(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210651979.3 (22)申请日 2022.06.09 (83)生物保 藏信息 GDMCC No ： 62393 202 2.04.18 (71)申请人 江南大学 地址 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大 道1800号 (72)发明人 张娟　彭政　何梦妮　陈坚　 堵国成　 (74)专利代理 机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权 代理有限公司 2321 1 专利代理师 赵巧娜 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 21/00(2006.01)A61K 8/99(2017.01) A61K 8/64(2006.01) A61Q 17/00(2006.01) A61K 35/742(2015.01) A61K 38/16(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 31/10(2006.01) A61P 17/00(2006.01) A23L 33/135(2016.01) A23L 33/18(2016.01) A23K 10/18(2016.01) A23K 20/147(2016.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一株贝莱斯芽孢杆菌产抗菌脂肽及其在化 妆品和食品的应用 (57)摘要 本发明公开了一株贝莱斯芽孢杆菌产抗菌 脂肽及其在化妆品和食品的应用， 属于生物工程 技术领域。 本发明从酸菜表面微生物分离菌株， 并采用牛津杯法对其进行痤疮丙酸杆菌拮抗微 生物的筛选， 得到一株能高效拮抗痤疮丙酸杆菌 的微生物 。 经鉴定， 菌株为Bacillusvelezensi s， 属于贝莱斯芽孢杆菌， 并被 保藏于广东省微生物 菌种保藏中心， 保藏号为 GDMCCNo： 62 393， 保藏日 期为2022年4月18日。 对该菌株的抑菌物质进行 提取， 得到贝莱斯芽孢杆菌抗菌脂肽， 该抗菌脂 肽对常见食品相关菌株和皮肤致病菌有广谱的 抑菌效果， 可以应用于食品、 化妆品、 护肤品等方 面。 权利要求书1页 说明书9页 序列表1页 附图3页 CN 115044505 A 2022.09.13 CN 115044505 A 1.一株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus  velezensis)， 其特征在于， 所述贝莱斯芽孢杆菌保 藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏编号为GDMCC  No： 62393， 保藏日期为2022年4月18 日。 2.一种微生物菌剂， 其特征在于， 所述微生物菌剂中含有权利要求1所述的贝莱斯芽孢 杆菌或其发酵 液， 或其提取物， 或其代谢物。 3.一种产品， 其特征在于， 所述产品中含有权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌或权利要 求2所述的微 生物菌剂； 所述产品为食品、 饲料 添加剂、 护肤品或化妆品。 4.一种抗菌药品， 其特征在于， 所述药品中含有权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌或权 利要求2所述的微 生物菌剂。 5.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌或权利要求2所述的微生物菌剂在抑制细菌或真 菌中的应用， 其特 征在于， 所述应用不以疾病的诊断或治疗为目的。 6.如权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述细菌包括但不 限于痤疮丙酸杆菌、 金黄 色葡萄球菌、 李 斯特菌、 屎肠球菌、 恶 臭假单胞菌； 所述真菌包括但 不限于白色念珠菌、 米曲 霉、 黄曲霉、 杂色曲霉、 微小根毛霉 、 伞状毛霉菌、 Aspergillus  costaricensis、 Cla dosporium   subcinereum。 7.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌或权利要求2所述的微生物菌剂在制备抑制细菌 或真菌的产品中的应用。 