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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210734326.1 (22)申请日 2022.06.27 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO: M202 2496 202 2.04.26 (71)申请人 华中农业大 学 地址 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山 街1号 (72)发明人 李英俊 丁泓皓 刘洋洋 朱曦 梅余霞 陈振民 梁运祥 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 陈月霞 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/38(2006.01)A23K 10/12(2016.01) A23K 10/37(2016.01) A23K 10/14(2016.01) A23K 10/30(2016.01) A23K 10/33(2016.01) A23K 20/163(2016.01) A23K 20/28(2016.01) A23K 50/80(2016.01) A23K 50/75(2016.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一株高产有机酸的人参芽孢杆菌及其在微 生态制剂中的应用 (57)摘要 本发明公开了一株高产有机酸的人参芽孢 杆菌及其在微生态制剂中的应用, 属于微生态制 剂 技 术 领 域 。所 述 人 参 芽 孢 杆 菌 (Bacillusginsengihumi)BG2204, 其已在中国典 型培养物保藏中心保藏, 保藏编号为CCTCC NO: M2022496, 保藏地址为中国武汉, 武汉大学, 保藏 日期为2022年04月2 6日。 本发明通过对所述人参 芽孢杆菌发酵培养以及产酸能力的优化, 将其制 备成发酵饲料及微生态制剂并验证了在水产养 殖以及肉仔鸡饲养中的效果, 为其开发成微生态 制剂应用于畜牧养殖、 环境治理等领域提供理论 基础。 权利要求书1页 说明书9页 序列表1页 附图4页 CN 115074281 A 2022.09.20 CN 115074281 A 1.一株人参芽孢杆菌(Bacillus ginsengihumi)BG2204, 其特征在于, 其已在中国典型 培养物保藏中心保藏, 保藏编号 为CCTCC NO: M2022496。 2.一种高产乳酸的人参芽孢杆菌的培养方法, 其特征在于, 将权利要求1所述的人参芽 孢杆菌活化后接种于发酵培养基, 35℃ ~40℃培养18h~22h, 加入糖蜜、 玉米浆和碳酸钙继 续培养, 40℃~5 0℃培养20h~24h。 3.根据权利要求2所述的培养方法, 其特征在于, 所述发酵培养基的组分包括蔗糖20g/ L~40g/L, 豆粕5g/L~10g/L, 酵母浸粉5g/L~10g/L, 硫酸锌0.5g/L~ 1g/L, 硫酸镁0.5g/L ~1g/L。 4.一种人参芽孢杆菌的高密度培养方法, 其特征在于, 将权利要求1所述的人参芽孢杆 菌活化培养, 得到的种子液接种于发酵培养液中进 行发酵, 所述 发酵培养液由权利要求3中 所述的发酵培养基和水按照31.75g: 1.5L混合得到, 再采用变速流加的方法分批流加补充 碳源和氮源。 5.根据权利要求4所述的高密度培养方法, 其特征在于, 发酵温度35℃~40℃, 发酵周 期18h~22h。 6.根据权利要求4所述的高密度培养方法, 其特征在于, 所述碳源包括蔗糖; 所述复合 氮源包括质量比为1:1的酵母 浸粉和豆粕。 7.一种菌粉, 其特征在于, 所述菌粉由利用权利要求4 ‑6任一项所述的高密度培养方法 发酵得到的菌液 经过离心干燥得到 。 8.