(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210875568.2 (22)申请日 2022.07.25 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24996 2022.05.30 (71)申请人 四川龙蟒福生科技有限责任公司 地址 620000 四川省眉山市眉山经济开发 区东区 (72)发明人 李玉婷　王敏　熊仁科　景飞江　 左建英　申文熹　杨怀亮　李宏达　 (74)专利代理 机构 成都蓉创智汇知识产权代理 有限公司 51276 专利代理师 赵雷 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/22(2020.01)A01P 7/02(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种bacillus velez ensis菌的专用发酵培 养基及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种bacillus  velezensis菌 的专用发酵培养基， 该bacillus  velezensis菌 的专用发酵培养基包括： 酵母粉2wt％～3wt％， 大豆蛋白粉1wt％～2wt％， 糖蜜2wt％～4wt％， 赤霉素膜残液0.5wt％ ‑1wt％， 磷酸二氢钾 0.1wt％～0.4wt％， 碳酸钙0.1wt％～0.4wt％， 七水硫酸镁0.1wt％～0.2wt％， 氯化钠0.02wt％ ～0.05wt％， 泡敌0.06wt％ ‑0.10wt％， 余量为 水。 本发明专用发酵培养基制备的发酵液稀释后 作为活性成分杀螨， 杀螨效果 好。 权利要求书1页 说明书6页 CN 115161239 A 2022.10.11 CN 115161239 A 1.一种bacillus  velezensis菌的专用发酵培养基， 其特征在于， 该bacillus   velezensis菌的专用发酵培 养基包括： 酵母粉2wt％～3wt％， 大豆蛋白粉1wt％～2wt％， 糖蜜2wt％～4wt％， 赤霉素膜残液 0.5wt％‑1wt％， 磷酸二氢钾0.1wt％～0.4wt％， 碳酸钙0.1wt％～0.4wt％， 七水硫酸镁 0.1wt％～0.2wt％， 氯化钠0.02wt％～0.0 5wt％， 泡敌0.0 6wt％‑0.10wt％， 余 量为水； 该bacillus  velezensis菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中， 保 藏编号为CGMCC No.24996。 2.根据权利要求1所述的bacillus  velezensis菌的专用发酵培养基， 其特征在于， 所 述酵母粉3wt％， 大豆蛋白粉1wt％， 糖蜜3wt％， 赤霉素膜残液0.5wt％， 磷酸二氢钾 0.1wt％， 碳酸钙0.15wt％， 七水硫酸镁0.15wt％， 氯化钠0.02wt％， 泡敌0.1wt％， 余量为 水。 3.根据权利要求1所述的bacillus  velezensis菌的专用发酵培养基， 其特征在于， 所 述酵母粉2wt％， 大豆蛋白粉1.5wt％， 糖蜜2wt％， 赤霉素膜残液0.5wt％， 磷酸二氢钾 0.2wt％， 碳酸钙0.3wt％， 七水硫酸镁0.15wt％， 氯化钠0.03wt％， 泡敌0.07wt％， 余量为 水。 4.根据权利要求1所述的bacillus  velezensis菌的专用发酵培养基， 其特征在于， 所 述酵母粉2wt％， 大豆蛋白粉2wt％， 糖蜜4wt％， 赤霉素膜残液0.5wt％， 磷酸二氢钾 0.15wt％， 碳酸钙0.2wt％， 七水硫酸镁0.1wt％， 氯化钠0.02wt％， 泡敌0.06wt％， 余量为 水。 5.根据权利要求1 ‑4任一所述的bacillus  velezensis菌的专用发酵培养基， 其特征在 于， 所述赤霉素膜 残液通过以下 方法制备： ①制取赤霉素发酵 液； ②将①的赤霉素发酵 液经膜过滤， 得清液和赤霉素膜 残液。 6.