(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210679052.0 (22)申请日 2022.06.15 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 202 2413 202 2.04.11 (71)申请人 浙江省生态 环境科学设计研究院 地址 310012 浙江省杭州市西湖区天目山 路109号 (72)发明人 胡正峰　刘帅　黄慧敏　王子洲　 俞韵肖　蔡俊云　梅荣武　王慧荣　 王博　 (74)专利代理 机构 杭州杭诚专利事务所有限公 司 33109 专利代理师 施雨婧 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)C02F 3/34(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C02F 101/38(2006.01) (54)发明名称 一株高效降解N,N-二甲基甲酰胺的耐盐芽 孢杆菌及其应用 (57)摘要 本发明涉及DMF废水处理领域， 公开了一株 高效降解N,N ‑二甲基甲酰胺的耐盐芽孢杆菌及 其应用。 所述芽孢杆菌命名为DM F‑4， 已在2022年 4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心， 保藏 编号为CCTCC  NO： M 2022413， 微生物分类命名为 芽孢杆菌 Bacillus  sp.。 本发明的环 太芽孢杆菌 DMF‑4具有较好的耐盐和耐DM F性能， 并 能在高盐 和高DMF浓度的环境中， 以DMF为唯一碳源和氮 源， 快速生长繁殖并高效降解DMF， 在DMF废水处 理中有较好的应用前景， 而目前尚未发现有其他 环太芽孢杆菌 菌株能够降解DMF。 权利要求书1页 说明书8页 序列表1页 附图4页 CN 115449492 A 2022.12.09 CN 115449492 A 1.一株高效降解N,N ‑二甲基甲酰胺的耐盐芽孢杆菌， 其特征在于， 所述芽孢杆菌命名 为DMF‑4， 已在2022年4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心， 保藏编号为CCTCC  NO： M  2022413， 微生物分类命名为芽孢杆菌 Bacillus sp.。 2.一种高效降解N,N ‑二甲基甲酰胺的耐盐芽孢杆菌的突变体， 其特征在于， 所述突变 体为对如权利要求 1所述芽孢杆菌进 行诱变、 驯化、 基因重组或者经自然突变而获得的突变 体。 3.一种含有如权利要求1所述芽孢杆菌或如权利要求2所述 突变体的菌体培 养物。 4.如权利要求3所述的菌体培养物， 其特征在于， 所述菌体培养物为菌液、 菌剂或活性 污泥。 5.如权利要求1所述芽孢杆菌或如权利要求2所述突变体或如权利要求3或4所述菌体 培养物在N,N ‑二甲基甲酰胺废水处 理中的应用。 6.如权利要求5所述的应用， 其特征在于， 包括以下步骤： 将所述芽孢杆菌或所述突变 体或所述菌体培 养物接种到N,N ‑二甲基甲酰胺废水中， 进行N,N ‑二甲基甲酰胺降解处 理。 7.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 在接种前， 向N,N ‑二甲基甲酰胺废水中加入 碳源。 8.如权利要求7 所述的应用， 其特 征在于， 所述 碳源为葡萄糖和/或醋酸钠。 9.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 在接种前， 将N,N ‑二甲基甲酰胺废水的pH调 节至6.0~7.0， DMF浓度调节至10 00~4000mg/mL， 盐度调节至1~3%。 10.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述N,N ‑二甲基甲酰胺降解处理的温度为 35~40℃。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115449492 A 2一株高效降解N,N ‑二甲基甲酰胺的耐盐芽孢杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及DMF废水处理领域， 尤其涉及一株高效降解N,N ‑二甲基甲酰胺的耐盐 芽孢杆菌及其应用。 背景技术 [0002]N,N‑二甲基甲酰胺(DMF)是一种重要的有机溶解剂和化工原 料， 广泛应用于 染料、 制药、 化工、 农药等各种行业， 不可避免的产生了大量的高盐DMF工业废水。 该类废水的排 放， 不仅会造成环境污染， 还会给人类和 动植物的健康带来威胁。 并且， D MF工业废水具有盐 度高、 成分 复杂、 毒性大、 高C OD、 可生化性差等特点， 已经成为废水处理领域的重难点之一。 因此， 对高盐DMF的去除， 引起了环境保护者的广泛关注。 [0003]高盐DMF废水常见的处理方法有物化法、 化学法和生物法三种。 相比较物化法、 化 学法而言， 生物法具有节约成本、 方便快捷、 无二次污染等诸多优点。 但大量的文献指出， DMF的B/C只有0.0065， 可生化性差， 具有毒性， 两端还有强憎水基， 所以会对微生物生长具 有一定的抑制作用， 会影响微生物对其的降解性能， 尤其当DMF浓度较高时， 抑制效果更加 的明显。 因此， 培育出耐盐、 高效的D MF降解菌， 是提高生物法处理残留DMF效率的核心环节， 对于DMF废水的处 理具有重要意 义。 [0004]环太芽孢杆菌， 又称环状芽孢 杆菌， 拉丁学名为Bacillus  circulans， 是芽孢 杆菌 属中的一个种。 目前已发现环太芽孢杆菌可应用于降解二氯甲烷(如专利CN 100580078中的 菌株WZ‑12)、 生产β ‑半乳糖苷酶(如专利CN109628340A中的菌株QHT ‑310‑M481)、 防治农作 物灰霉病(如专利CN103952352B中的菌株)等方面， 但尚未发现该菌种中有菌株具有降解 DMF的能力。 发明内容 [0005]为了解决上述技术问题， 本 发明提供了一株高效降解N,N ‑二甲基甲酰胺的耐盐芽 孢杆菌及其应用。 该芽孢杆菌能在高盐、 高DMF浓度的环境中， 以DMF为唯一碳源和氮源， 高 效降解DMF， 在DMF废水处 理中具有较好的应用前 景。 [0006]本发明的具体技 术方案为： 第一方面， 本发明提供了一株高效降解N,N ‑二甲基甲酰胺的耐盐芽孢杆菌， 所述 芽孢杆菌命名为DMF ‑4， 已在2022年4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心， 保藏单位地 址为中国.武汉.武汉大学， 保藏编号为CCTCC  NO： M 2022413， 微生物分类命名为芽孢杆菌 Bacillus sp.。 [0007]本发明的菌株DMF ‑4初步鉴定属于芽孢杆菌属(Bacillus)， 经进一步鉴定， 其微生 物分类为环太芽孢杆菌(Bacillus  circulans)。 该菌株对DMF和盐度具有较高的耐受性， 能 够在高盐和高DMF浓度的环境中生长繁殖， 并以DMF为唯一碳源和氮源， 通过将DMF降解成 DMA和甲酸， 再进一 步降解成氨和甲醛， 实现DMF的高效降解。 [0008]经试验， 在起始DMF浓度为4000mg/mL、 盐度为3％的情况下， 菌株DMF ‑4仍能较好地说　明　书 1/8 页 3 CN 115449492 A 3