一种发酵饲料, 其特征在于, 以重量份计, 所述饲料的原料包括: 60份含水量为15% 的玉米秸秆, 1份10万U/g的木聚糖酶, 20份发酵饲料发酵 液和50份麸皮水; 其中, 所述发酵饲料发酵液的制备方法包括以下步骤: 糖蜜120g, 玉米粉30g, 麸皮水1L 混合, 煮沸30min后定容至1L, 121℃灭菌30min, 而后接种5%的人参芽孢杆菌液, 37℃, 180rpm/mi n培养22h; 所述麸皮水的质量浓度为10%; 所述发酵饲料由所述原料混匀后装 入密封袋中, 37℃条件下厌氧发酵5d制备获得。 9.一种含有权利要求1所述的人参芽孢杆菌的微生态制剂, 其特征在于, 以重量份计, 包括以下组分: 权利要求8所述的发酵饲料发酵 液2份, 壳寡糖2份, 海藻糖1份, 沸石粉3份。 10.一种如权利要求1所述的人参芽孢杆菌或权利要求9所述的微生态菌剂在水产养殖 和饲喂肉仔鸡中的应用。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115074281 A 2一株高产有机酸 的人参芽孢杆菌及其在微生态制剂中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及 微生态制剂技术领域, 特别是涉及一株高产有机酸的人参芽孢杆菌及 其在微生态制剂中的应用。 背景技术 [0002]微生态制剂(Probiotics, 又称活菌制剂、 微生物菌剂)是利用正常微生物或促进 微生物生长的物质制成的活的微生物制剂。 目前微生态制剂已广泛应用于畜牧养殖、 农业 种植、 医疗保健、 健康食品和环境治理等各 领域中。 [0003]芽孢杆菌和乳酸菌是最常用的微生态制剂菌种类型, 芽孢杆菌具有良好的耐受 性, 能产丰富的酶类; 乳酸菌代谢产生乳酸, 能抑制有害细菌的生长和繁殖, 具有很好的微 生态调节作用。 在畜牧养殖、 健康食品等领域, 他们作为益生菌可以用于生产发酵食品、 饲 料和微生态制剂, 可以提高饲料利用率, 增加食品风味、 改善肠道微生态平衡、 增强宿主免 疫力、 提高宿主生长性能和健康水平。 在环境治理方面, 芽孢杆菌和乳酸菌还能分解有机 质、 调节水质和微 生态平衡。 [0004]谷物、 豆类和油籽含有植酸, 植酸可以结合磷, 使70% ‑80%的磷无法消化。 这限制 了这些作物在饲料中的使用, 特别是在开发用于畜禽集约化养殖 的高浓度日粮方面。 植酸 是六倍醇肌醇的一种 特殊化学衍生物, 它的六个羟基与六个磷酸残基结合。 磷酸残基具有 化学活性, 可以与金属 离子(钙、 钠、 钾、 锌和铜)结合。 植酸也可能与氨基酸残基反应, 使植 物无法利用它们。 因此, 植酸除了作为磷的储存库外, 还结合了很大一部分微量元素、 蛋白 质、 碳水化合物和氨基酸, 将它们转化为复杂的不溶性集合体。 植酸酶(myo ‑inositol exakisporate phosporlase)是一类特殊的磷酸单酯酶, 能够水解植酸释放磷酸。 在猪、 家 禽和其他单胃动物的消化道中, 植酸酶的产量 非常有限。 大多 数微生物植酸 酶是胞内酶, 但 真菌、 肠杆菌属和芽孢杆菌属的细菌能产生分泌型植酸酶, 推动了植酸酶在工农业上 的广 泛应用。 [0005]AnnaA等人于20 15年在人参芽孢杆菌M2.11中发现了植酸酶编码基因, 揭示了该菌 株能够分泌植酸 酶。 但既能够水解植酸, 又能够高产有机酸的芽孢杆菌, 尤其是人参芽孢杆 菌并未见报道。 发明内容 [0006]本发明的目的是提供一株高产有机酸的人参芽孢杆菌及其在微生态制剂中的应 用, 通过对其发酵培养以及产酸能力的优化, 将其制备成发酵饲料及微生态制剂并验证了 在水产养殖以及肉仔鸡饲养中的效果, 为其开发成微生态制剂应用于畜牧养殖、 环境治理 等领域提供理论基础。 [0007]为实现上述目的, 本发明提供了如下 方案: [0008]本发明提供了一株人参芽孢杆菌(Bacillusginsengihumi)BG2204, 其已在中国典 型培养物保藏中心保藏, 保藏编号为CCTCC NO: M2022496, 保藏地址为中国武汉, 武汉大学,说 明 书 1/9 页 3 CN 115074281 A 3
专利 一株高产有机酸的人参芽孢杆菌及其在微生态制剂中的应用
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