(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210764738.X (22)申请日 2022.06.29 (71)申请人 中国农业大 学 地址 100193 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 王磊　张子薇　杜显元　李丹丹　 李嘉幸　符杰莹　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 黄爽 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) B09C 1/10(2006.01) C12R 1/065(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种互生 微生物组合及其应用 (57)摘要 本发明涉及微生物 技术领域， 尤其涉及一种 互生微生物组合及其应用。 本发 明分离得到一种 可降解石油的寡氮菌E5， 其属于潘多拉菌属， 本 身具备一定降解石油的能力。 本发 明进一步提供 潘多拉菌E5和固氮菌PJ  12的组合， 将这两种菌 株组合后， 可以有效提高潘多拉菌E5降解石油的 能力， 具体在降解石油中的各类烷烃和芳香烃的 效率上显著提高。 本发明提供的潘多拉菌E5和固 氮菌PJ 12组合依靠两者间的协同基质可以实现 氮素需求的供给， 形成持续稳定的碳氮交互微环 境， 同时还进一步提高了石油降解效率， 在针对 石油污染的微 生物修复领域具有重要意 义。 权利要求书1页 说明书6页 附图2页 CN 115074284 A 2022.09.20 CN 115074284 A 1.一种互生 微生物组合， 其特 征在于， 包括潘多拉菌 E5和固氮菌PJ 12。 2.根据权利要求1所述的互生微生物组合， 其特征在于， 所述固氮菌PJ12的保藏编号 为： CGMCC No.14659。 3.根据权利要求或2所述的互生微生物组合， 其特征在于， 所述互生微生物组合中， 所 述潘多拉菌 E5和所述固氮菌PJ  12的菌落数比为(10 00～3000)： (1～3)。 4.根据权利要求3所述的互生微生物组合， 其特征在于， 所述互生微生物组合中， 所述 潘多拉菌E5的总活菌数为107～108cfu/g； 和/或， 所述固氮菌PJ12的总活菌数为105～ 106cfu/g。 5.权利要求1 ‑4任一项所述的互生 微生物组合在促进固氮菌生长中的应用。 6.权利要求1 ‑4任一项所述的互生 微生物组合在降解石油中的应用。 7.权利要求1 ‑4任一项所述的互生微生物组合在降解C17‑C36的长链烷烃和芳香烃中的 应用。 8.权利要求1 ‑4任一项所述的互生 微生物组合在石油污染土壤的修复中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115074284 A 2一种互生微生物组合及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及微 生物技术领域， 尤其涉及一种互生 微生物组合及其应用。 背景技术 [0002]石油污染是指石油开采、 运输、 装卸、 加工和使用过程中， 由于泄漏和排放石油引 起的污染。 例如输油管线腐蚀渗漏污染土壤和地下水源， 不仅造成土壤盐碱化、 毒化， 导致 土壤破坏和废毁， 而且其有毒物还可能通过农作物尤其是地下水进入食物链系统， 造成更 大的危害。 而对于石油污染的区域， 由于石油烃大量进入环境造成的C/N 失衡对于污染区域 的生物修复 效率产生较大阻碍 。 [0003]现有技术中， 寻找外源氮肥的天然替代者， 是生物修复的研究热点。 微生物固氮是 一种广泛应用的生物技术， 可作为无机氮改良的替代方法， 并克服修复过程中的营养缺乏。 将固氮菌引入污染土壤后， 通过生物固氮作用为石油降解微生物提供所需的氮， 是补充氮 素的重要候选者。 固氮菌的这一特性使得此微生物群落适合于原位石油生物修复， 而不需 要补充外源氮素， 是修复石油污染环 境的优势菌种资源。 但是固氮菌虽然 可以固氮， 其主要 作用还是在于满足自身的生长需求， 因此应用仍然受限。 发明内容 [0004]为了解决现有技术的技术问题， 本发明提供一种互生微生物组合及其应用， 通过 组合潘多拉菌 E5和固氮菌PJ 12， 可以有效修复石油污染环境。 [0005]第一方面， 本发明提供一种互生 微生物组合， 包括潘多拉菌 E5和固氮菌PJ 12。 [0006]潘多拉菌E5公开于“李方玲,张雅坤,梁立宝,王小通,杜显元,王磊.石油污 染环境 中固氮和寡氮营养细菌的分离鉴定及其特性.微生物学报,2022,62(2):661 ‑671。 是其中表 3涉及的Pandoraea  sp.E5。 [0007]固氮菌PJ 12保藏编号 为CGMCC No.14659， 公开于专利CN2018102 987868。 [0008]本发明将在石油污染条件下具有高效固氮能力的固氮菌Azotobacter  sp.PJ 12 和能适应石油污染低氮环境的寡氮菌Pandor aea sp.E5进行复配， 构建和培育适应贫氮环 境的高效降解菌株组合， 两种菌株相互协作， 有效提高了固氮酶活性和降解石油的能力， 在 降解石油污染物方面， 具有良好、 积极的应用前 景。 [0009]进一步地， 所述潘多拉菌E5和所述固氮菌PJ12的菌落数比为(1000～3000)： (1～ 3)。 [0010]进一步地， 所述互生微生物组合中， 所述潘多拉菌E5的总活菌数为107～108cfu/g； 所述固氮菌PJ  12的总活菌数为105～106cfu/g。 [0011]本发明进一 步提供所述互生 微生物组合在促进固氮菌生长中的应用。 [0012]本发明进一 步提供所述互生 微生物组合在降解石油中的应用。 [0013]本发明进一步提供所述互生微生物组合在降解C17‑C36的长链烷烃和芳香烃中的 应用。说　明　书 1/6 页 3 CN 115074284 A 3