(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210646765.7 (22)申请日 2022.06.09 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 2021719 2021.0 6.15 (71)申请人 淮北师范大学 地址 235000 安徽省淮北市东 山路100号 (72)发明人 信丙越　刘舒　邓树林　李峰　 曾昕　曾化伟　 (74)专利代理 机构 西安铭泽知识产权代理事务 所(普通合伙) 61223 专利代理师 崔瑞迎 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 21/00(2006.01) C07K 1/14(2006.01)C07K 1/16(2006.01) A61K 38/16(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A23L 3/3526(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种产细菌 素的苏云金芽胞杆菌 XIN-LX43、 其产物及应用 (57)摘要 本发明属于微生物应用领域， 具体涉及一种 产细菌素的苏云金芽胞杆菌 XIN‑LX43、 其产物及 其应用。 该菌的分类命名为B acillus thuringe   nsis XiIN‑LX43， 保藏编号为CCTCC  NO： M  2021719； 产自所述苏云金芽胞杆菌XIN ‑LX43的 细菌素Thurisin  A5， 具有SEQ  ID NO.1所示的氨 基酸序列， 且该氨基酸序列的N末端修饰有甲酰 基。 本发明结果证明， 细菌 素Thurisin A5对蜡样 芽胞杆菌 单核细胞增生李斯特菌、 金黄色葡萄球 菌、 产气荚膜梭菌四类食源性病原菌具有高效的 抗菌活性， 且对真核动物红细胞无溶血活性， 对 真核动物体细胞无毒性， 具备生物安全性， 可 以 用于食品添加剂、 饲料添加剂、 药物等， 具有进 一 步开发利用的前 景。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图3页 CN 115109721 A 2022.09.27 CN 115109721 A 1.苏云金芽胞杆菌( Bacillus  thuringensis)XIN ‑LX43， 其保藏编号为CCTCC  NO： M  2021719。 2.一种产自权利 要求1所述苏云金芽胞杆菌XIN ‑LX43的细菌素， 其特征在于， 所述细菌 素具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列， 且该氨基酸序列的N末端修饰有甲酰基。 3.权利要求2所述细菌素的提取 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： S1、 将所述苏云金芽胞杆菌XIN ‑LX43发酵培养， 所得发酵液离心并用大孔吸附树脂过 柱吸附， 吸附后的柱料依次经过冲洗、 洗脱， 所得洗脱 液经浓缩、 冻干处理得到干粉， 获得的 干粉溶于质量百分比浓度5 0％的乙腈溶 液， 离心， 所获得的上清即为 粗提液； S2、 采用高效液相色谱对粗提液分离， 自动进样， 跑样， 收集主要对指示菌蜡样芽胞杆 菌CMCC63301具有抗菌活性的色谱峰， 经旋干、 冻 干处理得到SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序 列N末端修饰甲酰基的细菌素。 4.根据权利要求3所述细菌素的提取 方法， 其特 征在于， S2中， 色谱条件为： 色谱柱： Agi lent C18反相柱； 流动相： A相为含0.1％TFA的d dH2O， B相为乙腈； 流动相条件： 0 ‑40min， 10％‑60％乙腈梯度洗脱； 检测波长： 2 20nm； 流速： 1mL/mi n。 5.