(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210611974.8 (22)申请日 2022.06.01 (71)申请人 浙江省农业科 学院 地址 310021 浙江省杭州市石桥路198号 (72)发明人 肖英平　马灵燕　吕文涛　汪雯　 肖兴宁　杨华　 (74)专利代理 机构 成都海成知识产权代理事务 所(普通合伙) 51357 专利代理师 庞启成 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12M 1/38(2006.01) C12M 1/36(2006.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/02(2006.01)C12M 1/00(2006.01) C12R 1/145(2006.01) (54)发明名称 一种丁酸梭菌高密度培 养装置与方法 (57)摘要 本发明涉及微生物发酵领域， 特别是涉及一 种丁酸梭菌高密度培养装置与方法， 所述丁酸梭 菌高密度培养装置， 包括一级罐体、 二级罐体和 设置在一级罐体和二级罐体 之间的转移装置， 一 级罐体用于盛放接种有丁酸梭菌的培养液， 并提 供无氧环境使接种有丁酸梭菌的培养液发酵形 成发酵混合液， 转移装置用于分层抽取一级罐体 内的发酵混合液， 并在调节抽取的发酵混合液的 PH值后， 将其移至二级罐体中继续发酵。 本发明 的一种丁酸梭菌高密度培养装置， 避免了碱度调 节时， 对相邻层级发酵混合液的扰动， 保证了不 同分层的丁酸梭菌能够在酸碱度调和时更好的 存活， 同时也保证调节后丁酸梭菌的生长环境适 宜。 从而再进一步提高了丁酸伸梭菌的发酵密 度。 权利要求书2页 说明书10页 附图3页 CN 114921376 A 2022.08.19 CN 114921376 A 1.一种丁 酸梭菌高密度培 养方法， 其特 征在于， 包括下述 步骤： A、 丁酸梭菌接种： 在发酵罐中装入接种有丁酸梭菌的培养液， 进行无氧发酵得到发酵 混合液； B、 PH值测定： 测定所述步骤A中制得的发酵混合液在发酵罐中由顶部至底部不同部位 的PH值， 并根据测得的PH值对发酵 罐中的发酵混合液进行划层； C、 调节发酵罐中发酵混合液的PH值： 根据所述步骤B中划定的发酵混合液的层次， 在丁 酸梭菌能够承受的PH值变化幅度范围内， 调节发酵 罐内不同层级的发酵混合液的酸碱度； 根据发酵的时间， 在无 氧条件下重复所述 步骤B和所述 步骤C， 完成丁 酸梭菌的培 养。 2.根据权利要求1所述的丁酸梭菌高密度培养方法， 其特征在于， 在所述步骤B中每层 发酵混合液P H值的测定， 至少选取靠发酵罐侧壁和靠发酵罐中心两个部位的发酵混合液的 PH平均值确定 。 3.根据权利要求1所述的丁酸梭菌高密度培养方法， 其特征在于， 所述步骤C中完成发 酵罐内各层级的发酵混合液PH值的调节后， 拌合发酵罐内的发酵混合液， 使发酵罐内不同 层级的发酵混合液相互混合。 4.根据权利要求3所述的丁酸梭菌 高密度培养方法， 其特征在于， 拌合发酵罐内的发酵 混合液时， 包括 一级拌合和二级拌合； 一级拌合： 先依次拌合相邻两个层级或者相邻三个层级的发酵混合液， 使发酵混合液 的分层数至少减少一半； 二级拌合： 由发酵 罐的顶部向底部搅拌， 使发酵 罐内不同层级的发酵混合液完全混合。 5.根据权利要求3所述的丁酸梭菌 高密度培养方法， 其特征在于， 一级拌合 时在发酵罐 底部由两个层级单独划分为 一组进行拌合。 6.根据权利要求3所述的丁酸梭菌高密度培养方法， 其特征在于， 在进行二级拌合时， 相邻层级的发酵混合液拌合的时间 间隔为a， 且a≥3 0min。 7.一种丁酸梭菌 高密度培养装置， 其特征在于， 包括一级罐体、 二级罐体和设置在所述 一级罐体和所述二级 罐体之间的转移装置， 所述一级 罐体用于盛放接种有丁酸梭菌的培养 液， 并提供无氧环境使接种有丁酸梭菌的培养液发酵形成发酵混合液， 所述转移装置用于 分层抽取所述一级罐体内的发酵混合液， 并在调节抽取的发酵混合液 的PH值后， 将其移至 所述二级罐体中继续发酵。 8.根据权利要求7所述的丁酸梭菌 高密度培养装置， 其特征在于， 所述转移装置从所述 一级罐体的顶部 至底部依次抽取其内部盛放的发酵混合液。 9.根据权利要求8所述的丁酸梭菌 高密度培养装置， 其特征在于， 在所述二级罐体内还 设置有搅拌装置， 所述搅拌装置包括电机、 驱动控制器、 传动轴和搅拌叶片， 所述电机安装 在所述二级罐体的外部， 所述传动轴一端与所述电机连接另一端与所述搅拌叶片连接， 传 递所述电机的动力驱动所述搅 拌叶片在所述二级 罐体内旋转， 所述驱动控制器用于控制所 述搅拌叶片呈周期转动， 且使所述搅拌叶片在一个周期内转动的角度≤180 °。 10.根据权利要求9所述的丁酸梭菌高密度培养装置， 其特征在于， 在所述搅拌叶片上 还设置有加热部件， 所述加热部件用于提升所述二级罐体内的发酵混合液 的温度； 所述加 热部件为若干加热片， 所述加热片布满 所述搅拌叶片的表面； 且在所述搅拌叶片的一面上， 所述加热片由所述搅拌叶片的表面向所述传动轴方向延伸， 与所述搅 拌叶片的表面形成小权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114921376 A 2于90°的锐角； 另一面上， 所述加热片由所述搅拌叶片的表面向其端部方向延伸， 与所述搅 拌叶片的表面形成小于90 °的锐角。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114921376 A 3