明人 王楠　张同存　张月　韩先磊　 赵崇杰　朱彩霞　韩雅波　罗学刚　 李中媛　 (74)专利代理 机构 天津盛理知识产权代理有限 公司 12209 专利代理师 韩晓梅 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)C12P 7/22(2006.01) C12P 17/06(2006.01) A61K 36/346(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61K 125/00(2006.01) C12R 1/11(2006.01) (54)发明名称 一株能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧 化能力的巨大芽孢杆菌、 方法和应用 (57)摘要 本发明公开一种能够用于发酵桔梗的巨大 芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)， 所述巨大芽孢 杆菌的名称为： ZY2104， 分类名称为： 巨大芽孢杆 菌， 保藏编号为： CGMCCN O.25062， 保藏日期： 2 022 年6月10日， 北 京市朝阳区北辰西路1号院3号， 保 藏单位： 中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微 生物中心 。 本发明巨大芽孢杆菌ZY2104菌株分离 自新鲜桔梗根部土壤， 具有β ‑葡萄糖苷酶活性。 本发明方法可以显著提高桔梗发酵液中多酚、 黄 酮等活性成分， 提高其 抗氧化能力。 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 CN 115074291 A 2022.09.20 CN 115074291 A 1.一株能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧化能力的巨大芽孢杆菌(Bacillus   megaterium)， 其特征在于： 所述巨大芽孢杆菌的名称为： ZY2104， 分类名称为： 巨大芽孢杆 菌， 保藏编号为： CGMCC  NO.25062， 保藏日期： 2022年6月10日， 北京市朝阳区北辰西路1号院 3号， 保藏单位： 中国微 生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心。 2.根据权利要求1所述的能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧化能力的巨大芽孢杆 菌， 其特征在于： 所述巨大芽孢杆菌是从新鲜桔梗根部 土壤分离获得的。 3.根据权利要求1所述的能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧化能力的巨大芽孢杆 菌， 其特征在于： 所述巨大芽孢杆菌在R2A固体培养基上菌落呈圆形、 灰白色， 表面光滑湿 润； 或者， 所述巨大芽孢杆菌的基因序列为MN 473280.1。 4.根据权利要求1所述的能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧化能力的巨大芽孢杆 菌， 其特征在于： 所述巨大芽孢杆菌具有β ‑葡萄糖苷酶活性。 5.根据权利要求1至4任一项所述的能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧化能力的巨 大芽孢杆菌， 其特 征在于： 所述巨大芽孢杆菌能够提高发酵桔梗中活性成分含量； 或者， 所述巨大芽孢杆菌能够提高发酵桔梗的总抗氧化能力； 或者， 所述巨大芽孢杆菌能够提高发酵桔梗的总还原能力； 或者， 所述巨大芽孢杆菌能够提高发酵桔梗的D PPH自由基清除率； 或者， 所述巨大芽孢杆菌能够提高发酵桔梗的羟自由基清除率。 6.一种利用如权利要求1至5任一项所述的巨大芽孢杆菌发酵桔梗的方法， 其特征在 于： 包括步骤如下： 将巨大芽孢杆菌ZY2104的种子发酵液， 按2 ‑5％接种量接种于桔梗提取液， 发酵条件 为： 30‑42℃摇床培 养， 转速为5 0‑150r/min， 发酵24 ‑72h。