一种baci llus velezensis菌的发酵 方法， 包括以下步骤： S1:取菌种， 该菌种为保藏编号 为CGMCC No.24996， 名称为baci llus velezensis； S2:菌种划线于 培养基固体平板上进行活化， 培 养后， 挑取 单菌落； S3:将挑取的单菌落接种于摇瓶培 养基中培 养后转接入小试发酵 罐； S4:小试发酵 罐培养16h后转接入发酵 罐； S5:在发酵罐培养后下罐， 发酵罐培养中的发酵培养基为权利要求1 ‑4任一所述的 bacillus velezensis菌的专用发酵培 养基； S6:得发酵 液。 7.一种发酵液， 其特征在于， 所述发酵液由权利要求6所述的bacillus  velezensis菌 的发酵方法制备而成。 8.一种杀螨剂， 该杀螨剂包含作为活性成分的发酵液， 其特征在于， 该发酵液为权利要 求7所述的发酵 液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115161239 A 2一种bacil lus velezensis菌的专用发酵培养基 及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及农业领域， 特别涉及一种bacillus  velezensis菌的专用发酵培养基、 一种baci llus velezensis菌的发酵 方法、 一种发酵 液及一种杀螨剂。 背景技术 [0002]当前农业有害生物防治中， 植食性螨类是世界公认的最难防的有害生物类群之 一， 其主要类别为叶螨， 俗称红蜘蛛， 属于节肢动物门(Arthropoda)， 蛛形纲(Arachnida)， 蜱螨亚纲(A cari)， 真螨目(Acariformes)， 叶螨总科(Tetranychoidea)。 叶螨是一种世界性 害螨， 因其个体小、 世代短、 发育周期短、 繁殖快、 适应性强、 突变率高， 极易产生抗药性， 防 治极为困难， 造成农作 物螨害愈演 愈烈的“小虫成大灾 ”局势， 使农业生产遭受极大损失， 影 响到农业增产和农民增收， 成为目前农业 生产上一个重要的亟 待解决的大问题。 [0003]化学防治依然是我国园艺作物生产中治理螨害的主要对策， 但是杀螨剂的滥用和 误用极易导致叶螨抗药性的产生， 极大降低了化学农药的田间防治效果。 2008年统计显示 叶螨对目前药剂中的92中活性成分产生了抗药性， 包括神经毒 素类杀虫剂如 有机憐酸酯类 和拟除虫菊酯类， 选择性杀螨剂如线粒体电子传递抑制剂和有机锡类等。 叶螨抗药性情况 比其它田间害 虫如小菜蛾、 蚜虫等要严重许多， 因而有 科学人员将叶螨视为最耐药的物种。 其中二斑叶螨(Tetranychus  Urticae Koch)无论是在温室 蔬菜上还是露天的果树上， 其抗 药性要明显高于其它螨类。 如二斑叶螨对阿维菌素、 三氯杀螨醇和克螨特等的抗性倍数是 其他螨类的10倍以上。 二斑叶螨的全基因组DNA研究发现， 其体内的解毒基因是其它动物的 3倍之多， 含有一个抗药性基因家族的39个基因， 而昆虫和脊椎动物只有14个。 因此， 开展以 生物防治为主 要手段的防治策略是实现可持续控制的重要途径。 [0004]在害螨的各种防治手段中， 生物防治一直是一个研究的重点和热点， 在害螨防治 策略中扮演重要角色。 目前在害螨天敌、 植物源农药和叶螨病原菌等方面的生防研究均取 得了一些进展和成果。 叶螨的天敌种类繁多， 植绥螨和食螨瓢虫是研究和应用较多的两种， 尤其是植绥螨在许多国家已工厂化大规模生产。 荷 兰有60％的温室用智利小植绥螨防治黄 瓜上的二斑叶螨， 而英国、 芬兰、 瑞典和丹麦已超过70％。 福建省农业科学院植物保护所初 步建立了我国第一个捕食螨大量繁殖基地， 在全国推广应用面积达13.3万公顷。 但天敌利 用因存在不易建立优势种群、 维持天敌种群的费用昂贵， 不能和 化学防治一起综合防治等 缺点而在其应用和发展 上受到限制。 植物性农药有效成分安全、 低毒， 大多是一类具有杀螨 活性的植物次生代谢物质， 已经报道进 行过杀螨活性测定的植物接近200余种， 但由于活性 低活性成分不明确， 具有开发利用价 值的寥寥无几。 [0005]节肢动物体内广泛分布着各种胞质遗传的细胞内共生菌， 分为初生共生菌 (primary  symbiont)和次生共生菌(secondary  symbiont)。 初生共生菌是宿主生存必需 的， 与寄主协同进化， 广泛分布于寄主的组织细胞内， 主要通过母系垂直传播， 同时还能进 行水平传播。 次生共生菌不是寄主存活所必需的， 对寄主可能有益也可能有害， 有害者可称 为叶螨病原菌。 叶螨病原菌与叶螨之间经过漫长的进化过程， 在它们之间形成了相互依存说　明　书 1/6 页 3 CN 115161239 A 3