(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210808596.2 (22)申请日 2022.07.11 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO:M202 2086 202 2.01.25 (71)申请人 湖北省生物农药工程研究中心 地址 430064 湖北省武汉市洪山区南湖大 道8号 (72)发明人 万中义　方伟　张亚妮　吴兆圆　 王开梅　张志刚　吴洪渠　李泰明　 龙同　刘芳　王玖　王丽玮　 黄大野　 (74)专利代理 机构 北京市一法律师事务所 11654 专利代理师 董佳(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 15/31(2006.01) C12P 7/6463(2022.01) C12P 7/18(2006.01) C12N 3/00(2006.01) A01N 63/28(2020.01) A01P 3/00(2006.01) C09K 17/14(2006.01) C12R 1/465(2006.01) (54)发明名称 一株链霉 菌、 活菌制剂及其 生产方法和用途 (57)摘要 本发明提供了一株链霉菌、 活菌制剂及其生 产方法和用途， 前述浅多色链霉菌， 具有在液体 发酵条件下产生孢子的能力， 且能在NaCl浓度 8％以下的培养基上生长， 所述菌株基本外形特 征为： 菌株在高氏一号培养基上生长良好， 气生 菌丝颜色蚌肉白， 基内菌丝颜色豆汁色， 无可溶 性色素， 孢子丝直或柔曲， 孢子椭圆形； 以及/或 者在ISP‑2培养基上， 菌苔表面白至淡黄绿， 菌落 圆形， 直径3～4mm， 表面馒头形， 偶呈梅花状， 无 可溶性色素。 所述菌株由于具有液态产孢性质能 够在液体条件 下高效率地发酵， 由于菌株具有高 耐盐， 能够应用于盐碱地带， 改善 土壤环境。 权利要求书1页 说明书10页 附图14页 CN 114958695 A 2022.08.30 CN 114958695 A 1.一种浅多色链霉菌， 其具有在液体发酵条件下产生孢子的能力， 且能在NaCl浓度8％ 以下的培 养基上生长 。 2.根据权利要求1所述的链霉菌， 其基本外形特征为： 菌株在高氏一号培养基上生长良 好， 气生菌丝颜色蚌肉白， 基内菌丝颜色豆汁色， 无可溶性色素， 孢子丝直 或柔曲， 孢子椭圆 形； 以及/或者 在ISP‑2培养基上， 菌苔表面白至淡黄绿， 菌落圆形， 直径3～4mm， 表面馒头形， 偶呈梅 花状， 无可溶性色素。 3.一株浅多色链霉菌(Streptomyces  pluricolorescens)， 所述链霉菌为原始编号为 HBERC‑20716， 2022年01月25日保藏于中国典型培养物保藏中心， 保藏编号为CCTCC  NO:M  2022086。 4.一种链霉菌活菌制 剂， 其中包含权利要求1 ‑3中任一项所述链霉菌， 优选所述活菌制 剂为粉剂、 液剂、 颗粒剂、 或片 剂。 5.一种组合物， 所述组合物中含有权利要求1 ‑3中任一项所述的链霉菌或其代谢物。 6.一种权利要求1 ‑3中任一项所述的链霉菌、 权利要求4所述的活菌制 剂、 权利要求5所 述的组合物的生产方法， 其中， 包括通过液体发酵方式生产所述链霉菌的步骤， 以及/或者 进一步包括对发酵 液喷雾干燥或冷冻干燥的步骤。 7.一种AKD ‑2的生产方法， 其中， 通过权利要求1 ‑3中任一项所述的链霉菌或对其进行 基因修饰而得的改性物发酵生产， 优选发酵 方式为液体深层发酵。 8.