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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210635597.1 (22)申请日 2022.06.06 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO: M 202 2581 202 2.05.10 (71)申请人 江苏三仪生物工程有限公司 地址 221300 江苏省徐州市邳州市高新区 富民路2号 申请人 大连三仪动物药品有限公司 江苏国托检测有限公司 辽宁国托检测有限公司 (72)发明人 江国托 刘秋晨 刘星 刘艳 单春乔 李娟 王岩 于洪敏 翟宏旭 (74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 刘二艳 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 15/01(2006.01) C12N 13/00(2006.01) A23K 10/18(2016.01) C12R 1/145(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种丁酸梭菌、 其发酵物、 包含其的菌剂及 动物饲料 添加剂 (57)摘要 本发明涉及一种丁酸梭菌、 其发酵物、 包含 其的菌剂及动物饲料添加剂, 所述丁酸梭菌命名 为丁酸梭菌(Clostridium butyricum)DS20菌 株, 保藏单位为中国典型培养物保藏中心, 保藏 编号为CCTCC NO: M 2022581, 保藏日期为2022年 5月10日, 保藏地址为中国, 武汉, 武汉大学。 所述 丁酸梭菌产酸量高, 在肠液中有较好的生长适应 能力及发酵产酸能力, 具有优异的耐酸性、 耐胆 盐性和耐热能力, 将所述丁酸梭菌用作动物饲料 添加剂, 可显著改善动物肠道 健康并提高饲料利 用率。 权利要求书2页 说明书9页 序列表1页 CN 114874949 A 2022.08.09 CN 114874949 A 1.一种丁酸梭菌, 其特征在于, 所述丁酸梭菌命名为丁酸梭菌(Clostridium butyricum)DS20菌株, 保藏单位为中国典型培养物保藏中心, 保藏编号为CCTCC NO: M 2022581, 保藏日期为202 2年5月10日, 保藏 地址为中国, 武汉, 武汉大 学。 2.一种丁酸梭菌发酵物, 其特征在于, 所述丁酸梭菌发酵物由包括如下步骤的方法制 备得到: (1)培养权利要求1所述的丁 酸梭菌, 得到种子液; (2)将种子液接种于发酵培养基 中进行发酵培养, 得发酵液, 离心, 收集菌泥, 即得所述 丁酸梭菌发酵物。 3.如权利要求2所述的丁 酸梭菌发酵物, 其特 征在于, 步骤(1)所述培 养为厌氧培 养; 优选地, 步骤(1)所述培 养的温度为3 5‑39℃, 所述培 养的时间为16 ‑32h; 优选地, 步骤(1)所述培 养是指用RC M培养基进行培 养。 4.如权利要求2或3所述的丁酸梭菌发酵物, 其特征在于, 步骤(2)所述发酵培养为厌氧 培养; 优选地, 步骤(2)所述发酵培 养的温度为3 5‑39℃, 所述发酵培 养的时间为16 ‑32h; 优选地, 步骤(2)所述发酵培养基中包含葡萄糖、 蛋白胨、 酵母浸膏、 牛肉浸膏、 玉米淀 粉、 乙酸钠、 碳 酸钙、 磷酸氢二钾或硫酸镁中的任意 一种或至少两种的组合; 优选地, 步骤(2)所述发酵培养基中的组分以质量百分含量计包括葡萄糖0.5% ‑ 2.5%、 蛋白胨0.2% ‑1.6%、 酵母浸膏1% ‑5%、 牛肉浸膏1% ‑5%、 玉米淀粉0.2% ‑2.5%、 乙酸钠0.1% ‑1%、 碳酸钙0.1% ‑0.8%、 磷酸氢二钾0.02% ‑0.3%和硫酸镁0.01% ‑0.2%, 余量为水; 优选地, 在步骤(2)中, 当发酵培 养9‑11h时, 补加葡萄糖; 优选地, 葡萄糖的补加量 为发酵培 养基中初始 葡萄糖质量的0.8 ‑1.2倍; 优选地, 在步骤(2)中, 当发酵培 养11‑13h时, 补加牛肉浸膏和酵母 浸膏; 优选地, 牛肉浸膏的补加量为发酵培养基中初始牛肉浸膏质量的0.4 ‑0.8倍, 酵母浸膏 的补加量 为发酵培 养基中初始酵母 浸膏质量的0.1 ‑0.4倍; 优选地, 步骤(2)所述发酵培养后还包括将发酵液升温至65 ‑75℃, 并维持5 ‑15min, 以 杀灭非芽孢形态菌体, 然后冷却至15 ‑40℃。 5.一种丁酸梭菌菌剂, 其特征在于, 所述丁酸梭菌菌剂的制备原料包括如权利要求1所 述的丁酸梭菌和/或如权利要求2 ‑4中任一项所述的丁 酸梭菌发酵物, 还 包括辅料。 6.如权利要求5所述的丁酸梭菌菌剂, 其特征在于, 所述辅料包括麦芽糊精和/或玉米 淀粉; 优选地, 所述麦 芽糊精与玉米淀粉的质量比为1:(1 ‑4)。 7.如权利要求5或6所述的丁酸梭菌菌剂, 其特征在于, 所述丁酸梭菌菌剂由包括如下 步骤的方法制备 得到: 将如权利要求1所述的丁酸梭菌和/或如权利要求2 ‑4中任一项所述的丁酸梭菌发酵物 与辅料混合, 喷雾 干燥, 即得; 优选地, 所述喷雾 干燥中, 进风温度为13 5‑145℃; 优选地, 所述喷雾 干燥中, 进料流 量为13.25‑15.35mL/min。 8.一种复合菌剂, 其特征在于, 所述复合菌剂包括如权利要求1所述的丁酸梭菌、 如权权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 114874949 A 2利要求2‑4中任一项所述的丁酸梭菌发酵物或如权利要求5 ‑7中任一项所述的丁酸梭菌菌 剂中的任意 一种或至少两种的组合; 所述复合菌剂还包括其他菌株及其发酵物, 所述其他菌株包括粪肠球菌、 植物乳杆菌、 凝结芽孢杆菌或枯 草芽孢杆菌中的任意 一种或至少两种的组合; 优选地, 所述 其他菌株包括粪肠球菌ATC C 29212和植物乳杆菌 CICC 6009; 优选地, 在所述复合菌剂中, 所述丁酸梭菌、 粪肠球菌ATCC 29212与植物乳杆菌CICC 6009的活菌数之比为(3 ‑5):(1‑3):1。 9.一种动物饲料添加剂, 其特征在于, 所述动物饲 料添加剂包括如权利要求1所述的丁 酸梭菌、 如权利要求2 ‑4中任一项所述的丁酸梭菌发酵物、 如权利要求5 ‑7中任一项所述的 丁酸梭菌菌剂或如权利要求8所述的复合菌剂中的任意 一种或至少两种的组合。 10.如权利要求9所述的动物饲料 添加剂, 其特 征在于, 所述动物包括畜禽类动物。权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 114874949 A 3
专利 一种丁酸梭菌、其发酵物、包含其的菌剂及动物饲料添加剂
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