权利要求2所述细菌素在制备抗菌和/或防腐产品中的应用， 其特征在于所述抗菌 和/或防腐产品抑制蜡样芽胞杆菌、 单核细胞增生李 斯特菌、 金黄 色葡萄球菌和产气荚膜梭 菌中的任一种或多种。 6.一种抗菌和/或防腐产品， 其特 征在于， 包括权利要求2所述的细菌素。 7.权利要求2所述细菌素在制备治疗和/或预防细菌感染性疾病的药物中的应用， 其特 征在于， 所述细菌为蜡样芽胞杆菌、 单核细胞增生李 斯特菌、 金黄 色葡萄球菌和产气荚膜梭 菌中的任一种或多种。 8.一种治疗和/或预防细菌感染性疾病的药物， 其特征在于， 包括权利要求2所述的细 菌素。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115109721 A 2一种产细菌素的苏云金芽胞杆菌XIN ‑LX43、 其产物及应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物应用领域， 具体涉及一种产细菌素的苏云金芽胞杆菌  XIN‑ LX43、 其产物及其应用。 背景技术 [0002]食品腐败变质引起的食源性疾病严重威胁人类健康、 阻碍经济和社会的可持续发 展。 2015年世卫组织发布的 《全球食源性疾病负担的估算报告》 中指出每年全世界约6亿人 因食用受污染的食品而患病， 并有42万人死亡(包括5  岁以下儿童12.5万人)。 2018年世界 银行 《关于食源性疾病经济负担的报告》 中指出， 低收入和中等收入国家与食源性疾病相关 的生产力和医疗费用损失达  1100亿美元。 [0003]在诸多影响食品安全的因素 中微生物污染高居首位。 食品加工业通常使用食品防 腐剂来抑制或杀灭食品中的微生物、 防止食品的腐败变质、 延 长食品的保质期 。 食品防腐剂 按来源的不同分为化学食品防腐剂和天然食品防腐剂 。 传统的化学防腐剂虽然有较好的防 腐效果， 但使用不当会有一定副效应， 长期过量摄入会对人体健康造成一定损害。 天然食品 防腐剂不同于化学食品防腐 剂， 它是由生物体分泌或体内存在的、 具有抗菌作用的物质， 经 人工提取或加工后制成的一类食品防腐剂。 天然食品防腐剂是天然物质， 有的本身就是食 品的组分， 具有 无毒、 无残留、 高效、 不影响食品口感等特点， 是一类有重要发展 前景的食品 防腐剂。 在消费者日益追求天然、 绿色、 健康食品趋势下， 从动植物、 微生物中寻找安全、 无 毒、 高效的天然防腐剂是食品科学发展的主要研究方向， 也是提升食品产业效益和 安全性 的重要措施， 具有重要的研究和应用价 值。 [0004]细菌素(Bacteriocins)是细菌在生长过程中通过核糖体合成途径产生的一类具 有抗菌活性的多肽类或 蛋白类物质。 细菌素本身 具有很多优良属性： 体内、 体外的高效抗菌 活性； 对人体或动物无毒， 且易被动物消化道中的一些蛋白酶所降解而 无残留； 独特的抗菌 谱， 有很好的选择性杀菌效果； 易于生物改造， 满足人们不同的需求； 具有 热稳定性及耐酸、 碱能力， 便于贮藏； 本身无味， 不会影响食品、 饲料的口感、 味道； 使用后可降低食品的杀菌 温度、 减少热处 理时间， 因此能改进食品的营养价 值、 风味、 颜色等。 [0005]本发明要解决的技 术问题是： 发掘性能优良的细菌素及 细菌素产生菌 。 发明内容 [0006]本发明的目的之一是提供苏云金芽胞杆菌(Bacillus  thuringens)isXIN ‑ LX43， 其保藏编号 为CCTCC NO： M 2021719。 [0007]本发明的目的之二是提供一种产自所述苏云金芽胞杆菌XIN ‑LX43的细 菌素， 所述 细菌素具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列， 且该氨基酸序列的N末端修饰有甲酰基。 [0008]本发明的目的之三是提供 所述细菌素的提取 方法， 包括如下步骤： [0009]S1、 将所述苏云金芽胞杆菌XIN ‑LX43发酵培养， 所得发酵液离心并用大孔吸附树 脂过柱吸附， 吸附后的柱料依次经过冲洗、 洗脱， 所得洗脱 液经浓缩、 冻干处理得到干粉， 获说　明　书 1/6 页 3 CN 115109721 A 3