权利要求1 ‑3所述的链霉菌、 权利要求4所述的活菌制剂、 权利要求5所述的组合物用 于土壤改良、 土壤生态调理剂、 土传性病害的防治、 或杀菌的用途， 所述土传性病害优选茄 褐纹病菌、 终极腐霉。 9.权利要求1 ‑3所述的链霉菌用于提供液体条件下产生孢子的基因、 或提供耐盐基因 的用途。 10.根据权利要求9所述的用途， 通过分子操作手段液体条件下产生孢子的基因或耐盐 基因转移到动物、 植物、 微 生物或宿主细胞。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114958695 A 2一株链霉菌、 活菌制剂及其生产方 法和用途 技术领域 [0001]本发明涉及微 生物领域， 更 具体地涉及生物农药相关领域。 背景技术 [0002]放线菌是一类较为特殊的微生物。 从分类和形态特征上， 放线菌是一类介于细菌 和真菌之间的微生物， 它既有细菌的特性， 如个体小、 属于原核生物 等， 也有真菌的特性， 如 能形成基质菌丝和气生菌丝， 产生分生孢子等。 放线菌产生了数以万计的活性化合物， 其中 约有200种开发成为了医用或农用药物， 对人类作出了巨大贡献。 [0003]放线菌作为土壤肥料， 我国早在上世纪五六十年代就已有过使用， 如 “5406”抗生 菌肥料， 曾在 全国推广应用， 获得了良好的效果。 不过， 由于 当时的历史条件， 抗生菌肥料未 能获得持续的推广应用。 [0004]在土壤生态制剂方面， 国内外开发了众多的土壤微生物肥料或菌剂， 如枯草芽孢 杆菌、 解淀粉芽孢杆菌、 巨大芽孢杆菌、 凝结芽孢杆菌、 蜡状芽孢杆菌、 地衣芽孢杆菌、 假单 胞杆菌等等， 在生产实践中发挥了重要作用。 不过， 总体上说， 我国的土壤微生物菌剂存在 着种类少、 制剂不稳定、 效果 不佳等问题。 [0005]目前， 国内外 获准登记的放线菌菌肥和生物农药菌剂极少， 与放线菌难以培养、 只 能在固体培养基上产生孢子、 生长慢 等特性有关。 需要开 发寻找易于培养、 且有 特殊用途的 放线菌。 发明内容 [0006]本发明是鉴于上述问题而作出的。 本发明的发明人从数以万计的放线菌菌种资源 库中， 通过液体摇瓶发酵筛选， 发现的一个具有良好活性的放线菌菌株， 原始编号为   HBERC‑20716， 系发明人于2007年12月5日从我国河南省灵宝县梨树根际采集的土样中分离 得到， 土样编号S1 157， 分离代号F6D2。 [0007]前述菌株HBERC ‑20716经武汉大学菌种中心鉴定为浅多色链霉菌(Streptomyces pluricolorescens)HBERC ‑20716菌株， 2022年01月25日保藏于 中国典型培养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO:M 2022086。 保藏地址： 武汉大 学。 [0008]该菌株基本特征为： 菌株在高氏一号培养基上生长良好， 气生菌丝颜色蚌肉白， 基 内菌丝颜色豆汁色， 无 可溶性色素， 孢子 丝直或柔曲， 孢子椭圆形。 [0009]在ISP‑2培养基上， 菌苔表面白至淡黄绿， 菌落圆形， 直径3～4mm， 表面馒头形， 偶 呈梅花状。 无可溶性色素。 [0010]经对该菌株进一步研究发现， 其在液体发酵条件下能大量产生孢子。 通常链霉菌 的生活史是孢子萌发， 形成基质菌丝； 基质菌丝大量繁殖； 在静置的液气表面或固气表面形 成气生菌 丝； 气生菌 丝断裂形成分生孢子 。 [0011]由于链霉菌一般只在固态培养基产生孢子 的特性， 现在链霉菌 的工业培养， 一般 采用两相发酵法， 即将 固体培养基上产生的孢子(如斜面或茄子瓶)， 接种到液体培养基中说　明　书 1/10 页 3 CN 114958695 A 3