8.如权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述产品包括但不限于药品、 饲 料添加剂、 化 妆品、 护肤品。 9.一种抗菌脂肽， 其特征在于， 所述抗菌脂肽制备方法为： 将权利要求1所述的贝莱斯 芽孢杆菌 接种至培养基中发酵制备 得到发酵 液， 从发酵 液中分离提取 得到抗菌 脂肽。 10.权利要求9所述的抗菌脂肽在抑制细菌或真菌中的应用， 其特征在于， 所述细菌包 括但不限于痤疮丙酸杆菌、 金黄 色葡萄球菌、 李 斯特菌、 屎肠球菌、 恶 臭假单胞菌； 所述真菌 包括但不限于白色念珠菌、 米曲霉 、 黄曲霉、 杂色曲霉 、 微小根毛霉、 伞状毛霉菌 、 Aspergillus   costaricensis、 Cladosporium  subcinereum； 所述应用不以疾病的诊断或治疗为目的。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115044505 A 2一株贝莱斯芽孢杆菌产抗菌脂肽及其在化妆品和食品的应用 技术领域 [0001]本发明涉及 一株贝莱斯芽孢杆菌产抗菌脂肽及其在化妆品和食品的应用， 属于生 物工程技术领域。 背景技术 [0002]皮肤微生态指由各种微生物与皮肤表面的组织等共同组成的生态系统。 皮肤微生 态与体内代谢失衡会发生如特征性皮炎、 银屑病、 痤疮等皮肤性疾病， 引起皮肤疾病的一个 重要原因是微生物感染， 例如痤疮丙酸杆菌的大量异常繁殖可引起痤疮， 金黄色葡萄球菌 可导致特异 性皮炎， 白色念珠菌可引起皮肤念珠菌病， 好 发于皮肤皱褶处(腑窝、 腹股沟， 乳 房下， 肛门周围及甲沟， 指 间)， 皮肤潮红、 潮湿、 发亮， 有时盖上一层白色或呈破裂状物， 病 变周围有小水泡。 因此一种能广谱抑制皮肤致病菌的抑菌物质能在皮肤疾病的治疗和皮肤 微生态的保护方面存在潜在的应用价 值。 [0003]食品腐败对食品工业造成了巨大损失。 据统计， 全世界每年食品腐败造成了约有 10％‑20％的食品损失。 微生物的大量繁殖是导致食品腐败变质决定性因素之一。 添加防腐 剂作为抑制腐败的方法之一， 目前主要应用的防腐剂为化学防腐剂。 然而化学防腐剂对人 体存在一定的毒性， 随着人们对食品安全关注度的不断提升， 寻找更多 可能的天然的、 绿色 安全的、 能有效抑制食品腐败菌滋 生的防腐剂变得越来越受到 重视。 [0004]贝莱斯芽孢杆菌的种 分类地位 的确定较 晚， 最早在1999年被分离到， 直到2005年 被首次报道和命名。 但近年来， 国内外有关贝莱斯芽孢杆菌的报道越来越多， 研究主要集中 在促进动植物生长、 拮抗病原菌、 诱导系统抗性、 抑菌物质及其基因簇鉴定、 拮抗作用机制 等方面， 该菌在生物防治、 药物研发、 食品发酵和工业应用等方面具有重要作用。 尤其在抑 菌方面， 贝莱斯芽孢杆菌通过合成次级代谢产物实现对病原菌的抑制作用， 其中主要包括 细菌素、 抑菌蛋白、 脂肽类物质和聚酮化合物等。 其中抗菌脂肽发挥了重要作用。 贝莱斯芽 孢杆菌产生的脂肽类物质包括表面活性素、 伊枯草菌素、 丰原素、 杆菌霉素等。 刘雪娇等发 现贝莱斯芽孢杆菌3A3 ‑15能够产生表面活性素等抑菌物质， 能够造成尖孢镰刀菌的菌丝膨 大、 弯曲、 缠绕、 螺旋、 节间缩短甚至菌丝断裂等， 具有明显的致畸作用， 而且对孢子萌发的 抑制率高达93.2％。 Chowdhury等研究表明贝莱斯芽孢杆菌FZB42菌株在与莴苣(lettuce) 根系相互作用过程中能够产生Surfactin、 Fengycin和Bacillomycin  D， 并认为其代谢产物 脂肽类和不仅直接抑制立枯丝核菌， 还能够介导莴苣的防御性反应。 贝莱斯芽孢杆菌Y6产 生的脂肽类物质(75 μg/mL)能够抑制大约60％的真菌孢子萌发， 其中伊枯草菌素对真菌孢 子萌发表现出较强的抑制作用， 泛革素表现出较弱的抗真菌活性， 表面活性素则 没有明显 的抑制真菌活性。 [0005]虽然目前针对贝莱斯芽孢杆菌产抗菌脂肽对病原菌的抑制 作用的研究较多， 但多 数研究仍然主要集中于农业、 生物防治和养殖业等方面。 还未 曾见贝莱斯芽孢杆菌产抗菌 脂肽针对皮肤致病菌和食品腐败菌菌的拮抗从而保护皮肤微生态及 食品防腐。 脂肽具有低 毒性、 好的生物降解性、 有用的物理化学性质和生物活性等独特优势， 这使其在化妆品、 医说　明　书 1/9 页 3 CN 115044505 A 3