(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210598051.3 (22)申请日 2022.05.30 (83)生物保 藏信息 GDMCC No: 62124 2021.12.13 (71)申请人 华南农业大 学 地址 510642 广东省广州市天河区五山路 483号 (72)发明人 张建国　李鑫琴　曹彩霞　樊杨　 田静　王晓亚　 (74)专利代理 机构 广州市华学知识产权代理有 限公司 4 4245 专利代理师 苏运贞 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23K 30/18(2016.01)A23K 10/12(2016.01) A23K 10/30(2016.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一株高产纤维素酶的芽孢杆菌及其应用 (57)摘要 本发明公开了一株高产纤维素酶的芽孢杆 菌及其应用。 该产纤维素酶芽孢杆菌的名称为高 地芽孢杆菌(Bacillus  altitudinis)GST ‑24， 保 藏于位于州市先烈中路100号大院59号楼5楼广 东省微生物研究所的广东省微生物菌种保藏中 心， 保藏号为GDMCC  No:62124， 保藏日期为2021 年12月13日。 该高地芽孢杆菌为革兰氏染色阳性 杆菌， 抗逆性强， 可在pH4.5～9.0生长， 耐盐， 耐 高温， 对水溶性碳水化合物含量低的牧草能显著 提高其青贮发酵品质， 并降低纤维含量。 因此可 在我国各地使用， 特别对于纤维含量高的青贮原 料效果独特， 克服了因水溶性碳水化合物含量低 造成的青贮饲料发酵不佳的问题。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图1页 CN 114921375 A 2022.08.19 CN 114921375 A 1.一株高产纤维素酶的芽孢杆菌， 其特征在于： 名称为高地芽孢杆菌(Bacillus   altitudinis)GST ‑24， 保藏于位于州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所 的广东省微 生物菌种保藏中心， 保藏 号为GDMCC No:62124， 保藏日期为2021年12月13日。 2.权利要求1所述的高产纤维素酶的芽孢杆菌在青贮调制中的应用。 3.根据权利要求2所述的高产纤维素酶的芽孢杆菌在青贮调制中的应用， 其特征在于 包括如下步骤： (1)将待发酵饲料切短； (2)将切短处理后的待发酵饲料和权利要求1所述的高产纤维素酶的芽孢杆菌混合均 匀； (3)将步骤(2)最终得到的饲料脱气、 密封后贮藏。 4.根据权利要求3所述的高产纤维素酶的芽孢杆菌在青贮调制中的应用， 其特征在于： 步骤(1)中所述的切短的规格为切短至2 ～3cm。 5.根据权利要求3所述的高产纤维素酶的芽孢杆菌在青贮调制中的应用， 其特征在于： 步骤(2)中所述的高产纤维素酶的芽孢杆菌的添加量按每kg待发酵饲料配比1.0 ×108个以 上所述的高产纤维酶的芽孢杆菌计算。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114921375 A 2一株高产纤维素酶的 芽孢杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物应用和饲料调制加工技术领域， 具体涉及一株高产纤维素酶的 芽孢杆菌及其应用。 背景技术 [0002]青贮饲料由于气味香甜、 柔软多汁、 营养保存好、 适口性佳等特点， 已成为畜牧业 不可或缺的基础性饲料。 青贮饲料不仅能提高肉、 奶的品质， 而且能充分利用不可直接饲用 的植物材料， 以及减少农产品加工副产物的浪费。 因此， 青贮饲料已被世界各国所重视， 特 别是畜牧业 发达国家。 青贮饲料是依靠原料上附着的乳酸菌在厌氧条件下将原材料中的水 溶性碳水化合物转化 成以乳酸为主的有机酸， 使pH下降， 从而抑制有害菌的生长和繁殖， 使 饲料得以长期保存。 因此， 水溶性碳水化合物和乳酸菌对青贮发酵品质起关键作用。 在生产 实践中， 对于青贮原材料水溶性碳水化合物不 足时， 难以得到优质的青贮饲料。 针对这一问 题， 大多采用添加糖源或产糖物质， 如糖类、 含糖物质多的副产物或纤维素酶等， 但需要人 力物力和成本相对较高。 纤维素分解菌是一种 可产生纤维素酶的微生物， 其中芽孢杆菌具 产纤维素酶的能力。 因此， 在青贮过程中如 有产纤维素酶能力强的芽孢杆菌存在与作用， 可 将纤维成分降解为单糖， 从而为乳酸菌生长提供营养， 同时也可减少青贮饲料中的纤维含 量， 既改善发酵品质， 又提高消化利用率， 将会成为极为有效的青贮饲料 添加剂。 发明内容 [0003]本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足， 提供一株高产纤维素酶的芽 孢杆菌。 [0004]本发明的另一目的在于提供 上述高产纤维素酶的芽孢杆菌在青贮调制中的应用。 [0005]为实现上述目的， 本发明通过以下述 技术方案实现： [0006]一株高产纤维素酶的芽孢杆菌， 名称为高地芽孢杆菌(Bacillus  altitudinis) GST‑24， 保藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏地点为广州市先烈中路100号大院59 号楼 5楼广东省微 生物研究所， 保藏 号为GDMCC No:62124， 保藏日期为2021年12月13日。 [0007]上述高地芽孢杆菌GST ‑24的生物学特性为革兰氏染色阳性杆菌， 抗逆性强， 在pH   4.5～9.0的范 围均可生长， 耐盐(在7％NaCl可旺盛生长)， 耐高温(50℃可生长)， 在厌氧条 件下也可正常生长 。 [0008]本发明通过测定纤维素酶活力筛选出一株来源于土壤的高产纤维素酶高地芽孢 杆菌GST‑24。 提取高地芽孢杆菌GS T‑24全长基因， 然后运用PCR扩增引物2 5F(SEQ ID NO:1) 和1492R(SEQ  ID NO:2)， 扩增出16S  rDNA基因， 在NCBI上对比相关序列， 确定其相似菌种。 最后， 将筛选出 的菌株、 对照菌植物乳杆菌(实验室已有菌株)及其混合分别添加到象草中 进行青贮， 开封后分析青贮发酵品质及纤维含量， 并与对照菌进 行对比， 确认高地芽孢杆菌 GST‑24可显著提高牧草青贮发酵品质， 并降低粗纤维含量。 [0009]上述高产纤维素酶的芽孢杆菌在青贮调制中的应用， 优选包括如下步骤：说　明　书 1/6 页 3 CN 114921375 A 3