(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210730426.7 (22)申请日 2022.06.24 (71)申请人 深圳市长隆科技有限公司 地址 518116 广东省深圳市龙岗区坪 地街 道教育北路82号 (72)发明人 马鑫　董红红　李希　曹轶乐　 蔡振山　 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 9/54(2006.01) C12P 21/06(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌 CYSZG-3及其应用 (57)摘要 一种产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaci ens)CYSZG ‑3及其应 用， 本发明属于生物工程领域， 为克服目前酶制 剂领域的产酶菌种种类的不足， 本发 明提供一种 解 淀 粉 芽 孢 杆 菌 ( B a c i l l u s   amyloliquefaciens)CYSZG ‑3， 该解淀粉芽孢杆 菌(Bacillus  amyloliquefac iens)CYSZG ‑3可通 过发酵工艺生产中性蛋白酶， 直接发酵液的酶产 量约为270U/mL， 无生物安全 风险。 一种中性蛋白 酶生产菌种(解淀粉芽孢杆菌， Bacillus   amyloliquefaciens)及其应用， 本发明属于酶制 剂生产领域， 为了克服中性蛋白酶生产领域菌种 种质资源的短缺， 降低中性蛋白酶的生产成本， 本发明提供一种中性蛋白酶生产菌种。 通过控制 培养基配方和发酵条件， 可以使用该菌种生产中 性蛋白酶， 直接发酵液的酶产量 为270U/mL。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图4页 CN 115094000 A 2022.09.23 CN 115094000 A 1.一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens)CYSZG ‑3的应用， 其特征在于， 所述的解淀粉芽孢杆菌(Baci llus amyloliquefaciens)C YSZG‑3用于生产中性蛋白酶。 2.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens)CYSZG ‑3的应 用， 其特征在于， 所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefacien s)CYSZG‑3用于生产 中性蛋白酶， 应用于蛋白质和多肽类物质的在中性以及弱碱性条件下的分解。 3.如权利要求1或2任一所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens) CYSZG‑3的应用， 其特征在于， 分解蛋白质和多肽类物质的反应条件为中性或者弱碱性条 件。 4.如权利要求1或2任一所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens) CYSZG‑3的应用， 其特征在于， 应用解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefacien s)CYSZG‑ 3生产中性蛋白酶是在好氧 条件下进行生产的。 5.如权利要求1或2任一所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens) CYSZG‑3的应用， 其特征在于， 用解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens)CYSZG ‑3 生产中性蛋白酶是使用专用培 养基(豆粕粉)进行生产的。 6.如权利要求1或2任一所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens) CYSZG‑3的应用， 其特征在于， 所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens) CYSZG‑3产生的蛋白酶为270U/mL。 7.一种中性蛋白酶制剂， 其特征在于， 所述的中性蛋白酶制 剂采用如权利要求1所述的 解淀粉芽孢杆菌(Baci llus amyloliquefaciens)C YSZG‑3制备而成。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115094000 A 2一种产中性蛋白酶的解淀 粉芽孢杆菌CYS ZG‑3及其应用 技术领域 [0001]本发明是关于产中性蛋白酶菌种及其应用， 具体地说， 是关于产中性蛋白酶的解 淀粉芽孢杆菌(Baci llus amyloliquefaciens)C YSZG‑3的其相关应用。 背景技术 [0002]蛋白酶作为一种生物催化剂， 通过催化肽键水解将蛋白质类大分子物质分解为多 肽和氨基酸。 根据蛋白酶催化反应的最适pH值， 可将蛋白酶分为酸性蛋白酶(pH  2.5‑5.0)、 中性蛋白酶(pH 7.0‑8.0)和碱性蛋白酶(pH  9.5‑10.5)。 蛋白酶在全球酶制剂市场中占据 重要份额， 2019年蛋白酶产值约为13.4亿美元， 其中蛋白酶占到了工业 酶制剂市场的28％， 涉及到皮革加工、 肉类加工、 洗涤日化、 食品加工、 饲料加工、 生物活性肽、 生丝羽绒、 乳制品 加工等各个行业。 我国蛋白酶产业经过近50年的发展， 取得了较大进步， 但与国际先进企业 相比仍有一些差距。 如： 国内碱性蛋白酶品种仅有传 统的2709和1种基因改进型2709， 而国 外的碱性蛋白酶 品种有诺维信的Alcalase、 Esperase、 Savinase， 杜邦的Purafect  OX、 冷水 酶Properase、 P2000/P4000， 以及巴斯夫的Lavergy  Pro104L等， 中性蛋白酶的产酶菌种也 仅有枯草芽孢杆菌的AS  1.398。 因此， 开发新的产 酶菌种资源是目前 我国蛋白酶产业深入 发展亟需解决的问题， 具有重要战略价 值和实践生产意 义。 发明内容 [0003]为 解决 上 述的 问 题 ， 本发明 提出 一 种解 淀 粉 芽 孢杆 菌 (Ba ci l l us   amyloliquefaciens)CYSZG ‑3， 解淀粉芽孢杆菌， 作为中性蛋白酶的生产用菌种， 中性蛋白 酶用于皮革加工、 洗涤剂、 生物活性肽、 动物加工、 饲料等等蛋白原料的深加工行业。 本发明 还提及该菌的筛选方法、 酶活特性、 培养基配方和发酵生产条件。 本发 明提供一种如下的技 术方案： [0004]本 发 明 的 目 的 之 一 在 于 提 供 一 种 解 淀 粉 芽 孢 杆 菌 ( B a c i l l u s   amyloliquefaciens) CYSZG ‑3 ， 分类命名： 解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus   amyloliquefaciens)。 [0005]本 发 明 的 第 二 目 的 是 提 供 上 述 的 解 淀 粉 芽 孢 杆 菌 ( B a c i l l u s   amyloliquefaciens)CYSZG ‑3的应用， 所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus   amyloliquefaciens)CYSZG ‑3用于中性蛋白酶的生产， 优选用于皮革加工、 洗涤剂、 生物活 性肽、 动物加工、 饲料等 等蛋白原料的深加工行业。 [0006]本发明提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliqu efaciens)CYSZG ‑3可以以豆 粕粉作为主 要发酵培 养基原料进行发酵产酶。 [0007]应用解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliqu efaciens)CYSZG ‑3产生的蛋白酶可在 中性条件具有较高的蛋白水解活性， 对碱性条件具有一定的耐受能力。 [0008]一种中性蛋白酶产酶菌种， 所述的中性蛋白酶采用上述的解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus  amyloliquefacien s)CYSZG‑3制备而成， 该菌种可用于生产中性蛋白酶， 该蛋白说　明　书 1/5 页 3 CN 115094000 A 3