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特 征在于： 所述桔梗提取 液的制备步骤如下： 将桔梗片用粉碎机粉碎后， 过40目筛制成粉末， 称量桔梗粉末和蒸馏水， 桔梗粉末： 蒸 馏水的质量比为2.5： 5 0， 充分混匀后， 于121℃， 20mi n灭菌， 制成桔梗提取 液； 所述巨大芽孢杆菌ZY2104的种子发酵 液的发酵 方法为： 将冻存的巨大芽孢杆菌ZY2 104菌液解冻后， 接到R2A固体培养基上， 于37℃培养箱倒 置 培养24h， 挑取菌株形态最大、 表 面光滑湿润， 边缘整齐的单菌落接种至R2A液体培养基中进 行活化， 再以1％的接种量接种 于R2A液体培养基中37℃， 150r/min培养24h。 二次活化后制 成种子发酵 液。 8.如权利要求1至 5任一项所述的巨大芽孢杆菌在桔梗或发酵中药中的应用。 9.如权利要求1至5任一项所述的巨大芽孢杆菌在提高桔梗发酵液中多酚、 黄酮含量方 面中的应用。 10.如权利要求1至5任一项所述的巨大芽孢杆菌在提高桔梗发酵液中抗氧化活性方面 中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115074291 A 2一株能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧化能力的巨大芽孢 杆菌、 方法和应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物、 桔梗发酵技术领域， 尤其是一株能够提高发酵桔梗的活性成 分及抗氧化能力的巨大芽孢杆菌、 方法和应用。 背景技术 [0002]桔梗(Platycodonis  Radix)为桔梗科(Campanulaceae)桔梗属植物桔梗 (Platycodon  grandiflorum(Jacq.)A.DC.)的干燥根， 属于一种药食同源的中药材。 桔梗始 载于 《神农本草经》 ， 性微温， 味甘苦辛， 入肺经， 具有宣肺利咽、 祛痰排脓之功效。 由于其含 有丰富的黄酮、 多酚、 皂苷、 多糖类物质， 因此具有较强的抗氧化、 抗肿瘤、 抗炎、 降血糖、 降 血脂等功效。 除了富含这些药效物质外， 鲜桔梗中还含有蛋白质、 脂肪、 碳水化合物等主要 营养成分以及钙、 磷、 铁等矿物质。 [0003]巨大芽孢 杆菌(Bacillus  megaterium)是芽孢 杆菌属， 属于好氧革兰氏阳性杆菌， 菌株表达率高、 遗传稳定、 产 物可分泌、 发酵工艺 成熟， 是一种有益菌， 具有对环境和人畜无 害等特点而受到人们的关注与研究。 菌株在2 4h内氨碳降解率达到95％以上， 并且还 具有硝 酸还原与亚硝酸的还原能力， 其中的海藻胶裂降解酶、 蛋白酶、 纤维素酶活性会把构成海藻 大分子的物质逐渐降解为小分子和水溶性物质， 保留了海藻生物活性。 并且其产生的谷氨 酸脱羧酶可催化谷氨酸生成γ ‑氨基丁酸， 该氨基酸作为哺乳动物神经系统中重要的神经 传递素， 具有降低血压、 镇静、 利尿等功能。 但有关巨大芽孢杆菌是否能够提高发酵桔梗的 活性成分尚未 见报道。 [0004]中药成分经微生物发酵转化是中药发挥药理作用的关键过程。 微生物发酵中药具 有提高有效成分含量、 增强疗效、 扩 大适应证、 减少毒副作用、 产生新的药用资源等作用。 但 巨大芽孢杆菌对于中药发酵的研究较少。 [0005]因此， 寻找一种可促进发酵桔梗活性成分提高且能提高抗氧化能力的菌株具有重 要的意义。 [0006]通过检索， 尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。 发明内容 [0007]本发明的目的在于克服现有技术的不足之处， 提供一株能够提高发酵桔梗的活性 成分及抗氧化能力的巨大芽孢杆菌、 方法和应用。 [0008]本发明解决其 技术问题所采用的技 术方案是： [0009]一株能够提高发酵桔梗的活性成分及抗氧化能力的巨大芽孢杆菌(Bacillus   megaterium)， 所述巨大芽孢杆菌的名称为： ZY2104， 分类名称为： 巨大芽孢杆菌， 保藏编号 为： CGMCC  NO.25062， 保藏日期： 2022年6月10日， 北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 保藏单 位： 中国微 生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心。 [0010]进一步地， 所述巨大芽孢杆菌是从新鲜桔梗根部 土壤分离获得的。说　明　书 1/6 页 3 CN 115074291 A 3