(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210846470.4 (22)申请日 2022.07.19 (83)生物保 藏信息 KACC 22161 2021.07.15 (71)申请人 山东大湖新材 料有限公司 地址 250000 山东省济南市天桥区桑梓店 舜兴路988号济南大学科技园2号楼 东 单元408室 (72)发明人 贾保磊　邵明伟　阮文婷　田差沃　 (74)专利代理 机构 北京瑞盛铭杰知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11617 专利代理师 李绩 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C02F 1/52(2006.01)C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种Parasphingor habdu菌株制备生物絮凝 剂的方法 (57)摘要 本发明涉及一种Parasphingor habdu菌株制 备生物絮凝剂的方法， 涉及微生物及生物废水处 理 领 域 。本 发 明 提 供 了 一 种 新 型 Parasphingorhabdu  sp.M268菌株， 通过醇沉、 冻 干的实验方式制备获取絮凝剂。 其制备步骤是： 将所述M268菌株， 通过微生物发酵培养， 在最适 温度30℃、 pH  7.0、 0.5％海盐浓度的培养条件下 培养24小时； 培养结束之后将乙醇加入发酵液中 进行分层沉淀， 静置后离心得到絮凝剂粗制产 品。 本发明的生物絮凝剂可替代目前众多化学絮 凝剂的使用， 且 该产品较于化学絮凝剂并不产生 二次环境污染、 且絮凝过程pH(7 ‑11)和盐浓度 (0‑5.5％)适应性范围及广， 可适应多种复杂的 污水处理场景。 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 CN 115232767 A 2022.10.25 CN 115232767 A 1.一种Parasphingorhabdu菌株M268， 其特征在于， 保藏中心登记入册编号为KACC   22161。 2.一种Parasphingorhabdu微生物絮凝剂， 其特征在于， 制备原料权利要求1所述菌株 KACC 22161。 3.权利要求2所述微生物絮凝剂的制备方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 于发酵培养 基中接种所述菌株M268的活化种子液， 摇床 培养后， 将 培养液上清与无水乙醇混合过夜， 离 心分离沉淀， 得絮凝剂粗制品； 所述发酵培养基包括以下浓度的组分： 氯化镁8.8g/L， 氟化钠2.4mg/L， 蛋白胨5.0g/L， Na2SO3 3.24g/L， CaCl2 1.8g/L， 酵母提取物1.0g， 氯化钾0.55g/L， 碳酸氢钠0.16g/L， 柠檬 酸铁0.1g/L， 溴化钾0.08g/L， 二氯化锶0.03g/L， 硼酸三月桂酯0.02g， 磷酸氢二钠8.0mg/L， 硅酸钠4.0mg/L， 二氯化锶0.0 3g/L和硝酸铵1.6mg/L， pH7.0 ±0.3。 4.根据权利要求3所述制 备方法， 其特征在于， 在温度30℃， pH  7.0， 0.5％海盐浓度培 养条件下进行摇床培 养， 所述摇床培 养的时间为24～3 6小时。 5.根据权利要求3所述制备方法， 其特征在于， 对摇床培养后得到的培养液进行离心 处 理， 所述离心处 理的转速为75 00rpm， 离心时间为3 0min。 6.根据权利要求3所述制备方法， 其特征在于， 所述离心分离沉淀， 包括经90500rpm离 心15分钟。 7.权利要求2所述微生物絮凝剂在处理污水废水中的应用， 所述污水废水的盐浓度为 0‑5.5％。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115232767 A 2一种Parasphingor habdu菌株制备生物絮凝剂的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及一种P arasphingorhabdu菌株制备生物絮凝剂的方法， 涉及微生物及 生物废水处 理领域。 背景技术 [0002]絮凝剂通过多聚体 理论起作用， 主要是带有电荷的基团和一些带有难以分离的电 荷的粒子或水中的粒子靠得很近， 降低了它们的电势， 使它们变得不稳定。 它们利用其聚合 特性浓缩颗粒， 并通过物理或化学 方法将其分离 。 [0003]常见的有机絮凝剂主要包括合成有机高分子絮凝剂、 天然有机高分子絮凝剂和微 生物絮凝剂。 目前广泛应用于污水处理中的絮凝剂主要有以氯化铝、 聚合氯化铝为代表的 无机高分子絮凝剂和以聚丙烯酰胺为代表的有机高分子絮凝剂 。 由于无机絮凝剂在使用过 程中会对生态环境和生物体系造成严重污染和破坏， 同时对人类健康也会造成一定的危 害； 虽然大部分有机高分子絮凝剂不具有毒性， 但是其价格成本高昂而且处理工业污水后 残留下的物质易造成二次污染。 [0004]目前， 生物絮凝剂因其自身具有高效， 廉价， 无毒， 易降解且成本低廉等优点， 成为 当下研究热点。 微生物絮凝剂由具有微生物絮凝活性的代谢产物组成， 这些生物大分子具 有生物降解性， 无害， 绿色无污染等特点。 生物絮凝剂主要由糖蛋白， 多糖， 蛋白质和DNA采 用微生物技术组合而成， 一般由微生物发酵和有机溶剂提取而成， 是一种 无毒高效的新型 水处理剂， 无二次污染。 目前， 未见有关本发明所用Parasphingorhabdu菌 (Parasphingorhabdu  sp.M268)生产微生物絮凝剂的相关报道， 且在专利 检索中未发现微 生物絮凝剂在低盐浓度至高盐浓度(0 ‑5.5％NaCl)情况 下使用的专利。 发明内容 [0005]本发明的目的旨在制备一种Parasphingorhabdu菌培养后的菌液醇沉冻干后具备 污水处理絮凝剂功效的方法， 本发 明中的絮凝剂成本低， 适用范围广泛， 在使用过程中不会 产生二次污染， 制备简单， 易于推广。 。 [0006]Parasphingorhabdu菌(Parasphingorhabdu  sp.M268)是革兰氏染色阴性， 兼性需 氧并且具有单个 极性鞭毛运动。 菌落呈淡乳脂状， 圆形， 长1.7 ‑1.9 μm， 宽0.7 ‑0.8 μm左右。 过 氧化氢酶和氧化酶阳性。 生长发生在4 ‑37℃(最佳， 30℃)， pH  6.0–11.0(最佳， 8.0)， 海洋介 质百分比为0 ‑7％(w/v)(最佳3％).水解 酪氨酸， 七叶皂苷， 淀粉， 酪蛋白和吐温80但 不水解 吐温20。 碱性磷酸酶， 酯酶(C4)， 酯酶脂肪酶(C8)， 亮氨酸芳基酰胺酶， 缬氨酸芳基酰胺酶， crystine芳基酰胺酶， 胰蛋白酶， α ‑胰凝乳蛋白酶， 酸性磷酸 酶， 萘酚作为双磷酸水解 酶， 精 氨酸二水解酶和脲酶活性均为阳性。 磷脂， 磷脂酰乙醇胺， 未鉴定的氨基磷脂作为的主要极 性脂质。 主要的细胞脂肪酸是C10:0， C16:0， C12:0 3‑OH和总和特征3(C16:1ω7c/C16:1ω6c和/或 C16:1ω6c/C16:1ω7c)。 [0007]本发明通过以下技 术方案实现上述目的：说　明　书 1/3 页 3 CN 115232767 A 3